徐劉佳 鄭明明

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所 油料脂質(zhì)化學(xué)與營養(yǎng)湖北省重點實驗室 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部油料加工重點實驗室，武漢430062）

酶是一種高效的生物催化劑，可用于多種化學(xué)反應(yīng)，由于具有較強的選擇性、催化效率高、綠色環(huán)保等優(yōu)點，受到越來越多的關(guān)注［1-3］。在酶反應(yīng)體系中，反應(yīng)底物通常溶于有機溶劑，酶則需要一定的水相環(huán)境才能發(fā)揮其催化活性［4］。因此，酶促反應(yīng)往往發(fā)生在有機-水雙相體系的界面上［5］。然而，雙相體系中的酶促反應(yīng)往往受到依賴于界面面積的傳質(zhì)過程的限制［6］。

皮克林乳液是Pickering［7］于1907 年第一次在公開出版物上描述的一種由固體顆粒穩(wěn)定的乳狀液。固體顆粒緊密排列在油水界面，一旦進(jìn)入界面就會形成不可逆吸附，促使兩相界面張力降低，在液滴之間形成一定的靜電斥力和空間位阻，從而起到阻礙油滴合并變大的作用。皮克林乳液的類型由固體顆粒的濕潤性來控制，而濕潤性可通過油水界面上的三相接觸角（θ）體現(xiàn)。如圖1 所示［8］，當(dāng)θ＜90°時，顆粒相對親水，容易制得水包油（O/W）型乳液；當(dāng)θ 接近90°時，顆粒具有兩親性，既可以形成水包油乳液又可以形成油包水乳液；當(dāng) θ ＞90°，顆粒相對親油，容易制得油包水（W/O）乳液。皮克林乳液具有高的抗聚結(jié)性，并且顆粒易于分離、成本低、毒性小，因此皮克林乳液正逐漸成為設(shè)計高效雙相生物催化反應(yīng)體系的創(chuàng)新平臺［9-11］。

本文總結(jié)了常用于穩(wěn)定皮克林乳液的固體顆粒，詳細(xì)的舉例了皮克林乳液在酶反應(yīng)體系中的應(yīng)用情況，并對此反應(yīng)體系做了簡單的展望，旨在為發(fā)展更高效、綠色的酶催化反應(yīng)提供更多的思路。

圖1 固體顆粒在三相界面的接觸角示意圖［8］

1 皮克林乳液的穩(wěn)定劑

作為皮克林乳液的穩(wěn)定劑，固體顆粒的濕潤性［8］、粒徑大?。?2］、表面電荷［13］、顆粒的濃度［14］對乳液的穩(wěn)定性都會產(chǎn)生影響。因此，本節(jié)總結(jié)了一些常用來穩(wěn)定皮克林乳液的固體顆粒的性質(zhì)及表面改性對乳液穩(wěn)定的影響。

1.1 硅納米顆粒

納米二氧化硅屬于無機納米材料，無毒、無味且無污染。1992 年，Kresge［15］首次提出了介孔二氧化硅納米粒子概念，介孔二氧化硅納米材料具有較大的比表面積、有序可調(diào)的介孔結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定的理化性質(zhì)［16-18］，而且它可以很容易的與多種官能團(tuán)連接進(jìn)行表面修飾。在藥物輸送、吸附、催化轉(zhuǎn)化等領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。大量實驗表明，由于Si-OH 基團(tuán)在粒子表面的親水性，未改性的二氧化硅傾向于穩(wěn)定O/W 皮克林乳液，而改性后的二氧化硅顆粒則優(yōu)先穩(wěn)定W/O 皮克林乳液［19］。Meng等［20］制備了具有可調(diào)節(jié)潤濕性的載酶介孔二氧化硅顆粒（LMSPs），通過改變接枝硅烷的鏈長，可以對LMSPs 的潤濕性進(jìn)行微調(diào)，從而優(yōu)化皮克林乳液的界面面積。Ren 等［21］制備一種動態(tài)共價二氧化硅（SiO2-B），僅通過改變?nèi)芤簆H 值即可實現(xiàn)皮克林乳液的形成與分離。在今后的研究中，二氧化硅納米顆粒在改性方面仍然有巨大的發(fā)展空間，不僅是對其形態(tài)、尺寸、親疏水性的改變，還有通過表面改性制備更多響應(yīng)性質(zhì)的功能基團(tuán)，用于需要破乳的雙相反應(yīng)、石油回收、化妝品的油性去除等等。

