張傳津，牛華星，章安源，張志民，王同高

(1.山東省獸藥質(zhì)量檢驗(yàn)所,山東 濟(jì)南 250022;2. 山東中牧獸藥有限公司)

近年來由于獸藥的不合理使用，以及飼料發(fā)霉、細(xì)菌性、病毒性或寄生蟲等疾病或混合感染等因素所引起蛋雞的肝臟損害越來越多。肝臟損傷導(dǎo)致了蛋雞生產(chǎn)力的降低，極大地影響了蛋雞的生產(chǎn)性能，給蛋雞養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴(yán)重的危害。因此，對雞肝臟疾病的有效治療和控制，是目前蛋雞養(yǎng)殖業(yè)亟待解決的問題。芪術(shù)保肝口服液是采用現(xiàn)代中藥制劑工藝制成口服溶液劑，由黃芪、白術(shù)、梔子、板藍(lán)根、茵陳等組方而成，具有益氣養(yǎng)血，疏肝理脾的功效，主要用于治療雞的肝損傷。本實(shí)驗(yàn)研究了雞對芪術(shù)保肝口服液的耐受程度，及添加超過最大耐受劑量之后，實(shí)驗(yàn)雞可能出現(xiàn)的臨床癥狀及對其血液常規(guī)、血液生化指標(biāo)影響等，為具體給藥方案提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥品

芪術(shù)保肝口服液(100 mL/瓶)，批號為20190901，山東中牧獸藥有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動物

1日齡健康海蘭雞，公母兼有，飼養(yǎng)于嚴(yán)格消毒的籠舍中，自由飲水和采食，飼料為不添加任何藥物的全價(jià)飼料，育雛至7日齡備用。

1.3 儀器

600A/B全自動生化分析儀，北京普郎新技術(shù)有限公司。BC-11全自動血液細(xì)胞分析儀，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。

1.4 劑量與分組

將臨床觀察健康的7日齡雛雞，隨機(jī)分成4組，每組20只，體重均勻，各試驗(yàn)組雞均連續(xù)5 d飲水給藥，各組具體處理如表1。實(shí)驗(yàn)雞正常飲水，試驗(yàn)時(shí)間28 d，在整個試驗(yàn)期間實(shí)驗(yàn)雞自由釆食、飲水，并按常規(guī)程序進(jìn)行疫病免疫。

表1 試驗(yàn)分組與處理

1.5 觀察檢測指標(biāo)

1.5.1 一般健康狀況觀察 試驗(yàn)期間每天觀察各組試驗(yàn)雞只的精神、飲水、糞便等臨床體征，對死亡實(shí)驗(yàn)雞進(jìn)行剖檢，記錄相關(guān)病理學(xué)數(shù)據(jù)并分析具體死亡原因。

1.5.2 實(shí)驗(yàn)雞生長性能測定 在試驗(yàn)開始與結(jié)束時(shí)，對所有實(shí)驗(yàn)雞逐只稱重，計(jì)算各組實(shí)驗(yàn)雞平均體重。

1.5.3 血液常規(guī)指標(biāo) 于末次給藥后24 h，分別從各試驗(yàn)組隨機(jī)取10只實(shí)驗(yàn)雞，采血，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)，用血液細(xì)胞分析儀檢測血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)等主要血液學(xué)指標(biāo)。

1.5.4 血液生化指標(biāo) 于末次給藥后24 h，每組隨機(jī)取10只雞，采血并分離血清，進(jìn)行血清生化指標(biāo)測定：谷丙 轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌肝(CRE)等血液生化指標(biāo)。

1.5.5 組織病理學(xué)檢查 在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從各試驗(yàn)組隨機(jī)取實(shí)驗(yàn)雞，觀察臟器有無眼觀病理變化等，并釆集肝、脾、腎、法氏囊、十二指腸等組織，并進(jìn)行組織學(xué)檢査。

1.5.4 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示， 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件做統(tǒng)計(jì)分析與處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 對雞一般健康狀況的影響

試驗(yàn)期間每天上午、下午觀察并記錄各組實(shí)驗(yàn)雞臨床體征。試驗(yàn)期間各組實(shí)驗(yàn)雞均未見異常變化，精神、行為、采食、飲水、糞便正常，試驗(yàn)期間各組實(shí)驗(yàn)雞均無死亡。試驗(yàn)結(jié)果表明，連續(xù)5 d分別給實(shí)驗(yàn)雞飲水中添加2mL/L、6mL/L，10mL/L的芪術(shù)保肝口服液， 均對實(shí)驗(yàn)雞臨床體征無明顯的不良影響。

