劉景晨 李蕾 徐兵 孫曙光

【摘要】 缺氧是中晚期視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（retinoblastoma，RB）發(fā)生率非常高的微環(huán)境改變，缺氧調(diào)節(jié)的主要因子低氧誘導(dǎo)因子-1α（Hypoxia inducible factors-1α，HIF-1α）在RB的腫瘤生物學(xué)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。因此，HIF-1α在RB腫瘤生物學(xué)中的作用研究是開發(fā)新的抗RB藥物及治療的重點(diǎn)所在，本文對(duì)HIF-1α在RB腫瘤生物學(xué)方面的作用及基于HIF-1α抗RB研究的方面做一綜述，為RB的治療尋找新的方向。

【關(guān)鍵詞】 缺氧誘導(dǎo)因子-1α 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 腫瘤生物學(xué) 化療

[Abstract] Hypoxia is a very high incidence of microenvironmental changes in advanced retinoblastoma（RB）. Hypoxia-inducible factor-1α（HIF-1α）， the key factor in the regulation of hypoxia microenvironment， plays a key role in retinoblastoma cell proliferation，tumor metastasis， tumor angiogenesis， drug resistance generation and differentiation of tumor stem cells. Therefore， the study on the role of HIF-1α in RB tumor biology is the focus of the development of new anti-rb drugs and treatments. In this paper， the biological role of HIF-1α in RB tumor and the anti-RB research based on HIF-1α were reviewed， so as to find a new direction for the treatment of RB.

[Key words] Hypoxia inducible factors-1α Retinoblastoma Tumor biology chemotherapy

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（Retinoblastoma，RB）是5歲以下的兒童眼部發(fā)病率最高的惡性腫瘤，在全球范圍內(nèi)該病的發(fā)病率為1/15 000～1/20 000，在全部?jī)和旅ば约膊≈屑s占5%，具有高侵襲性和轉(zhuǎn)移性[1-4]。由于亞太地區(qū)人口的爆發(fā)性增長(zhǎng)，使該地區(qū)的RB患者數(shù)量達(dá)到全球的43%[5]，但較差的社會(huì)經(jīng)濟(jì)及醫(yī)療水平，使得很多患兒不能得到及時(shí)的診斷與治療，在我國(guó)西南部地區(qū)，部分患兒就診時(shí)已處于臨床中晚期[6]，因此該病一直是眼科的熱點(diǎn)，隨著對(duì)RB認(rèn)識(shí)的不斷深入，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)HIF-1α與RB的疾病進(jìn)展密切相關(guān)。

缺氧是迅速增長(zhǎng)的腫瘤組織內(nèi)由于循環(huán)供應(yīng)不足而產(chǎn)生的一種生理效應(yīng)[7]，腫瘤細(xì)胞內(nèi)多種與腫瘤生物學(xué)相關(guān)的基因在氧缺乏情況下可發(fā)生轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的改變，在腫瘤適應(yīng)缺氧的調(diào)節(jié)中以HIF-1α最為重要[8]。在腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移中，HIF-1α及其調(diào)控的相關(guān)因子起關(guān)鍵作用，高表達(dá)的HIF-1α預(yù)示著腫瘤不良的預(yù)后[9]。HIF-1是一種具有轉(zhuǎn)錄活性的異二聚體轉(zhuǎn)錄因子，由α和β兩個(gè)亞基組成，β亞基的mRNA和蛋白在常氧及低氧時(shí)均維持在恒定的水平，是非氧調(diào)節(jié)亞基。α亞基是氧調(diào)節(jié)亞基，細(xì)胞氧供應(yīng)充足時(shí)，在泛素化-蛋白酶體途徑作用下降解，難于發(fā)揮生物學(xué)作用。但在缺氧時(shí)，泛素化途徑受到抑制，HIF-1α降解減少而在細(xì)胞內(nèi)積累，在細(xì)胞核中與HIF-1的β亞基特異性地結(jié)合為有轉(zhuǎn)錄活性的二聚體結(jié)構(gòu)，激活細(xì)胞增殖、分化、凋亡、血管生成、腫瘤侵襲等基因的轉(zhuǎn)錄[10]，使癌細(xì)胞適應(yīng)缺氧環(huán)境并促進(jìn)癌癥的進(jìn)展，導(dǎo)致RB的不良預(yù)后及對(duì)傳統(tǒng)治療方法的抵抗[11]。

