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        高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛奶中青霉素類藥物殘留量

        2016-11-09 08:22:46董雪玲北京東方縱橫產(chǎn)品檢測(cè)有限公司有機(jī)實(shí)驗(yàn)室北京101102
        現(xiàn)代食品 2016年2期

        ◎董雪玲(北京東方縱橫產(chǎn)品檢測(cè)有限公司(有機(jī)實(shí)驗(yàn)室),北京 101102)

        高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛奶中青霉素類藥物殘留量

        ◎董雪玲
        (北京東方縱橫產(chǎn)品檢測(cè)有限公司(有機(jī)實(shí)驗(yàn)室),北京 101102)

        為測(cè)定牛奶中青霉素類藥物殘留量,將牛奶樣品采用乙腈沉淀蛋白,通過正己烷液萃取除脂,經(jīng)高效液相色譜C18柱分離,選用乙腈+0.1%甲酸-水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法在正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式下測(cè)定。結(jié)果表明,采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛奶中青霉素類藥物殘留量在國(guó)家規(guī)定的限量范圍內(nèi),該方法可以簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確地測(cè)定牛奶中青霉素類藥物殘留量。

        牛奶;青霉素;高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

        目前,測(cè)定牛奶中青霉素類藥物殘留的分析方法主要有微生物法、高效液相色譜法、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[1,2]。其中,高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法具有較高的準(zhǔn)確性、高特異性,同時(shí)不受化學(xué)基質(zhì)的影響,并且應(yīng)用簡(jiǎn)便快速。

        1 材料與方法

        1.1儀器與試劑

        Agilent 6460三重四級(jí)桿液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(安捷倫公司);甲醇、乙睛和正己烷均為色譜純;標(biāo)準(zhǔn)品:萘夫西林(純度≥94.0%)、青霉素G(純度≥97.2%)、哌拉西林(純度≥98.2%)、青霉素V(純度≥97.9%)、苯唑西林(純度≥95.9%)、阿莫西林(純度≥99.5%)、氨芐西林(純度≥98.8%)、氯唑西林(純度≥98.9%)和雙氯西林(純度≥97.5 %),Sigma公司產(chǎn)品。

        1.2方法

        1.2.1樣品處理

        牛奶樣品處理方法參照GB/T 20755-2006方法。

        1.2.2色譜條件

        色譜條件參照GB/T 20755-2006方法。

        1.2.3青霉素類標(biāo)準(zhǔn)系列溶液

        分別量取1 μ g/mL青霉素類混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備5、10、20、40、80 μ L和100 μ L到1 mL容量瓶中,用乙腈溶液定容。得到濃度為5、10、20、40、80 ng/mL 和100 ng/mL的青霉素類系列標(biāo)準(zhǔn)工作液[3]。以含量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制工作曲線。

        2 結(jié)果

        2.19種青霉素類藥物標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性相關(guān)系數(shù)

        按照1.2.3進(jìn)行配制,并按照1.2.2色譜條件進(jìn)行分析,9種青霉素類藥物在5~100 μ g/L時(shí)具有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)(r)為0.999 2~0.999 8。其中:

        2.2牛奶中青霉素的含量

        依據(jù)1.2.1樣品處理過程對(duì)樣品進(jìn)行處理,經(jīng)0.22 μ m濾膜過濾,上機(jī)測(cè)試。本批次測(cè)定的牛奶樣品得到的結(jié)果為萘夫西林、青霉素G、哌拉西林、青霉素V、苯唑西林、阿莫西林、氨芐西林、氯唑西林和雙氯西林均沒有檢測(cè)到。牛奶中這些指標(biāo)的含量均符合國(guó)標(biāo)限定的含量。

        3 結(jié)論

        青霉素類抗生素屬于β-內(nèi)酞胺類抗生素,是一類重要的抗菌藥物,在獸醫(yī)臨床上廣泛應(yīng)用。此類藥物不規(guī)范的使用會(huì)導(dǎo)致青霉素殘留在牛奶中,如果長(zhǎng)期飲用會(huì)使青霉素在人體內(nèi)不斷積累從而造成人體生理功能紊亂。許多國(guó)家對(duì)青霉素殘留牛奶都進(jìn)行了嚴(yán)格管制。采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法可以測(cè)定牛奶中青霉素類藥物殘留量,本批次的牛奶中的青霉素含量均在國(guó)家規(guī)定的范圍內(nèi),對(duì)人體不會(huì)造成傷害。

        [1]王惠嬌,黃方取,周鴻艷,等.高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛奶中8種青霉素類藥物[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2015,25(17):2881-2883.

        [2]趙維,杜鋼,李向榮.高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛奶中9種青霉素類藥物的殘留量[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào),2012,41(2):171-176.

        [3]肖惠貞,劉紅河,甄珍,等.高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定乳制品中7種青霉素類抗生素殘留[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2014,24(11):1546-1552.

        Penicillin Drugs Residues in Milk with High Performance Liquid Chromatography - Tandem Mass Spectrometry Determination

        Dong Xueling
        (Beijing Oriental and Product Testing Co. LTD.,Beijing 101102,China)

        For the determination of penicillin drugs residues in milk,the milk samples were determinated by using protein precipitation by n-hexane extraction liquid grease,by using high performance liquid chromatography C18 column,using acetonitrile +0.1% formic acid and water as mobile phase in gradient elution,using high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry in positive ion multiple reaction monitoring mode. The results showed that HPLC-MS/MS determinating the penicillin drugs residues in milk was in the limited within the scope stipulated by the state,the method was simple,rapid and accurate for determination of penicillin drugs residues in milk.

        Milk; Penicillin; HPLC-MS/MS

        10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.04.030

        TS252.7;O657.63

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