2.2 對實(shí)驗(yàn)雞體重的影響

各組實(shí)驗(yàn)雞體重結(jié)果顯示(見表2)，在5 d投藥試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組間實(shí)驗(yàn)雞體重差異 不顯著(P>0.05)；以上試驗(yàn)結(jié)果表明，連續(xù)5 d分別給實(shí)驗(yàn)雞飲水中添加2mL/L、6mL/L、10mL/L的芪術(shù)保肝口服液，均對實(shí)驗(yàn)雞體重未見明顯的影響。

表2 實(shí)驗(yàn)雞在體重變化情況 g

2.3 對血液常規(guī)指標(biāo)的影響

連續(xù)給藥5 d后，對各組雞血液常規(guī)指標(biāo)測定結(jié)果分別見表3。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示芪術(shù)保肝口服液各劑量組的血液常規(guī)指標(biāo)與對照組相比差異不顯著(P>0. 05)，3個柴芍口服液劑量添加組之間也均無顯著性差異(P>0.05)。

表3 實(shí)驗(yàn)雞血液學(xué)指標(biāo)結(jié)果(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

以上試驗(yàn)結(jié)果表明，連續(xù)5 d分別給實(shí)驗(yàn)雞飲水中添加2 mL/L、6 mL/L，10 mL/L的芪術(shù)保肝口服液，均對實(shí)驗(yàn)雞的血液常規(guī)指標(biāo)無明顯的影響(P>0.05)。

2.4 對血液生化指標(biāo)的影響

連續(xù)給藥5 d后，對各組雞血清生化指標(biāo)測定結(jié)果分別見表4。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，實(shí)驗(yàn)雞血液生化指標(biāo)與空白對照組比較均無顯著性差異(P>0.05)，同時(shí)3個芪術(shù)保肝口服液劑量添加組之間也均無顯著性差異(P>0.05)。

表4 實(shí)驗(yàn)雞血液生化指標(biāo)結(jié)果(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

以上試驗(yàn)結(jié)果表明，連續(xù)5 d分別給實(shí)驗(yàn)雞飲水中添加2mL/L、6mL/L、10mL/L的芪術(shù)保肝口服液，均未對實(shí)驗(yàn)雞血液生化指標(biāo)有明顯的影響(P>0.05)。

2.5 組織病理學(xué)檢査

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)對各組處死的雛雞進(jìn)行剖檢，發(fā)現(xiàn)各組臟器大小正常；胸腔、腹腔、心包無積液與黏連；肝、脾、腎色澤均勻。表面光滑，無腫大及包塊；腺胃、十二指腸亦未發(fā)現(xiàn)潰瘍、出血點(diǎn)及其他異常變，組織病理學(xué)切片檢查表明，3倍推薦劑量組、5倍推薦劑量組的肝、腎、脾、腺胃、法氏囊等主要臟器組織學(xué)結(jié)構(gòu)均未發(fā)現(xiàn)顯微病理學(xué)變化。

3 討論與結(jié)論

3.1 臨床用藥的安全性

本試驗(yàn)所采集的數(shù)據(jù)包括實(shí)驗(yàn)雞臨床體征， 以及血液學(xué)、臨床生化學(xué)等參數(shù)。1倍、3倍、5倍推薦劑量組均未對實(shí)驗(yàn)雞臨床體征、血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)及主要臟器等造成明顯的影響，各參數(shù)指標(biāo)與未用藥空白對照組相比無顯著性差異。試驗(yàn)結(jié)果表明芪術(shù)保肝口服液安全范圍大，具有較高的臨床用藥安全性。

3.2 臨床用藥的協(xié)同性

芪術(shù)保肝口服液以傳統(tǒng)中獸醫(yī)“君、臣、佐、使”的組方原則配伍，由黃芪、白術(shù)、板藍(lán)根、茵陳、當(dāng)歸等成份組成，全方益氣養(yǎng)血，疏肝理脾、清熱解毒、和中緩急，配伍十分精妙，散收結(jié)合、升中有降。試驗(yàn)的結(jié)果表明，芪術(shù)保肝口服液對雞肝損傷的臨床治療效果較好，確定了芪術(shù)保肝口服液的有效性，靶動物的安全性試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了芪術(shù)保肝口服液具備優(yōu)良中獸藥的特性，作為雞肝損傷的治療藥物切實(shí)可行，具有較高的臨床用藥安全性。