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        雞胚疫苗注射時(shí)蛋殼力學(xué)模型分析及參數(shù)優(yōu)化

        2021-05-09 08:30:54王紅彬趙明巖胡劍虹王宗煉宋天月劉弘業(yè)李運(yùn)良陶偉鵬
        關(guān)鍵詞:裂紋

        王紅彬,趙明巖,胡劍虹,王宗煉,宋天月,劉弘業(yè),李運(yùn)良,陶偉鵬

        (中國(guó)計(jì)量大學(xué)機(jī)電工程學(xué)院,杭州 310018)

        0 引 言1

        中國(guó)是肉雞生產(chǎn)和消費(fèi)大國(guó),生產(chǎn)量與消費(fèi)量?jī)H次于美國(guó)居世界第二位[1]。目前中國(guó)每年需要免疫的種雞超過50億羽,免疫密度達(dá)80%以上。近年來雞胚接種技術(shù)[2-3]迅速發(fā)展,已被30多個(gè)國(guó)家使用,美國(guó)有超過90%的肉雞孵化場(chǎng)使用自動(dòng)化蛋內(nèi)注射系統(tǒng),用以接種馬立克?。∕D)疫苗、新城疫苗等,極大地提高了雞胚免疫效率[4]。隨著人工成本的增加,國(guó)內(nèi)也逐步采用自動(dòng)化設(shè)備取代手工注射。但采用自動(dòng)化設(shè)備接種雞胚時(shí),針頭的沖擊會(huì)使雞胚(胚蛋殼)產(chǎn)生裂紋,導(dǎo)致免疫失效甚至死蛋現(xiàn)象[5],裂紋造成的廢胚率高達(dá)4%~5%。

        采用側(cè)孔針頭擊穿蛋殼并將免疫液注入是雞胚接種的關(guān)鍵。因此,必須對(duì)蛋殼受到針頭沖擊時(shí)的力學(xué)特性進(jìn)行分析。國(guó)內(nèi)外對(duì)蛋殼力學(xué)特性的研究分靜力學(xué)[6-10](對(duì)蛋殼進(jìn)行壓縮、拉伸、承壓等試驗(yàn),研究蛋殼抗壓縮、抗變形能力,彈性模量等)與動(dòng)力學(xué)[11-15](振動(dòng)、跌落和碰撞等)兩個(gè)方面。李碩等[16]采用ANSYS軟件對(duì)雞蛋模型進(jìn)行了靜力學(xué)分析,得出了雞蛋蛋殼受力變形和破碎的規(guī)律;Zhang[17]對(duì)鴨蛋進(jìn)行壓縮試驗(yàn),并采用有限元分析法模擬了蛋殼的靜載力學(xué)性能,證明尖端承受壓力大于鈍端;Priyadumkol等[18]采用反求法和有限元分析法確定蛋殼的力學(xué)性能;Ketelaere等[19]研究了雞蛋無破壞性沖擊產(chǎn)生的振動(dòng)頻譜,以此評(píng)價(jià)蛋殼特性及最低頻率響應(yīng)時(shí)產(chǎn)生的三維振動(dòng)模型,并分析了雞蛋動(dòng)態(tài)硬度值與蛋殼赤道處寬度、厚度、形狀指數(shù)的相關(guān)關(guān)系。Zhao等[20]通過對(duì)雞蛋殼的不同點(diǎn)進(jìn)行機(jī)械沖擊,通過動(dòng)態(tài)頻率響應(yīng)可實(shí)現(xiàn)蛋殼裂紋檢測(cè),旨在為食用雞蛋在加工、包裝和運(yùn)輸?shù)确矫嫣峁├碚撝笇?dǎo)。但上述研究均未涉及尖銳剛體刺穿蛋殼的相關(guān)試驗(yàn)。

        本文對(duì)接種時(shí)的胚蛋殼進(jìn)行動(dòng)力學(xué)特性研究并建立力學(xué)模型,通過ANSYS有限元分析驗(yàn)證該模型,搭建試驗(yàn)裝置并設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),尋找裂紋率最低的注射參數(shù),從而降低雞胚接種的廢胚率。

