張 利，蘇 亮，朱鵬云，周艷朵 （廣東省湛江市湛江久和醫(yī)院，廣東湛江 524000）

近年輔助生殖技術(shù)發(fā)展迅速，體外受精-胚胎移植(IVF-ET)技術(shù)已廣泛用于治療不孕患者[1-3]。染色體多態(tài)性是指廣泛存在于正常人染色體中非病理性微小結(jié)構(gòu)或者恒定著色強(qiáng)度的變異，通常在DNA 結(jié)構(gòu)相對(duì)不活躍、含有高度重復(fù)的異染色質(zhì)區(qū)，其中包括隨體區(qū)、Y 染色體長(zhǎng)臂、著絲粒、次縊痕及端粒區(qū)，染色體多態(tài)性往往集中表現(xiàn)在上述區(qū)域中[4-7]。有大量的報(bào)告說(shuō)明染色體的多態(tài)性對(duì)妊娠和胚胎的結(jié)局有相關(guān)性[8-12]，本文回顧性分析我院生殖醫(yī)學(xué)中心不孕患者的5 種染色體核型[即Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+]及臨床資料，探討染色體多態(tài)性及年齡對(duì)輔助生殖助孕妊娠與胚胎結(jié)局的影響。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象

回顧性分析2019 年6 月至2020 年5 月在我院行IVF-ET 的夫妻資料。排除標(biāo)準(zhǔn):患者男方年齡≥45 歲、男方精子為行睪丸或者附睪穿刺的患者，女方為多囊卵巢綜合征或者出現(xiàn)卵巢衰竭、異位妊娠、畸形的周期。納入標(biāo)準(zhǔn):受孕女性年齡22～40 歲，已進(jìn)行相關(guān)的治療前檢查身體條件符合IVF-ET 要求，最后獲得317 個(gè)IVF 周期。

1.2 方法

本研究將317 個(gè)周期按胚胎結(jié)局和妊娠結(jié)局進(jìn)行分組分類；胚胎結(jié)局將正常妊娠著床的周期和無(wú)法妊娠著床的周期進(jìn)行二項(xiàng)分類描述:活胎、流產(chǎn)；妊娠結(jié)局將正常產(chǎn)下胎兒的與流產(chǎn)、畸形等非正常生產(chǎn)的進(jìn)行二項(xiàng)分類描述:妊娠、未孕。每個(gè)IVF-ET 夫妻雙方均收集染色體多態(tài)性資料以及年齡資料。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

對(duì)男女染色體所有大于總體5%以，上的染色體多態(tài)性進(jìn)行二項(xiàng)分類。由于男性46，XY 的染色體多態(tài)性每項(xiàng)均低于總體5%故本文本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的男性染色體數(shù)據(jù)不作進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析。女性的有Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+的多態(tài)性大于總體的5%，本研究統(tǒng)計(jì)的Inv(9)核型是只包括了46，XX，Inv(9)(p12q13)核型。本文就此進(jìn)行以下分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究應(yīng)用R 語(yǔ)言4.0+RStudio1.2.1335 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以胚胎結(jié)局和妊娠結(jié)局的二項(xiàng)數(shù)據(jù)分別作為因變量，年齡、Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+作為自變量進(jìn)行廣義線性的Logistic 回歸分析，找出影響胚胎結(jié)局和妊娠結(jié)局的因素，在擬合回歸模型尋找線性回歸規(guī)律，所有回歸系數(shù)均進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后方便分析閱讀。一般資料的分析檢驗(yàn):對(duì)計(jì)量數(shù)據(jù)先進(jìn)行正態(tài)分布分析(QQ 圖)，兩組比較進(jìn)行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 年齡數(shù)據(jù)

妊娠結(jié)局分組:妊娠組190 例，平均年齡(32.2±4.1)歲；未孕組127 例，平均年齡(32.8±4.6)歲，兩組的年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。胚胎結(jié)局分組:活胎組123 例，平均年齡(32.1±4.3)歲；流產(chǎn)組194 例，平均年齡(32.6±4.4)歲，兩組的年齡差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 染色體多態(tài)性二項(xiàng)資料匯總

在妊娠、未孕組，活胎、流產(chǎn)組染色體多態(tài)性的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表1。

表1 妊娠、胚胎結(jié)局的染色體多態(tài)性分布資料

2.3 回歸分析

2.3.1 妊娠結(jié)局的回歸分析 以妊娠結(jié)局為因變量的Logistic 回歸分析結(jié)果顯示年齡、1qh+、9qh-、21pstk+均對(duì)妊娠結(jié)局有顯著影響(P＜0.01)；Inv(9)和22ps+對(duì)妊娠結(jié)局有明顯影響(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

