血型不規(guī)則抗體是指除ABO血型以外的抗體，其產(chǎn)生多與輸血和注射與血型不合的血液制品有關(guān)。血型不規(guī)則抗體的產(chǎn)生會引發(fā)免疫性輸血反應(yīng)、交叉配血困難等問題。對于孕婦而言，不規(guī)則抗體可能經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，引發(fā)新生兒溶血（HDN）[1]。ABO血型系統(tǒng)溶血（ABO-HDN）在臨床中較為常見，且病情程度輕，容易治療。但非ABO-HDN 較為少見，且病情復(fù)雜，治療難度大。以往研究認(rèn)為Rh 血型系統(tǒng)所致HDN 最為嚴(yán)重[2]。近年來相關(guān)研究不斷深入，除Rh 血型系統(tǒng)外，MNS 血型系統(tǒng)及多血型混合所致HDN 引起了國內(nèi)外研究者的關(guān)注。本研究分析孕婦產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查及鑒定情況，探討孕婦產(chǎn)前血型不規(guī)則抗體主要分型、高危因素及與非ABO-HDN的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料選取2018年1月～2019年11月在我中心血站篩查產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的4 768例孕婦的血液樣本，孕婦年齡21～42歲，平均（29.14±3.06）歲；其中2 912例為初產(chǎn)婦，1 856例為經(jīng)產(chǎn)婦；2 757例有妊娠史，2 011例無妊娠史；897例有輸血史。入選標(biāo)準(zhǔn)：①于妊娠20 周內(nèi)行不規(guī)則抗體篩查；②單胎；③對本次研究知情且簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①未定期產(chǎn)檢；②雙胎或多胎。

1.2 方法篩查及鑒定相關(guān)儀器、試劑：抗體篩查細(xì)胞（上海羽朵生物科技有限公司，批號：20190142、20190433），抗體特異性鑒定譜（歐蒙醫(yī)學(xué)實驗診斷股份公司，批號：20192402），凝膠卡（達(dá)亞美公司，ZB/DM 007-2001），LG16-A/B/C 離心機（北京雷勃爾離心機有限公司），HL-JN01 孵育儀（東碩儀表自動化有限公司）。

篩查及鑒定方法：采集所有受檢者2ml 空腹靜脈血，分離血清，使用微柱凝膠卡進(jìn)行篩查和鑒定，具體方法嚴(yán)格按照說明書操作。取1%濃度抗體篩查細(xì)胞Ⅰ～Ⅲ各25μl，做好標(biāo)記，加入50μl 血清，于孵育儀持續(xù)孵化15min，以離心機離心處理10min（1 000r/min）。肉眼觀察結(jié)果，如果凝集散開檢測結(jié)果為陰性；如果凝集不散開檢測結(jié)果為陽性。對于陽性標(biāo)本，以抗體特異性鑒定譜做特異性鑒定分析，若紅細(xì)胞于微柱凝膠孔膠面/膠中凝集為陽性，若紅細(xì)胞于微柱凝膠孔底部沉積為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)①不規(guī)則抗體陽性檢出率及特異性分布情況；②不同生育史、妊娠史、輸血史孕婦不規(guī)則抗體陽性檢出率；③孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體陽性所致非ABO-HDN 發(fā)生率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 26.0 軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體檢出情況4 768例孕婦中，28例不規(guī)則抗體陽性，陽性率0.59%。其中Rh 血型系統(tǒng)最多，占不規(guī)則抗體總數(shù)71.43%（20/28）；其次為MNS 血型系統(tǒng)，占10.71%（3/28），其他血型系統(tǒng)較少，見表1。

2.2 不同生育史、妊娠史、輸血史孕婦不規(guī)則抗體陽性檢出率經(jīng)產(chǎn)婦、有妊娠史孕婦、有輸血史孕婦不規(guī)則抗體檢出率分別高于初產(chǎn)婦、無妊娠史孕婦、無輸血史孕婦（P<0.05），見表2。

2.3 孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體陽性所致非ABO-HDN發(fā)生率經(jīng)鑒定，28例產(chǎn)前不規(guī)則抗體陽性孕婦非ABO-HDN 發(fā)生率為35.71%（10/28），其中多血型混合型發(fā)生率為50.00%，Rh 血型系統(tǒng)型發(fā)生率為40.00%，MNS 血型系統(tǒng)型發(fā)生率為33.33%，其他血型系統(tǒng)未見非ABO-HDN，見表3。