1 RB組織的缺氧微環(huán)境及HIF-1α高表達(dá)

腫瘤內(nèi)氧供應(yīng)與腫瘤細(xì)胞和毛細(xì)血管的距離有關(guān)，隨著距離增加，氧濃度下降，細(xì)胞出現(xiàn)氧供應(yīng)不足，當(dāng)距離大于氧氣的擴(kuò)散范圍（100～200 μm）時(shí)，可以導(dǎo)致缺氧微環(huán)境的形成[12]。腫瘤細(xì)胞氧供應(yīng)不足時(shí)，HIF-1a的表達(dá)增多，可以通過(guò)調(diào)控不同基因的表達(dá)，以適應(yīng)低氧環(huán)境[13]。岳晗[14]通過(guò)免疫組化分析39只眼的RB組織標(biāo)本研究發(fā)現(xiàn)，有29例標(biāo)本的HIF-1α呈陽(yáng)性，陽(yáng)性率達(dá)74.4%，且在RB瘤體中HIF-1α的高表達(dá)多位于邊緣地帶，可能和RB增殖過(guò)程中邊緣區(qū)血管分布較少，氧供應(yīng)不足有關(guān)。Sudhakar等[15]通過(guò)對(duì)42例RB組織免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，83%的病例中HIF-1α呈陽(yáng)性表達(dá)，證實(shí)缺氧微環(huán)境在中晚期RB患者瘤體內(nèi)普遍存在。游志鵬等[16]對(duì)國(guó)內(nèi)RB標(biāo)本的研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1α主要表達(dá)于RB的細(xì)胞核及部分胞漿，不同臨床分期的RB的HIF-1α的表達(dá)程度不同，兩者呈正相關(guān)。

2 HIF-1α與RB腫瘤生物學(xué)

2.1 HIF-1α對(duì)RB增殖和存活的影響 快速增殖是腫瘤的特征，缺氧條件下HIF-1α與腫瘤細(xì)胞的增殖密切相關(guān)，F(xiàn)ernandes等[17]發(fā)現(xiàn)在Y79系RB細(xì)胞中抑制HIF-1α的表達(dá)后，可以導(dǎo)致RB細(xì)胞的增殖能力明顯降低。郎莉莉等[18]使用siRNA技術(shù)沉默Y79細(xì)胞中HIF-1ɑ的表達(dá)后，發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中Bax/Bcl-2比值升高、繼而活化Caspase-9和Caspase-3，誘導(dǎo)Y79細(xì)胞的凋亡。夏天等[19]對(duì)RB移植瘤裸鼠進(jìn)行瘤體內(nèi)多點(diǎn)注射HIF-1αsiRNA，在對(duì)比實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組發(fā)現(xiàn)，在相同的觀察時(shí)間內(nèi)，實(shí)驗(yàn)組的RB瘤體生長(zhǎng)速度明顯慢于對(duì)照組，且腫瘤的重量低于對(duì)照組裸鼠，說(shuō)明在裸鼠體內(nèi)，HIF-1αsiRNA沉默HIF-1α基因后，可以有效的抑制RB移植瘤增殖。另外Xia等[20]也發(fā)現(xiàn)在缺氧條件下，誘導(dǎo)HIF-1α沉默后，WERI-RB1細(xì)胞內(nèi)凋亡抑制蛋白Survivin mRNA的水平下降，細(xì)胞的增殖降低，凋亡增加。說(shuō)明HIF-1α在缺氧狀態(tài)下與RB細(xì)胞增殖關(guān)系密切，沉默HIF-1α的表達(dá)，可使RB的增殖降低，細(xì)胞的凋亡增加。