2.3.2 胚胎結(jié)局的回歸分析以胚胎結(jié)局為因變量的Logistic 回歸分析結(jié)果顯示年齡、21pstk+對(duì)胚胎結(jié)局有顯著影響(P＜0.01)，Inv(9)、1qh+和22ps+對(duì)胚胎結(jié)局有明顯影響(P＜0.05)，見(jiàn)表3。

表2 妊娠結(jié)局的Logistic 回歸分析

表3 胚胎結(jié)局的Logistic 回歸分析結(jié)果

2.4 回歸模型建立

年齡-妊娠結(jié)局的回歸模型建立:年齡間隔5 歲分段，也就是20～、25～、30～、35～、40～，根據(jù)年齡分段，其他因素固定的情況下，建立回歸模型計(jì)算prob預(yù)測(cè)值分別為0.938、0.909、0.867、0.810、0.735。

年齡-胚胎結(jié)局的回歸模型建立:年齡間隔5 歲分段，也就是20～、25～、30～、35～、40～，根據(jù)年齡分段，其他因素固定的情況下，建立回歸模型計(jì)算prob預(yù)測(cè)值分別為0.760、0.618、0.452、0.296、0.176。

3 討論

本研究在一般計(jì)數(shù)資料中顯示妊娠結(jié)局分組和胚胎結(jié)局分組分別對(duì)年齡作QQ 圖顯示數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，進(jìn)行T 檢驗(yàn)比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明兩個(gè)分組的年齡分布良好，可以進(jìn)行高級(jí)別的統(tǒng)計(jì)分析[13]。妊娠結(jié)局分組和胚胎結(jié)局分組的各染色體分類進(jìn)行卡方檢驗(yàn)顯示胚胎結(jié)局分組的P值為0.068，已接近0.05，說(shuō)明兩者有一定的差異程度，只是尚未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義而已，如Inv(9)和1qh+的染色體多態(tài)性胚胎結(jié)局中的活胎與流產(chǎn)數(shù)據(jù)差別較大，單獨(dú)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在這說(shuō)明了Inv(9)和1qh+染色體多態(tài)性對(duì)于胚胎結(jié)局的影響較大，對(duì)妊娠結(jié)局影響不大。

本文研究顯示年齡、Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+染色體多態(tài)性均對(duì)妊娠、胚胎結(jié)局有顯著性的影響，呈正相關(guān)關(guān)系，年齡在妊娠、胚胎結(jié)局中均呈負(fù)相關(guān)，回歸系數(shù)分別為-0.085、-0.140，說(shuō)明年齡每增加5 歲，成功妊娠的概率下降8.5%，懷孕后活胎的幾率下降13.97%。而Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+染色體多態(tài)性與妊娠、胚胎結(jié)局均呈正相關(guān)關(guān)系，其中在妊娠結(jié)局中有顯著性差異的是1qh+、9qh-、21pstk+，回歸系數(shù)分別是:2.202、2.517、2.598，說(shuō)明在1qh+、9qh-、21pstk+分別提高1 倍的情況下成功妊娠的概率分別提高2.2 倍、2.5 倍、2.6 倍。在胚胎結(jié)局中有顯著性差異的是21pstk+，回歸系數(shù)為2.851，說(shuō)明了在21pstk+分別提高1 倍的情況下成功妊娠的概率分別提高2.85 倍。如前所述年齡與妊娠、胚胎結(jié)局均呈負(fù)相關(guān)，本文根據(jù)年齡與妊娠、胚胎結(jié)局的相關(guān)關(guān)系建立回歸模型，按照年齡間隔5 歲分段來(lái)建立(也就是20、25、30、35、40 分段)，其中妊娠結(jié)局的回歸模型顯示:在固定其他變量的情況下年齡prob值分別為0.938、0.909、0.867、0.810、0.735，說(shuō)明當(dāng)年齡在20歲～時(shí)成功妊娠的幾率有93.8%，25 歲～時(shí)為86.7%，依次到40 歲時(shí)已降至73.5%，隨著年齡的增長(zhǎng)，能成功著床妊娠的幾率逐漸下降。在胚胎結(jié)局的回歸模型中顯示:在固定其他變量的情況下年齡prob值分別為0.760、0.618、0.452、0.296、0.176，說(shuō)明當(dāng)年齡在20 歲時(shí)成功生產(chǎn)活胎的幾率為76.1%，25 歲時(shí)為61.8%，30 歲時(shí)為45.2%，35 歲時(shí)為29.6%，40 歲時(shí)僅為17.6%，隨著年齡的增長(zhǎng)，能成功生產(chǎn)活胎的幾率逐漸下降。

綜上所述，在IVF-ET 中染色體多態(tài)性Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+與成功妊娠及成功生產(chǎn)活胎均有正相關(guān)，而年齡與其呈負(fù)相關(guān)。