表1 不規(guī)則抗體特異性分布

表2 不同生育史、妊娠史、輸血史孕婦不規(guī)則抗體陽性檢出率

表3 孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體陽性所致非ABO-HDN 發(fā)生率

3 討論

不規(guī)則抗體是引發(fā)HDN的重要原因，嚴(yán)重?fù)p害新生兒生命健康，影響生育質(zhì)量[3]。因此，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查為孕婦產(chǎn)前篩查中的重要項目，以避免含有弱抗體的受血者輸入含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞而受到免疫刺激，預(yù)防溶血性輸血。Rh血型系統(tǒng)相關(guān)抗體是引發(fā)非ABO-HDN、免疫性輸血反應(yīng)的常見不規(guī)則抗體[4]，此外還有其他不規(guī)則抗體，充分認(rèn)識不規(guī)則抗體特異性分布情況、相關(guān)因素、對非ABO-HDN的影響，更有助于指導(dǎo)臨床合理制定預(yù)防方案。

3.1 孕婦產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體特異性分布研究已經(jīng)證實，Rh血型系統(tǒng)相關(guān)抗體為最常見的不規(guī)則抗體[5]。本研究4 768例孕婦產(chǎn)前血液樣本，共檢出28例不規(guī)則抗體陽性，陽性率0.59%，其中Rh 血型系統(tǒng)占71.43%，其次為MNS 血型系統(tǒng)（占10.71%），其他血型系統(tǒng)較少。Rh 不規(guī)則抗體中抗-E 占35.71%、抗-C 占14.29%。由此可見抗-E、抗-C 為Rh 血型系統(tǒng)中常見不規(guī)則抗體[6]。因此，可以將產(chǎn)婦RhCcEe 抗原作為常規(guī)檢測，指導(dǎo)臨床為其提供相同血液成分，避免輸血引發(fā)同種免疫。另外，研究中發(fā)現(xiàn)MNS 血型不規(guī)則抗體也較多，其中以抗-M 為主?？?M 為常見抗體，存在形式為IgM，是一種天然抗體。以往認(rèn)為抗-M 不會經(jīng)胎盤傳輸給胎兒，但近年來有諸多抗-M 引發(fā)HDN的報道[7]，因此臨床中也應(yīng)重視抗-M 檢測。

3.2 孕婦產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體產(chǎn)生相關(guān)因素孕婦產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體產(chǎn)生因素較多，本研究結(jié)果顯示生育史、妊娠史、輸血史均會增加不規(guī)則抗體發(fā)生率，其原因復(fù)雜。女性妊娠、生育過程中會產(chǎn)生血型同種抗體，隨著妊娠、分娩次數(shù)增多，不規(guī)則抗體形成風(fēng)險升高[8]。另外，異體輸血增加血型同種抗體產(chǎn)生風(fēng)險，而且輸血量、輸血次數(shù)與同種抗體產(chǎn)生率呈正相關(guān)[9]。因此，分析孕婦孕產(chǎn)史、輸血史情況，對于預(yù)測孕婦產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的產(chǎn)生，指導(dǎo)臨床積極采取預(yù)防方案具有重要意義。

3.3 孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體與非ABO-HDN母胎血型不合會引發(fā)HDN，由非ABO血型不合引發(fā)的HDN 為非ABO-HDN，患兒病情多較為嚴(yán)重，后遺癥、死亡風(fēng)險較高[10]。本研究結(jié)果顯示，引發(fā)非ABO-HDN的主要不規(guī)則抗體類型為Rh 血型系統(tǒng)、MNS 血型系統(tǒng)及多血型混合。非ABO-HDN 發(fā)生機制為受孕婦M 抗體刺激影響，胎兒體內(nèi)產(chǎn)生抗M抗體，IgG 經(jīng)胎盤進(jìn)入血液循環(huán)中，破壞紅細(xì)胞，引發(fā)溶血[11]。因此，臨床中應(yīng)特別關(guān)注Rh 血型系統(tǒng)、MNS 血型系統(tǒng)及多血型混合相關(guān)不規(guī)則抗體，積極采取預(yù)防措施，預(yù)防非ABO-HDN的發(fā)生。另外，對于孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體陽性者，應(yīng)加強新生兒監(jiān)測，一旦發(fā)現(xiàn)新生兒出生24h 內(nèi)有黃疸表現(xiàn)，且呈現(xiàn)加重趨勢，應(yīng)立即檢查血常規(guī)、膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞，明確是否發(fā)生非ABO-HDN，盡早治療，以免導(dǎo)致不良預(yù)后。

綜上所述，孕婦產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體主要涉及Rh 血型系統(tǒng)、MNS 血型系統(tǒng)，有經(jīng)產(chǎn)史、妊娠史、輸血史的孕婦不規(guī)則抗體陽性檢出率更高。孕婦產(chǎn)前紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽性有引發(fā)非ABO-HDN的風(fēng)險，應(yīng)積極采取防治措施。