        1 蛋殼力學(xué)模型與分析

        1.1 結(jié)構(gòu)分析

        雞蛋外形一般可分為三部分:大頭為鈍端,小頭為銳端,橫向最長(zhǎng)距離處為赤道。不同種類和地區(qū)的雞蛋外觀存在差異,雞蛋外形一般可近似采用擬橢圓曲線[21-22]來描述。即

        式中a為長(zhǎng)半軸,mm;d為短半軸,mm;φ為蛋形角,(°);將(1)式轉(zhuǎn)化成參數(shù)方程為

        式中x、y分別為擬橢圓曲線邊緣橫縱坐標(biāo);是指橢圓曲線赤道處點(diǎn)A(d,0)的斜率的反切值,根據(jù)(2)式可繪出蛋殼模型,如圖1所示。

        選取江西吉安7~14日胚齡烏雞樣本孵化種蛋100枚,用數(shù)顯游標(biāo)卡尺(量程:0~150 mm,精度:0.03 mm)測(cè)量長(zhǎng)軸、短軸,經(jīng)冷光源照射,測(cè)出氣室面積(長(zhǎng)軸方向氣室投影面積)和氣室輪廓長(zhǎng)度,測(cè)量完后將此100枚種蛋敲碎,取蛋殼鈍端部分,去除內(nèi)皮后晾干,用測(cè)厚規(guī)測(cè)量鈍端厚度,測(cè)量數(shù)據(jù)如表1所示。

        表1 7~14日齡雞胚外觀參數(shù)測(cè)定Table.1 Measured parameters of 7 to 14 day's embryo

        1.2 力學(xué)模型建立

        雞胚接種時(shí),注射部位除羊膜腔之外,胚蛋的氣室、卵白、卵黃囊、尿囊均可作為有效注射部位[23]。對(duì)7~14日胚齡雞胚通過氣室注射的外源物質(zhì)易于被吸收,可降低注射液體對(duì)胚胎的應(yīng)激,不易出現(xiàn)機(jī)械損傷,注射操作較為簡(jiǎn)單。本研究對(duì)雞胚鈍端氣室進(jìn)行注射,建立注射時(shí)蛋殼的力學(xué)模型。

        設(shè)針頭刺穿蛋殼的最大作用范圍的半徑為Ar,注射體系質(zhì)量(與注射針頭相連的所有物體質(zhì)量之和)為m,針頭穿過蛋殼后距接觸點(diǎn)o的距離為x處針頭的瞬時(shí)速度為v,針頭剛接觸蛋殼的初速度為v0,如圖2a所示,由動(dòng)量守恒定律有

        式中M t(x)為針頭穿過蛋殼后距接觸點(diǎn)o的距離為x處的蛋殼體系的動(dòng)量。注射區(qū)域蛋殼的平均厚度為h,蛋殼密度為ρ,距離針頭柱體軸線為s的圓環(huán)上的點(diǎn),經(jīng)針頭沖擊后,該點(diǎn)發(fā)生了豎直方向的位移ξ,其坐標(biāo)為(r,)ξ,如圖2a所示,此時(shí)圓環(huán)的動(dòng)量為

        式(4)中'ξ為所選取微元的速度

        對(duì)式(4)積分可得

        采用側(cè)孔針頭,針頭形狀為錐形,針頭足夠尖銳時(shí),式(6)中rmin≈ 0。針頭沖擊蛋殼時(shí),距離針頭柱體中心為r的圓環(huán)(r≤R,取R= 0.75 mm )的瞬時(shí)速度與針尖瞬時(shí)速度相同,則針頭刺入過程中產(chǎn)生蛋殼碎塊的有效質(zhì)量可定義為

        由式(3)和(4)可得

        蛋殼的結(jié)構(gòu)由外殼、蛋殼膜和殼內(nèi)皮組成(圖2b)。針頭刺入過程中斷裂的小塊殼體仍依附在蛋殼內(nèi)皮上,未隨針頭飛落入氣室中,距刺入點(diǎn)o長(zhǎng)度為s的微元,形成殼碎片后到刺入點(diǎn)o的距離仍為s,即