1.2 碳納米顆粒

碳元素是自然界中存在的最重要的元素之一，以碳為基礎(chǔ)的納米材料是多種多樣的，包括常見的石墨和金剛石，還包括近幾年比較熱門的碳納米管、碳納米線、富勒烯和石墨烯等新型碳納米材料。碳納米材料因其化學(xué)穩(wěn)定性高、導(dǎo)電性好、價格低廉等優(yōu)點，已廣泛應(yīng)用在吸附、電化學(xué)、催化等領(lǐng)域中。Dong 等［22］制備了直徑為350 nm、孔徑分布有序的介孔碳球并成功穩(wěn)定皮克林乳液，對此碳球進(jìn)行硝酸化改性，結(jié)果顯示硝酸化雖然會降低碳球的比表面積和孔容，但經(jīng)過硝酸化的介孔碳球功能基團(tuán)較多，改變了載體的微環(huán)境，更適合用于酶的固定化。Diaz de Tuesta 等［23］采用乙烯，乙烯/乙腈作為碳前體和碳/氮前體合成碳納米管進(jìn)行皮克林乳液界面催化，展示了制備的兩親性碳納米管的高催化性能。

1.3 磁性納米顆粒

磁性納米材料由于具有易分離的特點，受到了不少研究者的青睞。Zhou 等［24］以經(jīng)典共沉淀法制備超順磁Fe3O4納米粒子，作為皮克林乳液的穩(wěn)定劑，考察了粒子濃度、油/水體積比、油極性等因素對功能性乳劑的類型、穩(wěn)定性、組成和形貌的影響。研究表明，對于親水的Fe3O4納米顆粒，非極性和弱極性油有利于形成穩(wěn)定的O/W 型乳液，液滴的平均尺寸隨著油的體積分?jǐn)?shù)增大和粒子濃度的降低而增大，乳液穩(wěn)定性下降。Xie 等［25］制備了一種光磁雙響應(yīng)的皮克林乳狀液微反應(yīng)器，利用二氧化鈦（TiO2）納米粒子在紫外線照射下潤濕性會改變的特點，將TiO2納米粒子和磁性Fe3O4納米顆粒結(jié)合，預(yù)先包封不同反應(yīng)物的液滴，在外加磁場的作用下，彼此靠得很近，由于液滴的聚結(jié)合并，使孤立的反應(yīng)物接觸，從而在紫外線照射下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。實現(xiàn)了一種以非侵入性和良好控制的方式觸發(fā)化學(xué)反應(yīng)的方法。

1.4 天然穩(wěn)定劑

1.4.1 淀粉 淀粉是一種可以從多種植物資源中提取的天然物質(zhì)。淀粉顆粒具有可生物降解、無毒等優(yōu)點，是食品工業(yè)、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域的理想選擇。然而，淀粉顆粒的粒徑范圍較大，并且天然淀粉顆粒不具有疏水性，因此在乳化過程中一般不適合吸附在油水界面上［26］，需要對其進(jìn)行表面改性才能更成功地穩(wěn)定O/W 皮克林乳液。Li 等［27］用辛烯基琥珀酸對淀粉球晶，大米淀粉，蠟質(zhì)玉米淀粉和蠟質(zhì)馬鈴薯淀粉4 種淀粉進(jìn)行改性。如表1 所示，淀粉顆粒經(jīng)辛烯基琥珀?；?，顆粒的接觸角明顯增大，顆粒粒徑變小，乳化性能變好。Ge 等［28］以不同大小的玉米、木薯、甘薯和糯玉米淀粉納米粒子作為穩(wěn)定劑制備了皮克林乳狀液，研究發(fā)現(xiàn)木薯、紅薯和玉米淀粉納米顆粒近中性濕潤，更適合皮克林乳液穩(wěn)定。另外結(jié)果還顯示甘薯和玉米淀粉納米顆粒直徑在100-220 nm 范圍內(nèi)穩(wěn)定的皮克林乳液，其穩(wěn)定性要優(yōu)于直徑小于100 nm 或大于220 nm 顆粒所穩(wěn)定的皮克林乳液，說明淀粉顆?？赡茉谝欢ǖ拇笮》秶鷥?nèi)才具有良好的穩(wěn)定能力。

