高升，陳哲，王玉龍，柯慧，朱崇淼，涂楓

（1.江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心，南京210036；2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所，南京210014；3.徐州潤沃牧業(yè)有限公司，江蘇 徐州221223）

豆粕是養(yǎng)豬生產(chǎn)中最重要的蛋白質(zhì)飼料，但豆粕中含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，如胰蛋白酶抑制劑、大豆抗原蛋白和大豆凝素等，不僅會造成豆粕蛋白質(zhì)的低效利用，還會造成仔豬嚴(yán)重腹瀉。

將豆粕進(jìn)行生物發(fā)酵是消除抗?fàn)I養(yǎng)因子、提高飼用價值的最佳方法。豆粕在發(fā)酵過程中，蛋白類抗?fàn)I養(yǎng)因子可以降解形成小肽，具有促生長、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等特殊的生理活性[1]；非蛋白抗?fàn)I養(yǎng)因子可以轉(zhuǎn)化為營養(yǎng)物質(zhì)，同時產(chǎn)生有益菌[2]，因此，發(fā)酵豆粕還具有一定的腸道改善潛能。

目前，關(guān)于發(fā)酵豆粕在仔豬上的應(yīng)用多為商品白豬，在優(yōu)質(zhì)黑豬上的使用情況相關(guān)研究較少，黑豬含有地方豬血統(tǒng)，優(yōu)質(zhì)黑豬養(yǎng)殖逐漸受到市場歡迎，仔豬階段缺乏對發(fā)酵豆粕飼用效果的科學(xué)評價。鑒于此，本試驗(yàn)探討了發(fā)酵豆粕對黑豬斷奶仔豬生長和免疫性能的影響，以期為改善黑豬斷奶仔豬生長提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 試驗(yàn)動物

試驗(yàn)動物由高郵市惠誠生態(tài)養(yǎng)殖園提供，選取25日齡、體重為（6.2±0.2）kg的健康黑豬斷奶仔豬（杜洛克×蘇紫黑豬雜交F1）108頭進(jìn)行試驗(yàn)。蘇紫黑豬由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所培育，含有太湖豬、淮豬等多個地方豬血統(tǒng)。

1.2 試劑及儀器

EDTA-K2真空采血管，江蘇康捷醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)；10 mL一次性無菌注射器，姜堰市新蘇醫(yī)療器械有限公司；動物血細(xì)胞分析儀（型號PE-6800 VET），深圳普康電子有限公司生產(chǎn)；全自動生化分析儀（型號7060），日本日立公司生產(chǎn)；試驗(yàn)用4℃冰箱和-20℃冰箱為青島海爾集團(tuán)生產(chǎn)。

1.3 發(fā)酵豆粕來源和營養(yǎng)成分

發(fā)酵豆粕，南京致潤生物科技有限公司生產(chǎn)，營養(yǎng)成分見表1。

表1 發(fā)酵豆粕營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 基礎(chǔ)日糧和營養(yǎng)成分

參照《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T65—2004）和NRC（2012）推薦營養(yǎng)水平配制仔豬基礎(chǔ)飼糧，具體日糧組成及營養(yǎng)成分見表2。

表2 仔豬基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

試驗(yàn)將選取的108頭仔豬隨機(jī)分為3組，組間初始體重差異不顯著（P＜0.05），每組3個重復(fù)，每個重復(fù)12頭豬（公母各半）。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組分別用發(fā)酵豆粕替代基礎(chǔ)日糧中5%和10%的普通豆粕，進(jìn)行為期28 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。對照組和試驗(yàn)組仔豬飼養(yǎng)在同一棟豬舍中，豬群自由采食，保證豬只充分飲水，飼養(yǎng)管理按照場內(nèi)同一技術(shù)規(guī)程進(jìn)行。

2.2 指標(biāo)檢測

2.2.1 生長性能指標(biāo)

試驗(yàn)開始和結(jié)束稱重，試驗(yàn)結(jié)束時稱重結(jié)料。各欄試驗(yàn)豬于試驗(yàn)開始當(dāng)天和和試驗(yàn)結(jié)束最后一天早上08:00空腹稱重，根據(jù)初質(zhì)量和末質(zhì)量以及試驗(yàn)天數(shù)計(jì)算平均日增重；記錄試驗(yàn)期間的耗料量，計(jì)算平均日采食量。每天記錄仔豬的腹瀉時間、頭數(shù)，計(jì)算腹瀉頻率。腹瀉率（%）=試驗(yàn)期腹瀉仔豬頭次/（試驗(yàn)仔豬頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）×100%。

2.2.2 血清免疫指標(biāo)

飼喂試驗(yàn)結(jié)束時，每個重復(fù)隨機(jī)挑選2頭豬前腔靜脈采血，用于檢測淋巴細(xì)胞總量和免疫球蛋白含量，其中3～4 mL血液注射到EDTA抗凝真空管中，混勻后置于放有冰袋的泡沫箱中，送回實(shí)驗(yàn)室利用動物血細(xì)胞分析儀測定淋巴細(xì)胞總數(shù)；另采集靜脈血8 mL，傾斜放置，待血清析出后經(jīng)3 000 r·min-1離心15 min，收集血清于-20℃保存，采用比色法測定血清中的IgG和IgM含量。

