林裕慶 王文革 唐學武 譚漢旭 楊云月

1河北北方學院（河北張家口075000）；2中國人民解放軍空軍特色醫(yī)學中心（北京100142）

濕疹是兒童最常見的變應性皮膚病，發(fā)病機理復雜，其中遺傳及免疫因素被視為是影響濕疹患病的關鍵因素［1］。嬰兒的免疫系統(tǒng)最早在母親妊娠期宮內就開始發(fā)育，母親的特異性體質也是從這個時候對胎兒產生影響［2］。臍血的免疫炎性指標反應新生兒最早的免疫功能狀態(tài)，因此，研究臍血免疫相關的炎性因子等成分與嬰兒濕疹發(fā)病的關系，對嬰兒濕疹的早期防治具有積極的意義。近些年來，有研究者發(fā)現(xiàn)臍血IgE、維生素D水平與嬰兒濕疹發(fā)生密切相關，可作為預測濕疹等變態(tài)反應性疾病發(fā)生的早期篩查指標［3-4］。目前對早期嬰兒濕疹發(fā)生相關因素尚未有全面的認識，進一步探究臍血其他炎癥因子與濕疹的關系，將有利于全面揭示嬰兒濕疹的影響因素，進而及早發(fā)現(xiàn)早期過敏性疾病，并采取相應的干預措施。

研究［5］發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細胞趨化因子（Eotaxin）是趨化嗜酸性粒細胞發(fā)揮作用的關鍵因子，在濕疹等過敏性疾病中發(fā)揮著重要的作用，近些年來受到國內外學者的關注及研究。已有研究證實Eotaxin 通過特異性結合CCR3 受體后趨化血液、骨髓中的嗜酸性粒細胞到達局部組織中的炎癥部位，并促進IgE 的合成及分泌，IgE 與其受體結合后誘導細胞活化、脫顆粒釋放相關炎癥介質，介導炎癥反應，導致濕疹的發(fā)生［5-6］。成人濕疹患者血清Eotaxin 水平顯著升高［7］，然而兒童濕疹患者血清Eotaxin 的研究不多，目前關于臍血Eotaxin 水平與嬰兒濕疹的關系的研究也甚少。本研究通過檢測臍血Eotaxin 水平，隨訪42 d 嬰兒濕疹的發(fā)生情況，分析影響臍血Eotaxin 水平相關因素，并探討臍血Eotaxin 水平對嬰兒濕疹的預測意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年10月至2019年11月期間，在空軍特色醫(yī)學中心的婦產科醫(yī)生協(xié)助下采集188 例新生兒臍帶血。所有新生兒均為足月健康兒。新生兒出生時采集臍帶血標本4 mL 冷藏于-4 ℃冰箱，在24 h 內從-4 ℃冰箱取出然后在我院中心實驗室離心機以轉速為3 000 r/min 進行離心5 min，靜置后用移液槍將采血管的上層血漿分離放入1.5 mL EP 管中保存，最后將EP 管編號后保存在零下80 ℃的冰箱中待測。本次研究已通過倫理委員會的審查后獲得批準，納入研究的新生兒父母已知曉并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 問卷調查內容在新生兒出生后到婦產科登記其出生信息（日期、性別、胎齡、體質量、身長、分娩方式等），母親妊娠期是否健康情況（妊娠期高血壓、妊娠合并貧血、甲狀腺功能減退癥、妊娠期糖尿病等疾?。易暹^敏史（哮喘、過敏性結膜炎、過敏性鼻炎、濕疹、蕁麻疹、食物藥物過敏等）。

1.2.2 Eotaxin 水平檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法測定臍帶血中Eotaxin 含量。Eotaxin 的ELISA 檢測試劑盒（產品批號：20054311）從美國的英杰生物技術有限公司（Invitrogen）購買。

1.3 隨訪分析嬰兒生后42 d 進行隨訪，對家長進行現(xiàn)場問卷調查，記錄濕疹發(fā)生的情況（濕疹發(fā)生時間、部位、程度、伴隨癥狀、用藥情況）。嬰兒濕疹的診斷參考《濕疹診療指南（2011年）》［8］。

1.4 統(tǒng)計學方法采用SPSS 25.0 統(tǒng)計軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。計量資料采用均數(shù)±標準差表示，兩組間比較采用t檢驗；采用logistic回歸分析嬰兒濕疹發(fā)生的危險因素。采用受試者工作特征曲線（ROC）分析臍血Eotaxin 水平對42 d嬰兒濕疹的預測意義。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 影響臍血Eotaxin水平的相關因素納入研究的新生兒臍帶血Eotaxin水平為（121.75±72.22）pg/mL。將新生兒性別、出生體重、出生身長、出生季節(jié)、分娩方式、胎齡以及母親年齡、孕期體檢情況和有無家族過敏史進行分組，采用t檢驗分析它們是否與臍血Eotaxin 的水平相關。有家族過敏史和無家族過敏史的新生兒臍帶血Eotaxin 水平比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其余資料比較差異無統(tǒng)計學意義，見表1。