2.2 HIF-1α對(duì)RB侵襲和轉(zhuǎn)移的影響 基質(zhì)金屬蛋白酶家族（MMPs）具有降解細(xì)胞外基質(zhì)的功能，在惡性腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，資料表明HIF-1α可以調(diào)控該家族中MMP-2、MMP-9的表達(dá)[21]，促進(jìn)RB的發(fā)展，并提示腫瘤的不良預(yù)后[22]。Wan等[23]通過(guò)對(duì)45例RB組織和15例正常視網(wǎng)膜組織的MMP-2表達(dá)情況分析發(fā)現(xiàn)，與正常視網(wǎng)膜組織相比，MMP-2在RB中的表達(dá)明顯升高，且在未分化的RB組織及有視神經(jīng)轉(zhuǎn)移的標(biāo)本中，MMP-2有更高的表達(dá)水平，表明MMP-2的高表達(dá)可以促進(jìn)RB侵犯視神經(jīng)。另外Long等[24]對(duì)41例RB標(biāo)本的研究也證實(shí)，在腫瘤標(biāo)本中MMP-2和MMP-9的表達(dá)升高，且在有視神經(jīng)侵犯的RB中具有更高的表達(dá)水平。Li等[25]人體外研究發(fā)現(xiàn)，在缺氧條件下的HXO-RB44細(xì)胞中，活化的HIF-1α對(duì)MMP9的轉(zhuǎn)錄有明顯的激活作用，促進(jìn)基底膜降解，從而增加HXO-RB44細(xì)胞的侵襲能力。因此HIF-1α可通過(guò)調(diào)控MMP-2、MMP-9基因的表達(dá)而促進(jìn)RB的侵襲和轉(zhuǎn)移。

2.3 HIF-1α促進(jìn)RB腫瘤血管的生成 血管生成是在相關(guān)細(xì)胞因子的作用下，刺激已有的血管產(chǎn)生新的毛細(xì)血管的過(guò)程，是腫瘤適應(yīng)缺氧狀態(tài)的一種反應(yīng)[21]，血管生成被認(rèn)為是癌癥的標(biāo)志[26]，對(duì)于腫瘤的持續(xù)生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移至關(guān)重要[27]，新生成的血管在結(jié)構(gòu)和功能上存在異常，使得腫瘤細(xì)胞容易進(jìn)入新生血管，進(jìn)而由血液系統(tǒng)向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[28]。HIF-1α在體內(nèi)可以調(diào)控血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)，參與調(diào)控腫瘤新生血管的形成[21，29]。研究表明在RB組織切片中HIF-1α與VEGF均呈高表達(dá)，兩者的表達(dá)水平呈正相關(guān)，且在腫瘤的不同區(qū)域，兩者的表達(dá)具有較高的一致性[14]。另外Wu等[30]發(fā)現(xiàn)相對(duì)于視神經(jīng)未受累的病例，在受累病例的RB組織中具有更高的VEGF水平，且在低分化區(qū)RB組織VEGF表達(dá)水平要明顯高于高分化區(qū)。說(shuō)明VEGF過(guò)表達(dá)可能促進(jìn)RB向視神經(jīng)轉(zhuǎn)移，與不良的預(yù)后相關(guān)。

2.4 HIF-1α增加RB對(duì)化療的耐藥性 化療的耐藥性是當(dāng)前臨床抗腫瘤治療的難題，腫瘤細(xì)胞微環(huán)境在腫瘤化療耐藥作用中扮演著重要的角色[31]，缺氧是最常見的腫瘤微環(huán)境，當(dāng)前的化療針對(duì)的是高氧和增殖的癌細(xì)胞，但對(duì)低氧細(xì)胞的效果較差[21]。當(dāng)腫瘤細(xì)胞處于缺氧條件下，其新陳代謝和增殖速度緩慢，易出現(xiàn)對(duì)化療藥物的不敏感[32]。Gao等[33]在體外使用腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）作用于Y79系RB細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞中的HIF-1α高表達(dá)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞對(duì)化療藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性和細(xì)胞凋亡的抵抗性增強(qiáng)，而在使用siRNA沉默HIF-1α的表達(dá)后，Y79細(xì)胞對(duì)藥物的抵抗性降低。Yin等[34]發(fā)現(xiàn)，缺氧時(shí)RB細(xì)胞內(nèi)的HIF-1α可與lncRNA ANRIL的啟動(dòng)子相互結(jié)合，促進(jìn)ANRIL的表達(dá)，通過(guò)ANRIL使耐藥相關(guān)蛋白（ABCG2和MDR1）得表達(dá)增強(qiáng)，使RB細(xì)胞對(duì)順鉑的抵抗力增加，細(xì)胞的凋亡減少。說(shuō)明缺氧時(shí)細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)的HIF-1α可調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的相關(guān)的基因表達(dá)，誘導(dǎo)與耐藥有關(guān)的因子表達(dá)增加，增加RB細(xì)胞對(duì)化療藥物的抵抗力。