1.4.2 大豆蛋白 大豆蛋白是一種植物性蛋白質(zhì)，來源廣泛，營養(yǎng)豐富。其中，大豆分離蛋白是大豆蛋白最商業(yè)化的一種產(chǎn)品。在大豆分離蛋白的商業(yè)化生產(chǎn)過程中，大豆分離蛋白中的球蛋白很容易發(fā)生變性，因此大多數(shù)球蛋白以聚集體的形式存在。聚集體蛋白除了具有不溶性外，還表現(xiàn)出良好的表面活性［29］。此外，它們適用于高壓乳化形成更細(xì)小的液滴［30］，這使大豆分離蛋白有望成為一種有效的皮克林乳液穩(wěn)定劑。Liu 等［29］首次報道了具有良好乳化性能的熱誘導(dǎo)大豆蛋白聚集體。將大豆分離蛋白經(jīng)95℃加熱15 min，然后加入NaCl 進(jìn)行靜電篩選，形成納米顆粒聚集體。所制備的納米聚集體粒徑為100 nm，相較與未加熱的大豆分離蛋白疏水性更強，并且乳液穩(wěn)定性隨油的比例增加而增加。乳化穩(wěn)定性的提高主要與加熱后凝膠狀網(wǎng)狀物的形成有關(guān)，這種網(wǎng)狀物可以將油滴圈閉在網(wǎng)狀物中。在另一項研究中，Ju 等［31］利用大豆分離蛋白和花青素制備新型皮克林乳狀液。大豆分離蛋白納米顆粒能夠穩(wěn)定乳液和泡沫，花青素可以降低顆粒直徑，將他們通過共價鍵復(fù)合可以減小大豆分離蛋白的粒徑，提高乳液的穩(wěn)定性和抗氧化活性。近年來，也有不少用多酚類等活性物質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合作為穩(wěn)定皮克林乳液的穩(wěn)定劑。另外，還有將蛋白與纖維素顆粒結(jié)合的穩(wěn)定乳液的研究［32-33］。這些研究可能對基于蛋白質(zhì)的乳液配方的設(shè)計和制造，甚至對具有某些獨特功能的大豆蛋白產(chǎn)品的開發(fā)具有重要意義。

1.4.3 纖維素 纖維素納米顆粒（包括晶體和纖化纖維）可由可再生資源（如植物廢料和木漿）持續(xù)生產(chǎn)，或由細(xì)菌乙氧基桿菌生物合成。纖維素可分散在水中，在乳液中起物理穩(wěn)定劑的作用，吸附在油水界面。Li 等［14］利用從芒草中提取的纖維素納米纖維（CNFs）成功地制備了一種高穩(wěn)定性的皮克林乳液。隨著均質(zhì)次數(shù)的增加，CNFs 的持水能力明顯增強。此外，較高的CNFs 含量也能顯著提高乳液的穩(wěn)定性。Li 等［34］還利用細(xì)菌纖維素的乳化能力和茶多酚優(yōu)秀的抗氧化能力，制備了茶多酚改性的細(xì)菌纖維素（TPs/BC）納米纖維，并將其作為油水乳化液的皮克林乳化劑。TPs/BC 納米纖維除了具有穩(wěn)定乳劑的物理性質(zhì)和對脂質(zhì)氧化的保護(hù)作用外，還可以通過與自由基結(jié)合或減少自由基從而起到抗氧化的作用。

表1 不同種類淀粉改性前后的顆粒尺寸與三相接觸角［27］

2 皮克林乳液在酶促反應(yīng)中的應(yīng)用

酶是具有高度選擇性的生物催化劑，因其需要一定的水環(huán)境而在許多反應(yīng)中受到了限制。皮克林乳液酶反應(yīng)體系中應(yīng)用的最多的酶是脂肪酶，大多數(shù)脂肪酶具有“界面效應(yīng)”，只有在油相和水相的界面處才能發(fā)揮催化作用［22］。將皮克林乳液應(yīng)用到脂肪酶催化的反應(yīng)中可提供更大的界面面積，加快界面?zhèn)髻|(zhì)，是建立高效催化的多相酶反應(yīng)體系的絕佳方案。目前皮克林酶反應(yīng)體系主要分為兩大類：一是游離酶皮克林乳液反應(yīng)體系；二是固定化酶皮克林乳液反應(yīng)體系。