        針頭錐形部位穿過蛋殼,注射動(dòng)作即可完成,此時(shí)

        由式(6)和(10)可得

        根據(jù)沖量定理[24],可知與針頭接觸的圓環(huán)對(duì)針頭的軸向合力為

        而單位長(zhǎng)度針孔根部圓周的軸向力為

        由圖2a中的幾何關(guān)系可知

        由式(5)和(14)可得徑向速度為

        若注射孔共產(chǎn)生n個(gè)斷裂殼碎片,每個(gè)碎片的質(zhì)量可定義為

        每個(gè)碎片的徑向動(dòng)量為

        同時(shí)可求出每個(gè)碎片所受的徑向合力Fy為

        則針孔根部圓周上單位長(zhǎng)度所受的徑向力fb及合力f分別為

        合力的方向與注射方向所成的夾角為θ',如圖2b所示。

        將(11)代入(20)中可得

        式中f為蛋殼注射孔根部單位長(zhǎng)度所受合力,N;ρ為蛋殼密度,kg/m3;m為注射體系質(zhì)量,kg;v0為注射初速度, m/s-1;β為針頭錐形角,(°);R為針頭柱體半徑,mm。

        由式(21)可知注射孔單位長(zhǎng)度所受合力f與蛋殼密度ρ、蛋殼厚度h、注射體系質(zhì)量m、注射初速度v0、針頭錐形角β有關(guān)。正常孵化的雞胚的蛋殼密度ρ和厚度h會(huì)略微變小,便于雛雞啄殼。本研究選用的樣本為7~14日胚齡雞胚,ρ和h的變化很小,視為定值。

        1.3 注射時(shí)蛋殼有限元分析

        為驗(yàn)證1.2節(jié)建立的力學(xué)模型的正確性、縮小注射參數(shù)范圍,同時(shí)進(jìn)一步探索雞胚注射過程中蛋殼變形量、應(yīng)力應(yīng)變隨錐形角、注射初速度及注射體系質(zhì)量的變化關(guān)系,采用ANSYS軟件對(duì)針頭沖擊蛋殼過程進(jìn)行仿真分析。

        蛋殼結(jié)構(gòu)復(fù)雜,宏觀上是一個(gè)薄壁體,其主要成分是CaCO3。假設(shè)蛋殼是均勻、連續(xù)、各向同性的[25]。蛋殼強(qiáng)度主要取決于殼體,其內(nèi)膜、蛋內(nèi)容積物對(duì)蛋殼強(qiáng)度影響很小,在研究中可忽略。

        使用ANSYS workbench中顯性動(dòng)力學(xué)(Exlicit Dynamics)模塊,在geometry中導(dǎo)入Solidworks已建蛋殼模型,垂直于雞胚鈍端注射。測(cè)得雞胚長(zhǎng)軸均值L為50.10 mm,短軸均值S為38.52 mm,鈍端厚度均值h為0.47 mm,蛋形角φ取10°;樣本蛋殼彈性模量和泊松比[26-27]平均值分別為E=27.85 GPa,μ=0.28,密度為2 532 kg/m3。針頭采用結(jié)構(gòu)鋼材料,密度為7 850 kg/m3。網(wǎng)格劃分時(shí),蛋殼采用正四面體單元,元素尺寸設(shè)為0.002 mm,針頭采用三維六面體的Solid95單元,元素尺寸設(shè)為0.001 mm。目前使用的側(cè)孔針頭,錐形角通常為5°、10°、15°,但5°針頭柱體半徑較小,剛度及強(qiáng)度較低,不適合注射蛋殼等硬度較大的材質(zhì),因此只需考慮10°和15°錐形角的針頭。添加Total Deformation模塊和Equivalent Stress模塊可求解出蛋殼注射孔變形量以及注射孔根部所受應(yīng)力。

        1.4 受力分析結(jié)果

        由1.2節(jié)建立的力學(xué)模型(式(21))可知,影響注射孔根部單位長(zhǎng)度所受合力f的主要因素有3個(gè)。采用單一變量法,改變其中一個(gè)因素,另外兩因素做組合,可繪制出f與注射初速度、針頭錐形角及注射體系質(zhì)量的變化關(guān)系,如圖3所示。