2.5 HIF-1α促進(jìn)RB腫瘤干細(xì)胞形成 腫瘤干細(xì)胞（CSCs）是腫瘤細(xì)胞中具有類似正常干細(xì)胞特性[35]，能自我更新、多向分化及無(wú)限增殖的一個(gè)亞群，同時(shí)又體現(xiàn)出對(duì)化療藥的抗藥性、極強(qiáng)的成瘤性及較強(qiáng)的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[36]，傳統(tǒng)的化療藥物對(duì)腫瘤干細(xì)胞的治療效果不大，非干細(xì)胞特性的腫瘤細(xì)胞經(jīng)化療后消失，殘留的腫瘤干細(xì)胞可繼續(xù)快速增殖，由此形成的復(fù)發(fā)腫瘤將具有更強(qiáng)的耐藥性[37]，后續(xù)治療極為困難，因此對(duì)CSCs研究是治療腫瘤的一個(gè)重要方向。資料表明在腫瘤細(xì)胞中，HIF-1α對(duì)CSCs的誘導(dǎo)和增殖具有明顯的影響[7]。張麗娜等[38]對(duì)Y79系RB細(xì)胞進(jìn)行低氧培養(yǎng)后，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)ATP結(jié)合盒膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2（ABCG2）及神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NES）發(fā)現(xiàn)，在低氧組RB細(xì)胞中RB細(xì)胞標(biāo)記物NES蛋白呈陽(yáng)性的細(xì)胞明顯低于正常組和預(yù)處理組，而腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)志物ABCG2蛋白表達(dá)呈陽(yáng)性的細(xì)胞明顯高于正常組和預(yù)處理組，說(shuō)明低氧組可以誘導(dǎo)部分RB細(xì)胞去分化為腫瘤干細(xì)胞，但在使用雷帕霉素處理的預(yù)處理組，由于雷帕霉素對(duì)HIF-1α活性具有抑制作用，其ABCG2蛋白及NES蛋白檢測(cè)陽(yáng)性率與正常培養(yǎng)組無(wú)差異，缺氧誘導(dǎo)RB細(xì)胞去分化為腫瘤干細(xì)胞的作用不明顯，證實(shí)在氧供應(yīng)不足情況下，HIF-1α是誘導(dǎo)RB細(xì)胞去分化為腫瘤干細(xì)胞的重要調(diào)節(jié)因子。

3 針對(duì)HIF-1α的RB治療

3.1 小干擾RNA（small interference RNA，siRNA） siRNA通過(guò)RNA干擾機(jī)制，可以實(shí)現(xiàn)高效的靶基因沉默，影響基因表達(dá)，調(diào)節(jié)基因活性，因而在腫瘤治療方面受到廣泛關(guān)注[39]。Gao等[11]通過(guò)siRNA抑制Y79系RB細(xì)胞中HIF-1α的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)下調(diào)HIF-1α后，Bax/Bcl-2比值升高，Caspase-9及Caspase-3激活，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖減少，細(xì)胞的凋亡增加，并發(fā)現(xiàn)缺氧狀態(tài)下這種抑制作用更敏感。夏天等[19]通過(guò)對(duì)RB移植瘤裸鼠模型瘤體內(nèi)多點(diǎn)注射HIF-1αsiRNA干擾瘤體內(nèi)HIF-1α的表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比在相同的時(shí)間點(diǎn)，干擾組裸鼠RB皮下移植瘤生長(zhǎng)明顯減慢，瘤體腫瘤明顯減輕，說(shuō)明HIF-1α對(duì)裸鼠體內(nèi)的RB移植瘤的增殖有促進(jìn)作用，通過(guò)siRNA技術(shù)沉默HIF-1α表達(dá)，進(jìn)而抑制RB生長(zhǎng)，可作為RB治療的一個(gè)研究方向。