2.1 游離酶

游離酶皮克林乳液反應(yīng)體系是先將游離酶溶解于一定量的水相中，加入穩(wěn)定劑和有機相進(jìn)行機械攪拌，得到一個在皮克林乳液體系中由游離酶催化的化學(xué)反應(yīng)體系。Yu 等［35］用氨基修飾的二氧化硅顆粒作為皮克林乳液的穩(wěn)定劑，并將其用于脂肪酶CRL 催化的橄欖油水解等雙相生物催化反應(yīng)中，結(jié)果顯示在皮克林乳液中橄欖油水解的轉(zhuǎn)化率可達(dá)到91%，相較于機械攪拌的無溶劑體系中轉(zhuǎn)換率提高了20%。另外，結(jié)果還顯示在單獨添加了表面活性劑與二氧化硅的反應(yīng)體系中，轉(zhuǎn)換率分別降低為58%和10%，這可能是因為脂肪酶與表面活性劑或二氧化硅納米顆粒之間的某些相互作用導(dǎo)致酶的變性和催化活性的降低。在未均質(zhì)僅僅使用機械攪拌的兩相體系中，轉(zhuǎn)化率也僅僅只有17%。在皮克林乳液中高的轉(zhuǎn)化率說明表面活性劑的負(fù)面作用在皮克林乳狀液中得到了明顯抑制，而且皮克林乳液可以大大提高雙相體系中界面催化的效率。雖然皮克林乳液在游離酶催化反應(yīng)中 可以大大提高多相體系中界面催化的效率，但同時存在著不易回收、酶容易失活等缺點，產(chǎn)物中若存在水溶性物質(zhì)，就很難將游離酶分離出來，這使工業(yè)生產(chǎn)會付出較高的成本。這種方法更適用于較為便宜的商品化酶，僅僅只需要利用皮克林乳液來加快反應(yīng)速度、提高轉(zhuǎn)化率，在反應(yīng)完成后，分離固體顆粒滅酶即可。

2.2 固定化酶

相較于游離酶皮克林乳液反應(yīng)體系，固定化酶皮克林乳液體系具有更大的工業(yè)應(yīng)用潛力。固定化酶皮克林乳液反應(yīng)體系是將皮克林乳液的穩(wěn)定劑同時作為酶的固定化載體，在這種情況下，酶在皮克林乳液界面的位置使油-酶-水界面面積最大化，不僅加快了反應(yīng)速度，提高了轉(zhuǎn)化率，同時酶的固定化也可以一定程度上提高酶的穩(wěn)定性，避免酶的失活，方便酶的回收再利用［36-37］。近年來報道的固定化酶皮克林乳液反應(yīng)體系如表2 所示。

Dong 等［22］將脂肪酶AYS 吸附固定在介孔碳球上制備了皮克林乳液，并成功應(yīng)用于植物甾醇和α-亞麻酸的酯化反應(yīng)中，在此反應(yīng)體系中轉(zhuǎn)化率高達(dá)92%，反應(yīng)時間只需1.5 h，催化效率是雙相體系的5.6倍，并且固定化酶重復(fù)利用10 次以后，轉(zhuǎn)化率依舊高達(dá)90%以上，而游離酶在反應(yīng)4 次之后基本沒有活力，該反應(yīng)體系不僅具有高效快速的催化性能，而且還具有良好的操作穩(wěn)定性和重復(fù)性。Wang 等［38］制備了一種用來穩(wěn)定皮克林乳液的共聚物納米顆粒，并構(gòu)建了游離酶和固定化酶兩種皮克林乳液反應(yīng)體系。以甲苯為有機相，對1-己醇與己酸的酯化反應(yīng)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，在兩種皮克林乳劑的平衡狀態(tài)下，反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率達(dá)到了80%-90%，并且固定化酶反應(yīng)體系中脂肪酶顯示出更高的比活性，這是由于固定在聚合體管腔內(nèi)的脂肪酶全部分布在皮克林乳狀液的界面上，與前者相比，酶的利用率得到了提高。Yang 等［39］考慮酶與載體之間吸附作用較弱，酶容易發(fā)生浸出或變性，用共價交聯(lián)固定化酶時，酶的活性會不可避免的降低的問題，開發(fā)了一種具有表面活性的海藻酸鹽粒子，將酶以綠色的方式包封在微粒中，通過調(diào)節(jié)接枝二氧化鈦納米粒子的碳鏈長度，可使高度親水的海藻酸鹽微粒子易于微調(diào)，具有適當(dāng)?shù)臐櫇裥?，從而穩(wěn)定目標(biāo)乳液。由于其微膠囊化條件溫和、微環(huán)境生物相容性好、油水界面面積大、擴散距離短，將其用于以正己烷為油相，1-己醇與己酸的酯化反應(yīng)，結(jié)果證實了在此反應(yīng)體系中脂肪酶催化活性高、穩(wěn)定性好。此外，通過重力沉降可以很容易地分離出含有產(chǎn)物/底物的有機相，從而使皮克林乳液可以被回收并重復(fù)使用多個循環(huán)。但以包封的方式固定化酶不利于酶活性中心的暴露，因此選擇一個合適的固定化方法可以有效提高酶催化性能。