表1 影響臍血Eotaxin 的相關因素Tab.1 Correlation factors of affecting umbilical cord blood Eotaxin ±s

表1 影響臍血Eotaxin 的相關因素Tab.1 Correlation factors of affecting umbilical cord blood Eotaxin ±s

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2.2 42 d 嬰兒有濕疹組與無濕疹組臍血Eotaxin水平比較將188 例嬰兒根據(jù)42 d 是否患有濕疹分為濕疹組和無濕疹組，t檢驗結果表明濕疹組臍血Eotaxin 表達水平明顯高于無濕疹組（P＜0.05），說明臍血Eotaxin 水平與嬰兒患有濕疹密切相關，見表2。

2.3 嬰兒濕疹起病時間與臍血Eotaxin 水平的比較根據(jù)42 d 嬰兒濕疹起病時間進行分為1 ～3 周組和3 ～6 周組，兩組之間臍血Eotaxin 水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表3。

表2 42 d嬰兒有濕疹組和無濕疹組臍血Eotaxin水平比較Tab.2 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin levels between groups with or without eczema in 42-day infants ±s

表2 42 d嬰兒有濕疹組和無濕疹組臍血Eotaxin水平比較Tab.2 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin levels between groups with or without eczema in 42-day infants ±s

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表3 嬰兒濕疹不同起病時間組臍血Eotaxin 水平比較Tab.3 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin level in differend onset time groups of infantile eczema ±s

表3 嬰兒濕疹不同起病時間組臍血Eotaxin 水平比較Tab.3 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin level in differend onset time groups of infantile eczema ±s

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2.4 嬰兒濕疹相關因素的logistic 回歸分析將與濕疹相關的家族過敏史、臍血Eotaxin 水平作為自變量進行l(wèi)ogistic 逐步回歸分析，結果表明臍血Eotaxin 高表達水平及過敏性家族史均是影響濕疹發(fā)生的獨立危險因素，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 嬰兒濕疹相關因素的logistic 回歸分析Tab.4 Logistic regression analysis of infant eczema related factors

2.5 臍血Eotaxin 水平對早期嬰兒濕疹的預測價值臍血的Eotaxin ROC 分析結果見表5、圖1，說明臍血Eotaxin 對嬰兒濕疹的發(fā)生具有一定的預測意義，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表5 臍血Eotaxin 水平的ROC 曲線分析Tab.5 ROC curve analysis of cord blood Eotaxin level

圖1 臍血Eotaxin 水平的ROC 曲線分析Fig.1 ROC curve analysis of cord blood Eotaxin level

3 討論

過敏性疾病在嬰幼兒期常表現(xiàn)為濕疹或牛奶蛋白過敏［9-10］，其中嬰兒濕疹發(fā)病率為20%～57.3%不等［11-12］，呈逐年上升趨勢，不同國家地區(qū)存在差異。本次研究入組188 例嬰兒，42 d 隨訪有101 例嬰兒有濕疹，87 例無濕疹，42 d 嬰兒濕疹患病率為53.7%。有研究表明患有濕疹的嬰兒在后期患有過敏性鼻炎、哮喘等過敏性疾病的風險也增高，因此嬰兒濕疹的防治需要盡早進行［10］。濕疹的發(fā)病與遺傳因素、免疫、環(huán)境等多種因素有關，其中遺傳及免疫功能失衡被視為是導致濕疹發(fā)病的兩個最重要的因素［13］，同時遺傳因素對免疫功能是有一定影響的。目前研究［14］證實Eotaxin 的表達調控與濕疹等過敏性疾病密切相關。嬰兒臍帶血能反映與遺傳有關的最早期免疫功能狀態(tài)，因此本課題通過采集臍帶血檢測Eotaxin 水平，分析其與遺傳等因素的關系。研究顯示有家族過敏史的嬰兒發(fā)生過敏性疾病的風險相應提高［12］，本研究采用logistic 回歸分析家族過敏史與嬰兒濕疹患病的關系，也證實了家族過敏史是影響嬰兒濕疹患病的獨立危險因素。此外，本研究結果表明有家族過敏史組的新生兒臍血Eotaxin 水平明顯高于無家族過敏史組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），說明家族過敏史對新生兒Eotaxin 臍血水平有一定的影響，從而對新生兒的免疫功能產生影響，結果與鄒艷等［15］研究是一致的。因此，臨床工作中對父母有過敏史的高危新生兒臍血Eotaxin 水平進行監(jiān)測及篩查，有利于對濕疹等過敏性疾病的早期干預。