3.2 色素上皮衍生因子 色素上皮衍生因子（PEDF）是一種有效的眼部血管生成抑制劑[40]，早期資料表明，PEDF可刺激RB的分化，具有抗血管生成、抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用[41]，使其受到研究者的廣泛關(guān)注。Yang等[42]通過(guò)使用PEDF作用于SO-RB50細(xì)胞及SO-RB50小鼠模型后，發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)中HIF-1α的表達(dá)均被PEDF下調(diào)，并且降低了HIF-1α向細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)，減少了腫瘤細(xì)胞中受HIF-1a調(diào)控的VEGF的表達(dá)，VEGF的表達(dá)下降導(dǎo)致其旁分泌作用減弱，對(duì)RB組織中內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管通透的影響降低，從而抑制了RB的生長(zhǎng)。

3.3 中藥治療 中藥在抗RB治療方面是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，多種中藥成分證實(shí)對(duì)腫瘤缺氧具有治療作用[43-45]，雷公藤紅素是雷公藤中的具有生物活性的天然化合物[46]，Li等[47]研究發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素對(duì)缺氧誘導(dǎo)的HIF-1α和VEGF有明顯抑制作用，在體外培養(yǎng)的雞胚絨毛尿囊膜中，改善藥物水溶性的雷公藤紅素的納米微球（CNMs）能抑制SO-Rb50細(xì)胞誘導(dǎo)的血管發(fā)芽和血管形成。另外在SO-Rb50異種移植的NOD-SCID的小鼠使用CNMs進(jìn)行腹部注射治療，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，相同時(shí)間點(diǎn)，CNMs注射組的腫瘤重量和體積顯著降低，腫瘤血管生成減少。提示CNMs可能是通過(guò)靶向HIF-1α/VEGF通路，抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤生長(zhǎng)和血管生成。

4 展望

作為RB缺氧調(diào)節(jié)最關(guān)鍵的因子HIF-1α，其在RB細(xì)胞的多種生物學(xué)方面發(fā)揮著重要作用，目前靶向HIF-1α治療RB的藥物尚未應(yīng)用于臨床，但隨著對(duì)RB缺氧微環(huán)境及HIF-1α研究的不斷深入，以靶向HIF-1α基礎(chǔ)，抑制RB細(xì)胞耐藥、血管形成、細(xì)胞增殖等治療方式將不斷出現(xiàn)，為RB治療提供新思路和新選擇，幫助更多的患兒遠(yuǎn)離疾病的痛苦。

參考文獻(xiàn)

[1] Ke F，Yu J，Chen W，et al.The anti-malarial atovaquone selectively increases chemosensitivity in retinoblastoma via mitochondrial dysfunction-dependent oxidative damage and Akt/AMPK/mTOR inhibition[J].Biochem Biophys Res Commun，2018，504（2）：374-379.

[2] Soliman S E， VandenHoven C， MacKeen L D，et al. Secondary Prevention of Retinoblastoma Revisited： Laser Photocoagulation of Invisible New Retinoblastoma[J].Ophthalmology，2020，127（1）：122-127.

[3] Rao R， Honavar S G. Retinoblastoma[J].Indian J Pediatr，2017，84（12）：937-944.

[4] Yang M，Wei W.Long non-coding RNAs in retinoblastoma[J].Pathol Res Pract，2019，215（8）：152435.

[5] Jain M，Rojanaporn D，Chawla B，et al.Retinoblastoma in Asia[J].Eye （Lond），2019，33（1）：87-96.

[6] Gao J，Zeng J，Guo B，et al.Clinical presentation and treatment outcome of retinoblastoma in children of South Western China[J].Medicine （Baltimore），2016，95（42）：e5204.

[7] Hajizadeh F，Okoye I，Esmaily M，et al.Hypoxia inducible factors in the tumor microenvironment as therapeutic targets of cancer stem cells[J].Life Sci，2019，237：116952.

[8] Peng X，Gao H，Xu R，et al.The interplay between HIF-1α and noncoding RNAs in cancer[J].J Exp Clin Cancer Res，2020，39（1）：27.