2.3 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)

原始數(shù)據(jù)采用Excel 2007軟件進(jìn)行初步處理，用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，LSD法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果均采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

3 結(jié)果與分析

3.1 發(fā)酵豆粕對斷奶仔豬生長性能的影響

試驗(yàn)仔豬生產(chǎn)性能指標(biāo)測定結(jié)果見表3。

由表3數(shù)據(jù)可知，在斷奶仔豬日糧中添加不同水平的發(fā)酵豆粕對仔豬生長性能存在不同的影響。與對照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組試驗(yàn)?zāi)┚?、日增重都有不同程度降低，但料肉比?yōu)于對照組，差異均不顯著（P＞0.05）；與對照組和試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ組的試驗(yàn)?zāi)┚睾腿赵鲋仫@著增加（P＜0.05），料肉比顯著降低（P＜0.05）；日采食量方面，以試驗(yàn)Ⅱ組最高，對照組次之，均顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05），但試驗(yàn)Ⅱ組與對照組間差異不顯著（P＞0.05）。腹瀉率方面，2個試驗(yàn)組仔豬腹瀉率均低于對照組，其中試驗(yàn)Ⅱ組顯著低于對照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）。

表3 試驗(yàn)仔豬生長性能測定結(jié)果

3.2 發(fā)酵豆粕對試驗(yàn)仔豬免疫指標(biāo)的影響

試驗(yàn)仔豬免疫指標(biāo)測定結(jié)果見表4。

表4 試驗(yàn)仔豬免疫指標(biāo)測定結(jié)果

由表4可知，各組間淋巴細(xì)胞數(shù)量、IgM含量差異不顯著（P＞0.05），但與對照組和試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ組的IgG含量顯著提高（P＜0.05）。

4 討論

微生物發(fā)酵豆粕可以降解大部分蛋白類抗?fàn)I養(yǎng)因子，同時降低蛋白質(zhì)分子量，因此有利于機(jī)體吸收利用。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加發(fā)酵豆粕可以改善黑豬斷奶仔豬生長性能，尤其添加10%發(fā)酵豆粕可以顯著提高日增重、降低料重比（P＜0.05），這與蘇愷等[3]的研究結(jié)果一致。試驗(yàn)Ⅰ組末均重、日增重和日采食量都低于對照組，但料肉比優(yōu)于對照組，試驗(yàn)Ⅱ組末均重、日增重和日采食量、料肉比均優(yōu)于對照組和試驗(yàn)Ⅰ組。這一結(jié)果與陳玉龍等[4]的研究結(jié)果相似，推測發(fā)酵豆粕需要達(dá)到足夠添加量才可發(fā)揮促進(jìn)作用。

日糧中添加發(fā)酵豆粕可以顯著改善斷奶仔豬腸道形態(tài)學(xué)和消化酶活性，在仔豬腸道內(nèi)形成優(yōu)勢菌群，從而減少或者克服豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子對斷奶仔豬的負(fù)面影響，有效降低腹瀉率[5-6]。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)Ⅱ組腹瀉率顯著低于對照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）。

仔豬獲得免疫主要來自兩方面，一是通過母乳獲得被動免疫，二是自身免疫系統(tǒng)發(fā)育形成主動免疫。IgG是血清中的主要免疫球蛋白，初乳中IgG含量達(dá)到80%，仔豬自身產(chǎn)生的免疫球蛋白以IgM為主。飼糧中添加發(fā)酵豆粕能夠顯著提高斷奶仔豬免疫力，主要體現(xiàn)在增加血清IgG和IgM含量[7-8]。IgG方面，本試驗(yàn)中試驗(yàn)Ⅱ組相比對照組和試驗(yàn)Ⅰ組顯著提高（P＜0.05），IgM方面，試驗(yàn)Ⅱ組比對照組和試驗(yàn)Ⅰ組分別提高5.88%和10.77%。但差異不顯著。大豆蛋白通過發(fā)酵降解成小肽，可以不同程度刺激淋巴細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化，明顯提升淋巴細(xì)胞的應(yīng)答能力[6]，由此促進(jìn)IgM水平上升，進(jìn)一步增強(qiáng)機(jī)體免疫力。關(guān)于淋巴細(xì)胞數(shù)方面，本試驗(yàn)中試驗(yàn)Ⅱ組比對照組和試驗(yàn)Ⅰ組分別提高2.66%和1.92%，未達(dá)到顯著水平。發(fā)酵豆粕對黑豬斷奶仔豬免疫力改善主要表現(xiàn)在降低腹瀉率和提升IgG含量兩方面。

5 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在黑豬斷奶仔豬日糧中添加5%發(fā)酵豆粕對仔豬生長性能和免疫力無顯著影響，添加10%發(fā)酵豆粕能顯著改善仔豬生長性能，降低腹瀉率，提高機(jī)體免疫力。