固定化酶皮克林乳液反應(yīng)體系既發(fā)揮了皮克林乳液最大化了界面催化的反應(yīng)面積的作用，又結(jié)合了固定化酶穩(wěn)定性高，易于回收的優(yōu)點。可以預(yù)見，此反應(yīng)體系在綠色催化領(lǐng)域有巨大的應(yīng)用潛力。

表2 近年來報道的固定化酶皮克林乳液反應(yīng)體系

3 “開關(guān)”調(diào)控皮克林乳液酶反應(yīng)體系

在介紹皮克林乳液穩(wěn)定劑時已簡單提到了一些具有環(huán)境響應(yīng)能力的乳液。在這里我們稱之為開關(guān)型皮克林乳液。當(dāng)受到一定的環(huán)境刺激時，穩(wěn)定皮克林乳液的固體顆粒顯示出一定表面活性（開），當(dāng)撤去或改變外部環(huán)境的刺激，固體顆粒失去表面活性（關(guān)）。開關(guān)型皮克林乳液在催化反應(yīng)中有很大的優(yōu)勢，在這種智能體系中，粒子的表面濕潤性很容易受到外部環(huán)境刺激的調(diào)節(jié)。因此，開關(guān)型皮克林乳液可以以一種簡單、綠色的方式達(dá)到破乳效果。將開關(guān)型皮克林乳液用于酶促反應(yīng)，可以控制反應(yīng)進(jìn)行，解決過于穩(wěn)定的皮克林乳液反應(yīng)體系中產(chǎn)物的分離和酶的回收。近些年，關(guān)于開關(guān)型的皮克林乳液也有不少的研究，根據(jù)調(diào)控手段的類型可大概分為CO2/N2、電化學(xué)、磁場、pH、溫度、光調(diào)控等。

3.1 CO2/N2調(diào)控

CO2/N2由于便宜，且對環(huán)境無害的特點，在生物催化中特別有吸引力。此外，CO2和N2對酶幾乎沒有損傷，而且可以通過簡單的操作很容易的將他們從反應(yīng)體系中除去。Yu 等［35］在DMA-CO2疏水氧化硅納米顆粒穩(wěn)定的水包油皮克林乳液中進(jìn)行橄欖油的水解反應(yīng)。在反應(yīng)時，向溶液中通入CO2，乳液中的N，N-二甲基十二胺（DMA）發(fā)生質(zhì)子化，轉(zhuǎn)變成碳酸氫鹽結(jié)構(gòu)，形成顆粒具有一定的表面活性。在反應(yīng)結(jié)束時，室溫下通過鼓泡N2，溶解的CO2被鼓出，碳酸氫鹽結(jié)構(gòu)被破壞，使DMA-CO2 變?yōu)镈MA（中性），顆粒失去表面活性從而達(dá)到破乳的效果。此時含有產(chǎn)物的油相可以很容易地分離，而水相中的脂肪酶CRL 和二氧化硅納米顆粒可以循環(huán)利用。與離心或超濾等其他分離乳劑的方法相比，使用N2/CO2的方法可以使工業(yè)化生產(chǎn)中的大規(guī)模操作變得容易，不需要特殊或昂貴的設(shè)備。酶和顆粒的破乳和回收可以通過在室溫下鼓泡N2來實現(xiàn)。