[9] Lin M C，Lin J J，Hsu C L，et al. GATA3 interacts with and stabilizes HIF-1α to enhance cancer cell invasiveness[J].Oncogene，2017，36（30）：4243-4252.

[10] Tang W，Zhao G.Small molecules targeting HIF-1α pathway for cancer therapy in recent years[J].Bioorg Med Chem，2020，28（2）：115235.

[11] Gao Y，Jing M，Ge R，et al.Inhibition of Hypoxia Inducible Factor 1α by siRNA-Induced Apoptosis in Human Retinoblastoma Cells[J].Journal of Biochemical & Molecular Toxicology，2014，28（9）：394-399.

[12] Gilkes D M，Semenza G L，Wirtz D.Hypoxia and the extracellular matrix： drivers of tumour metastasis[J].Nature Reviews Cancer，2014，14（6）：430-439.

[13] Soni S，Padwad Y S.HIF-1 in cancer therapy： two decade long story of a transcription factor[J].Acta Oncol，2017，56（4）：503-515.

[14]岳晗.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中HIF-1α的區(qū)域性表達(dá)及其與增殖、凋亡和新生血管生成的關(guān)系[D].上海：復(fù)旦大學(xué)，2011.

[15] Sudhakar J，Venkatesan N，Lakshmanan S，et al.Hypoxic tumor microenvironment in advanced retinoblastoma[J].Pediatr Blood Cancer，2013，60（10）：1598-1601.

[16]游志鵬，宋華，趙菊蓮.HIF-1α在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2009，19（18）：2844-2846，2849.

[17] Fernandes B F，Coates J，Odashiro A N，et al.Hypoxia-inducible factor-1α and its role in the proliferation of retinoblastoma cells[J].Pathol Oncol Res，2014，20（3）：557-563.

[18]郎莉莉，高玉，葛茸茸，等.siRNA抑制缺氧誘導(dǎo)因子-1ɑ表達(dá)對(duì)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖與凋亡的影響[J].海軍醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（1）：22-26.

[19]夏天.沉默缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1α基因?qū)σ暰W(wǎng)膜母細(xì)胞瘤生長(zhǎng)與凋亡的影響[D].鄭州：鄭州大學(xué)，2013.

[20] Xia T，Cheng H，Zhu Y.Knockdown of hypoxia-inducible factor-1 alpha reduces proliferation， induces apoptosis and attenuates the aggressive phenotype of retinoblastoma WERI-Rb-1 cells under hypoxic conditions[J].Ann Clin Lab Sci，2014，44（2）：134-144.

[21] Schito L，Semenza G L.Hypoxia-Inducible Factors： Master Regulators of Cancer Progression[J].Trends in Cancer，2016，2（12）：758-770.

[22] Zhu J，Zhang X，Ai L，Yuan R， et al.Clinicohistopathological implications of MMP/VEGF expression in retinoblastoma： a combined meta-analysis and bioinformatics analysis[J].J Transl Med，2019，17（1）：226.

[23] Wan W C，Jin X M，Zheng G Y，et al.how expressions of claudin-1 and mmp-2 in retinoblastoma correlate with histological differentiation and optic nerve invasion[J].J Biol Regul Homeost Agents，2015，29（2）：373-378.

[24] Long H，Zhou B，Jiang F G.Expression of MMP-2 and MMP-9 in retinoblastoma and their significance[J].Int J Ophthalmol，2011，4（5）：489-491.

[25] Li Y Y，Zheng Y L.Hypoxia promotes invasion of retinoblastoma cells in vitro by upregulating HIF-1α/MMP9 signaling pathway[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2017，21（23）：5361-5369.

[26] Tang E，Wang Y，Liu T，et al.Gastrin promotes angiogenesis by activating HIF-1α/β-catenin/VEGF signaling in gastric cancer[J].Gene，2019，704：42-48.

[27] Dewangan J，Srivastava S，Mishra S，et al.Salinomycin inhibits breast cancer progression via targeting HIF-1α/VEGF mediated tumor angiogenesis in vitro and in vivo[J].Biochem Pharmacol，2019，164：326-335.

[28]閆慧，張磊.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制及基因治療的研究進(jìn)展[J].同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2016，37（1）：129-132.