        由圖3a可知,蛋殼注射孔單位長(zhǎng)度所受合力f隨針頭注射初速度v0的增大而增大,且注射體系質(zhì)量m和針頭錐形角β越大,f增大速度越快;不難看出,f也隨β、m的增大而增大。

        根據(jù)1.3節(jié)雞胚注射有限元分析,可得圖4所示針頭沖擊雞胚蛋殼不同穿刺狀態(tài)下的應(yīng)變?cè)茍D。針頭未刺穿時(shí),蛋殼應(yīng)變較小(圖4a),蛋殼能恢復(fù)部分變形;針頭恰好刺穿時(shí),蛋殼有最大應(yīng)變,蛋殼破損較為嚴(yán)重(圖 4c);在能刺穿蛋殼情形下,通過調(diào)整注射參數(shù),可使蛋殼變形最?。▓D4b)。

        改變注射初速度v0,可得蛋殼變形量及所受應(yīng)力與v0的關(guān)系曲線(見圖5)。圖5b的總體變化趨勢(shì)與圖3b一致,可驗(yàn)證力學(xué)模型的準(zhǔn)確性。由圖5a可知,在v0= 0.4 m/s 附近,蛋殼變形量較大,此時(shí)蛋殼未被刺穿。v0增大后,針頭刺穿蛋殼,在v0= 0.6 m/s 附近,變形量較小。圖5b所示,v0增大時(shí),蛋殼所受應(yīng)力也在增大。相比其他組合,采用(β=10° ,m= 0.5 kg )及(β=10° ,m= 1.0 kg )組合,蛋殼注射孔變形量及所受應(yīng)力較小。綜合圖5的數(shù)據(jù),v0的范圍選在0.5~0.8 m/s較為合適。

        改變注射體系質(zhì)量m,可得蛋殼變形量及所受應(yīng)力與m的關(guān)系曲線(見圖6),由圖6b可知,蛋殼所受應(yīng)力隨m的變化趨勢(shì)與圖3c一致,進(jìn)一步驗(yàn)證了力學(xué)模型的準(zhǔn)確性。當(dāng)m< 0.3 kg 、v0< 0.4m/s時(shí),蛋殼未刺穿;當(dāng)m> 0.3 kg、v0≥0.4 m/s ,針頭刺穿蛋殼。在m= 1.0 kg、v0= 0.6 m/s附近,有較小變形量。當(dāng)m> 1.0 kg、v0> 0.6 m/s 后,蛋殼變形量與所受應(yīng)力逐漸增大。綜合圖6的數(shù)據(jù),m的范圍選為0.5~1.2 kg較為合適。

        由ANSYS軟件分析可初步確定注射初速度v0的范圍為0.5~0.8 m/s,注射體系質(zhì)量m的范圍為0.5~1.2 kg,針頭錐形角β為10°、15°。

        2 雞胚注射參數(shù)優(yōu)化試驗(yàn)

        2.1 計(jì)算機(jī)視覺技術(shù)檢測(cè)注射孔裂紋

        精準(zhǔn)識(shí)別注射孔裂紋是參數(shù)優(yōu)化的關(guān)鍵,注射后的雞胚,通過肉眼難以察覺微小裂紋,容易造成誤判。計(jì)算機(jī)視覺技術(shù)在裂紋檢測(cè)方面應(yīng)用較多[28-29],成本較低,且易實(shí)現(xiàn)。本研究采用計(jì)算機(jī)視覺技術(shù)對(duì)雞胚注射孔裂紋進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)步驟為:第一步:對(duì)相機(jī)進(jìn)行位置標(biāo)定(使用帶顯微功能的SNO745-10A系列CCD彩色相機(jī)),對(duì)注射后的雞胚背部進(jìn)行冷光源打光操作,采集圖像(圖像格式為PNG,位深度為24bit),如圖7a、7b所示;第二步:圖像去噪,為最大程度上去除圖像噪聲,同時(shí)保留注射孔裂紋細(xì)節(jié)部分。非線性濾波器能較好濾除脈沖干擾及掃描噪聲,同時(shí)保留輪廓邊緣信息,使用中值濾波器(Median Filter)和雙邊濾波器(Bilateral Filter)對(duì)雞胚注射孔區(qū)域圖像進(jìn)行濾波,通過對(duì)照發(fā)現(xiàn)雙邊濾波效果較好,濾波效果如圖7c;第三步:對(duì)濾波后的圖像進(jìn)行閾值分割,通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),閾值為135時(shí),能保留全部裂紋特性,但大部分亮斑無法消除,影響檢測(cè)效果;當(dāng)閾值從135增到173時(shí),雖去除部分亮斑,但裂紋特征不能有效保留;當(dāng)閾值大于173時(shí),則無法測(cè)得全部裂紋特征。閾值為135和173時(shí)效果圖如圖7d、7e所示。