3.2 電化學(xué)調(diào)控

電化學(xué)調(diào)控作用的皮克林乳液固體顆粒中常含有氧化還原活性中心，在電化學(xué)刺激或外加氧化劑、還原劑作用下，其氧化還原活性中心可在氧化態(tài)和還原態(tài)之間發(fā)生可逆轉(zhuǎn)換，從而實現(xiàn)該物質(zhì)在“有表面活性”和“無表面活性”之間的切換。Peng 等［44］利用二茂鐵基團(tuán)和β-環(huán)糊精的功能化聚合物自組裝制備得到具有氧化還原響應(yīng)性的微凝膠，微凝膠的形成和變形可以通過外部電位來調(diào)節(jié)，從而使皮克林乳液具有電化學(xué)控制的可逆性。以脂肪酶PCL 催化三乙酸乙酯水解，動力學(xué)拆分（R，S）-1-苯乙醇為模型。在三乙酸乙酯的水解反應(yīng)中，PCL 在乳液體系中的比活性是在簡單的兩相體系中的兩倍多。在（R，S）-1-苯乙醇的動力拆分中，乳液體系中的轉(zhuǎn)化率也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于兩相體系中的轉(zhuǎn)化率。并且反應(yīng)結(jié)束后，通過施加一個0.8 V 的電壓，微凝膠顆粒被解體，乳液被破壞，這是因為二茂鐵基團(tuán)在電化學(xué)作用下發(fā)生氧化還原反應(yīng)，電子的得失影響顆粒的親疏水性。此時水相和有機相分離，產(chǎn)物分散在有機相中，酶分散在水相中，當(dāng)重新向水相中加入溶劑和底物，再施加一個0.2 V 的電壓時，經(jīng)過均質(zhì)，又重新形成皮克林乳液，進(jìn)行下一個反應(yīng)循環(huán)。三次循環(huán)后的脂肪酶的反應(yīng)活性仍然高于兩相體系。

3.3 其他調(diào)控

目前還有許多以pH［45-46］、光［47-48］、熱［49-50］等為觸發(fā)器的開關(guān)型皮克林乳液。其中以pH 的應(yīng)用最為廣泛，在這種皮克林乳化劑的分子結(jié)構(gòu)中，通常含有可離子化的基團(tuán)，如胺基、羧基等，通過調(diào)節(jié)體系的pH，上述基團(tuán)可結(jié)合或失去質(zhì)子，從而使結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，進(jìn)而調(diào)控顆粒表面的親疏水性［46］。Huang 等［51］使用適當(dāng)?shù)膒H 響應(yīng)的納米顆粒作為催化劑和乳化劑用于皮克林乳液中的加氫反應(yīng)，在反應(yīng)開始時將常規(guī)的雙相體系轉(zhuǎn)化為油包水皮克林乳液體系。反應(yīng)結(jié)束后，通過加入酸來破乳，從而發(fā)生宏觀相分離。但是少有文獻(xiàn)記載將pH 調(diào)控的開關(guān)型皮克林乳液用于酶促反應(yīng)中，因為大多數(shù)酶對pH 敏感，容易發(fā)生構(gòu)象變化引起酶的失活。同樣的，對于通過光和溫度調(diào)控的開關(guān)型皮克林乳液，由于這些因素都容易引起酶的失活，因此目前幾乎沒有文獻(xiàn)報道這種開關(guān)型皮克林乳液在酶反應(yīng)體系中的應(yīng)用，在這里不再做詳細(xì)介紹。對于磁響應(yīng)的皮克林乳液，單一的磁響應(yīng)在束縛能的限制下無法達(dá)到顆粒快速回收的目的［52］，而且對于反應(yīng)中如何通過給予合適的磁場破乳及破乳后再形成皮克林乳液，目前尚未有過明確的報道?，F(xiàn)有的技術(shù)通常是將磁響應(yīng)與其他響應(yīng)相結(jié)合以形成開關(guān)型皮克林乳液［25］。因此如何解決這些環(huán)境刺激對酶結(jié)構(gòu)的影響有待研究者們進(jìn)一步研究。

4 總結(jié)與展望

皮克林乳液酶反應(yīng)體系克服了雙相體系中酶的界面催化傳質(zhì)阻力大、反應(yīng)效率低、酶容易失活等缺點，為綠色化學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展提供了一個新的方向，具有廣闊的工業(yè)應(yīng)用前景。然而，皮克林乳液酶反應(yīng)體系目前還處于初步探索階段，仍有許多的問題亟待解決。（1）大多數(shù)天然穩(wěn)定劑來源有限，且在油水界面不具有良好的潤濕性，需要通過一定的化學(xué)改性才能使乳液穩(wěn)定，因此尋求具有油相和水相都具有良好的潤濕性的天然穩(wěn)定劑將是未來的發(fā)展趨勢。（2）酶固定化載體具有嚴(yán)格的限制條件，因此制備的穩(wěn)定劑同時也要具備良好的固載能力，使乳劑同時發(fā)揮穩(wěn)定劑和催化劑的作用，減輕反應(yīng)體系的“負(fù)擔(dān)”。（3）開關(guān)型皮克林乳液可以有效的控制破乳，但在酶反應(yīng)體系中由于酶易受到環(huán)境的影響而限制了其應(yīng)用，如何發(fā)展具有環(huán)境響應(yīng)的皮克林乳液酶反應(yīng)體系有待研究者們進(jìn)一步探究。