[29] Shukla K，Sonowal H，Saxena A，et al.Didymin by suppressing NF-κB activation prevents VEGF-induced angiogenesis in vitro and in vivo[J].Vascul Pharmacol，2019，115：18-25.

[30] Wu Q， Sun X， Zheng G.VEGF overexpression is associated with optic nerve involvement and differentiation of retinoblastoma： A PRISMA-compliant meta-analysis[J].Medicine （Baltimore），2018，97（51）：e13753.

[31] Xia Yu，Jiang Lixia，Zhong Tianyu.The role of HIF-1α in chemo-/radioresistant tumors[J].Onco Targets and Therapy，2018，11：3003-3011.

[32] Liang Y，Chen X，Liang Z.MicroRNA-320 regulates autophagy in retinoblastoma by targeting hypoxia inducible factor-1α[J].Exp Ther Med，2017，14（3）：2367-2372.

[33] Gao Y，Jing M，Ge R，Lang L.Induction of hypoxia-inducible factor-1α by BDNF protects retinoblastoma cells against chemotherapy-induced apoptosis[J].Mol Cell Biochem，2016，414（1-2）：77-84.

[34] Yin X，Liao Y，Xiong W，Zhang Y，et al.Hypoxia-induced lncRNA ANRIL promotes cisplatin resistance in retinoblastoma cells through regulating ABCG2 expression[J].Clin Exp Pharmacol Physiol，2020，47（6）：1049-1057.

[35] Tong W W，Tong G H，Liu Y.Cancer stem cells and hypoxia-inducible factors （Review）[J].Int J Oncol，2018，53（2）：469-476.

[36]楊棟，張培彤.腫瘤干細(xì)胞在惡性腫瘤發(fā)生、耐藥、侵襲及轉(zhuǎn)移中的作用[J].實(shí)用癌癥雜志，2015，30（4）：629-632.

[37]郭海嘯，欒婷，王海峰，等.腫瘤干細(xì)胞在化療耐藥機(jī)制中的研究進(jìn)展[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2019，35（1）：163-166.

[38]張麗娜，趙桂秋，王謙，等.低氧條件下視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞表達(dá)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物及向內(nèi)皮樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化的體外研究[J].中華眼科雜志，2013，49（8）：736-743.

[39] Hu B，Weng Y，Xia X H，et al.Clinical advances of siRNA therapeutics[J].J Gene Med，2019，21（7）：e3097.

[40] Becerra S P，Notario V.The effects of PEDF on cancer biology： mechanisms of action and therapeutic potential[J].Nat Rev Cancer，2013，13（4）：258-271.

[41] Belkacemi L，Zhang S X.Anti-tumor effects of pigment epithelium-derived factor （PEDF）： implication for cancer therapy. A mini-review[J].J Exp Clin Cancer Res，2016，35：4.

[42] Yang H，Cheng R，Liu G，et al.PEDF inhibits growth of retinoblastoma by anti-angiogenic activity[J].Cancer Sci，2009，100（12）：2419-2425.

[43]劉丹，劉婷，趙樂(lè)，等.人參皂苷Rg1通過(guò)NF-κB阻斷缺氧誘導(dǎo)卵巢癌SKOV3細(xì)胞EMT[J].中國(guó)婦幼健康研究，2017，28（3）：273-275，278.

[44]翁苓苓，高玲，張閩光.天冬多糖低氧下抑制肝癌作用的體外實(shí)驗(yàn)研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2019，28（24）：2623-2628.

[45]馮兵，朱瑩，賀嵩敏，等.羅勒多糖對(duì)缺氧條件下肝癌細(xì)胞組蛋白H3K9me2甲基化及G9a、JMJD1A表達(dá)的影響[J].中藥材，2015，38（7）：1460-1465.

[46]趙楠，王紅，穆春青，等.雷公藤紅素抑制A549人肺癌細(xì)胞的增殖并增加其凋亡[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2018，34（12）：1111-1115.

[47] Li Z，Guo Z，Chu D，et al.Effectively suppressed angiogenesis-mediated retinoblastoma growth using celastrol nanomicelles[J].Drug Deliv，2020，27（1）：358-366.

（收稿日期：2020-05-25） （本文編輯：周亞杰）