        第四步:采用傳統(tǒng)閾值方法的分割效果不理想,本文提出一種雞胚亮斑消除算法,對(duì)閾值為135的二值化圖像進(jìn)行形態(tài)學(xué)開運(yùn)算,可完整保留裂紋特征,對(duì)開運(yùn)算后的圖像進(jìn)行Blob連通域檢測(cè),統(tǒng)計(jì)連通域標(biāo)記點(diǎn)數(shù)i(i=1,2,3,...),計(jì)算每個(gè)連通域最小外接矩長(zhǎng)邊im、短邊ni及連通域面積Si,找到最大連通域面積Smax即為注射孔像素面積,同時(shí)計(jì)算每個(gè)連通域圓形度C(iCi=mi/ni,圓形度Ci≈1,則連通域趨于圓形;Ci>>1時(shí),連通域越趨于線條形)。當(dāng)Ci>C0時(shí),則為有效裂紋,應(yīng)保留;若Ci<C0且Si<Smax時(shí),則為亮斑,應(yīng)填充。通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),圓形度C0=3時(shí)去除亮斑效果最好。圖8所示為網(wǎng)狀、線性、無裂紋雞胚亮斑消除效果。

        第五步:對(duì)有效裂紋進(jìn)行像素累加計(jì)算,可得雞胚注射孔有效裂紋像素面積和有效裂紋輪廓長(zhǎng)度,由于相機(jī)位置已標(biāo)定,可求得注射孔有效裂紋實(shí)際面積和有效裂紋實(shí)際輪廓長(zhǎng)度。

        2.2 裂紋蛋與完好蛋的判別指標(biāo)

        圖9a、圖9b分別為完好蛋胚及裂紋蛋胚。為保證試驗(yàn)均一性和可靠性,定義裂紋有效面積指數(shù)SΔ 和裂紋有效長(zhǎng)度指數(shù)LΔ 兩個(gè)參數(shù),以此來判別雞胚是否注射成功。計(jì)算式分別為

        式中P為有效裂紋實(shí)際面積,mm2;Q為有效裂紋實(shí)際輪廓長(zhǎng)度,mm;R為針頭柱體半徑,mm;0L為氣室輪廓長(zhǎng)度,mm;S0為氣室面積,mm2。

        隨機(jī)選取注射失敗的雞胚,通過計(jì)算機(jī)視覺技術(shù)測(cè)量出注射孔有效裂紋實(shí)際面積及有效裂紋實(shí)際輪廓長(zhǎng)度,取多組測(cè)試平均值分別為:P= 19.60 mm2,Q= 12.56 mm 。根據(jù)表1中測(cè)量的數(shù)據(jù)可知L0= 42.30 mm ,S0= 140.54 mm 。

        根據(jù)式(22)、式(23),當(dāng) ΔS≥ 12.69%或 ΔL≥18.56%時(shí),即可被識(shí)別為裂紋雞胚;當(dāng) 0<ΔS< 12.69%且0 <ΔL< 18.56%時(shí),可判別為完好雞胚。

        2.3 試驗(yàn)裝置與方法

        為確定雞胚注射最優(yōu)參數(shù),搭建了試驗(yàn)裝置,試驗(yàn)裝置集成了高速攝像機(jī)測(cè)速單元、注射系統(tǒng)、緩沖機(jī)構(gòu)及雞胚注射孔裂紋檢測(cè)裝置,如圖10所示。