近年來，研究顯示Eotaxin 是過敏反應的重要組成部分，可誘導活化嗜酸性粒細胞，并延長其壽命、減少凋亡和趨化到相應炎癥部位［16］。Eotaxin也可以介導靶細胞中MAPK 的激活，通過局部產生IL-13、IL-4 等Th2 型細胞因子，而后者在濕疹等過敏性疾病中也發(fā)揮核心的作用［17］。目前研究表明Eotaxin 是選擇性最高的嗜酸性粒細胞（Eos）趨化因子，通過與嗜酸性粒細胞表面的CC 趨化因子受體結合后激活下游的絲裂原的蛋白激酶和胞外信號調節(jié)激酶使嗜酸性粒細胞活化、增殖并募集到促使其定向遷移到相應過敏性炎癥部位，引起組織損傷，參與濕疹的發(fā)病機制，因此Eotaxin/CCR3 相互作用軸在濕疹等過敏性疾病起著至關重要的作用［16，18］。而臍血Eotaxin 及細胞因子水平等指標可反映最早遺傳、環(huán)境因素對胎兒免疫功能的影響［19］。但是目前國內外關于臍血Eotaxin水平與嬰兒濕疹的相關性研究鮮有報道。本研究結果顯示嬰兒濕疹組臍血Eotaxin 水平明顯高于無濕疹組（P＜0.05），說明新生兒臍帶血高Eotaxin表達水平與濕疹的發(fā)生有一定的相關性。同時采用logistic 回歸分析臍血Eotaxin 水平與嬰兒濕疹的關系，結果表明臍血Eotaxin 高水平是影響嬰兒濕疹發(fā)生的獨立危險因素。臍血Eotaxin 高表達水平提示在胎兒期受到母親體內的抗原物質致敏或特應性體質的影響［20-21］，出生后的新生兒為此增加患有濕疹等過敏性疾病的風險。此外，嬰兒在1 ～3 周、3 ～6 周發(fā)生濕疹的臍血Eotaxin 水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＜0.05），考慮到隨訪的時間短及樣本量有限，可能對結果有一定的影響。同時進一步分析臍血Eotaxin 的ROC 曲線的結果顯示：AUC 為0.773、95%CI為0.704 ～0.841，特異度為52.9%，靈敏度為88.8%，標準誤為0.035，表明臍血Eotaxin 水平與濕疹患病具有一定的相關性，且對嬰兒濕疹具有一定的預測意義。

本研究也存在一些局限性，樣本量不夠大，納入的研究對象均來自在我院出生的新生兒，范圍相對局限，隨訪時間短。本研究組成員在后續(xù)的研究中繼續(xù)納入更多的研究對象，擴大樣本量，同時追蹤隨訪嬰兒在3、6、12 個月時濕疹患病情況，甚至可以隨訪至2 ～3 歲，讓實驗數(shù)據(jù)更加具有說服力。本次研究中收集臍帶血的優(yōu)勢是采集方便，而且臍帶血與母體血液相連，臍帶血相關免疫炎性因子能反映新生兒最早的免疫功能狀態(tài)以及遺傳因素對其免疫的影響，有利于研究臍血相關因子與嬰兒濕疹發(fā)病的關系。新生兒血清Eotaxin水平的檢測需要采集靜脈血，考慮新生兒血管細，操作不方便，家長依從性也不高。嬰兒后續(xù)隨訪研究中可進一步完善檢測血清Eotaxin 水平，并將血清Eotaxin 水平與臍血Eotaxin 水平做比較，驗證臍帶血Eotaxin 對濕疹預測作用的可靠性。

綜上所述，臍血Eotaxin水平與家族過敏史及早期嬰兒濕疹的發(fā)病有密切的關系，且臍血Eotaxin高表達水平是嬰兒濕疹患病的獨立危險因素。臍血Eotaxin 水平對早期嬰兒濕疹的患病具有一定的預測價值，對早期嬰兒濕疹等過敏性疾病防治有一定的積極意義。本研究下一步對入組的研究對象繼續(xù)進行追蹤隨訪，然后綜合分析兒童在各個年齡段濕疹等變應性疾病的患病情況與臍血Eotaxin 水平的關系，更全面探討臍血Eotaxin 水平對早期濕疹等過敏性疾病的預測價值。