        選取針頭錐形角度1x,注射體系質(zhì)量x2,注射初速度3x,3個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn),求解注裂紋率最小的參數(shù)組合,根據(jù)預(yù)試驗(yàn)選取各個(gè)因素的水平值,如表2所示。

        表2 正交試驗(yàn)因素水平Table 2 Factors and levels of orthogonal tests

        2.4 試驗(yàn)結(jié)果與分析

        選用L8(27)正交表安排試驗(yàn)[30],共8組,每組試驗(yàn)重復(fù)100次,統(tǒng)計(jì)其注射成功率(每組中,注射后完好雞胚數(shù)量與總雞胚數(shù)量之比)。設(shè)試驗(yàn)注射成功率結(jié)果為Y1,Y2,…,Yn,對(duì)所用正交表的第j列(包括空列),令Kjl為第j列中相應(yīng)于水平l(l=1,2, …,r)的m個(gè)試驗(yàn)結(jié)果之和。正交試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

        表3 正交試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Results of orthogonal tests

        查表得臨界值為:F0.9(01,1) = 39.9,F(xiàn)0.95(1,1)=161.4,F(xiàn)0.99(1,1) = 4052。列出方差分析,如表4所示。

        表4 正交試驗(yàn)方差分析Table 4 Analysis of variance for orthogonal experiment

        由表4可知,F(xiàn)x1×x2、Fx2×x3、Fx1×x3的值很小,表明交互作用x1×x2、x2×x3、x1×x3是影響注射成功率的次要因素,交互作用不顯著。將交互作用項(xiàng)的平方和與自由度合并到誤差項(xiàng)中,重新查出臨界值可得:F0.9(01, 4) = 4.54,F(xiàn)0.95(1, 4) = 7.71,F(xiàn)0.99(1, 4)=21.20,得到修正后的方差分析表如圖表5所示。

        表5 修正后的方差分析Table 5 Modified ANOVA

        由圖表5可知,顯著性水平:Fx2>Fx3>Fx1,即雞胚注射時(shí),對(duì)蛋殼產(chǎn)生裂紋的作用影響大小分別為:注射體系質(zhì)量m、注射初速度v0和針頭錐形角β。對(duì)于因素x1、K11>K12,故較優(yōu)水平為x11;對(duì)于因素x2,由K22>K21,故較優(yōu)的水平為x22;對(duì)因素x3,由K31>K32,故較優(yōu)水平為x31;因此最優(yōu)注射參數(shù)組合為:x11x22x31。即針頭錐形角10°、注射體系質(zhì)量1.0 kg、注射初速度0.6 m/s。采用江西吉安烏雞樣本種蛋80枚,進(jìn)行優(yōu)化參數(shù)組合試驗(yàn),注射成功率為98.75%。

        3 結(jié) 論

        1)建立了蛋殼注射時(shí)力學(xué)分析模型,由沖量定理和動(dòng)量守恒定律,推導(dǎo)出注射孔單位長(zhǎng)度所受合力f與注射初速度0v、注射體系質(zhì)量m及針頭錐形角β之間的關(guān)系;

        2)由ANSYS19.2有限元仿真分析,驗(yàn)證了力學(xué)模型的準(zhǔn)確性,同時(shí)確定注射初速度0v的范圍為0.5~0.8 m/s,注射體系質(zhì)量m為0.5~1.2 kg,針頭錐形角β為10°和15°;

        3)提出了蛋殼亮斑消除算法,通過機(jī)器視覺技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)注射孔裂紋特征的提取,設(shè)計(jì)并搭建了試驗(yàn)裝置,計(jì)算注射孔裂紋有效面積指數(shù)ΔS和裂紋有效輪廓指數(shù)LΔ ,實(shí)現(xiàn)裂紋雞胚與完好雞胚的判別;

        4)設(shè)計(jì)了正交試驗(yàn),采用三因素二水平有交互作用的方差分析法,確定最優(yōu)注射參數(shù)組合為v0= 0.6m/s 、β=10°、m=1.0 kg。采用優(yōu)化后的參數(shù)組合,注射成功率為98.75%。

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