田小曼,李朝紅

(1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西 楊凌 712100；2.漢中職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西 漢中 723002)

小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)引起的、在小麥生產(chǎn)的各個(gè)生育期都可發(fā)生的一種真菌病害[1]。發(fā)生赤霉病后，不僅可以造成小麥減產(chǎn)、品質(zhì)降低，而且病粒中還含有脫氧雪腐鐮刀菌醇(deoxynivalenol，DON)、玉蜀黍赤霉烯酮(zearalenone，ZEN)等多種對(duì)人、畜有害的毒素，人、畜誤食后可致發(fā)熱、嘔吐、腹瀉等癥狀，懷孕母畜中毒后可引發(fā)流產(chǎn)，是小麥生產(chǎn)上的重要病害[2～4]。近年來(lái)由于赤霉病菌對(duì)多菌靈等苯并咪唑類殺菌劑耐藥性明顯、抗性品種缺乏等原因[5～6]，造成赤霉病頻繁發(fā)生，危害逐漸嚴(yán)重[7～8]。筆者試驗(yàn)旨在篩選出對(duì)赤霉病有較好療效的化學(xué)藥劑。

1 材料與方法

1.1 材料

供試藥劑：供試藥劑為市場(chǎng)上供應(yīng)的用于防治真菌性病害的藥劑28種，主要來(lái)自陜西上格之路生物有限公司、四川國(guó)光農(nóng)化有限公司、上海杜邦農(nóng)化有限公司、拜耳作物科學(xué)公司等，見表1。

表1 供試藥劑

供試菌種：強(qiáng)致病力禾谷鐮刀菌(Fusarium graminearum Schm.)菌株作接種體。供試小麥品種：銘賢169。

1.2 方法

1.2.1 皿內(nèi)抑菌試驗(yàn) 將一系列濃度的藥液分別與熱融的PDA培養(yǎng)基混勻，配制成含有有效成分為0、0.1、0.5、1、5、10、50、100和1 000μg·mL-1的帶毒培養(yǎng)基。分別倒入9 cm的培養(yǎng)皿中，冷卻后接入用直徑為5 mm打孔器打好的小麥赤霉病菌餅，菌餅反向置于含毒培養(yǎng)基中間。每個(gè)處理重復(fù)三次，置于25℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。72h后每隔24h測(cè)量菌落生長(zhǎng)的大小[9～10]，計(jì)算抑制率、EC50等，對(duì)藥劑進(jìn)行初步篩選。

1.2.2 孢子萌發(fā)試驗(yàn) 將在麥粒上培養(yǎng)的禾谷鐮刀菌分生孢子用蒸餾水洗脫，制成孢子懸浮液。將篩選出來(lái)的抑菌效果較好的幾種藥劑逐級(jí)稀釋成系列濃度的藥液，與孢子懸浮液混合制成有效成分為1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100、200、400、800和1 600μg·mL-1的培養(yǎng)液。取適量于凹玻片內(nèi)，每濃度重復(fù)三次。將凹玻片置于保濕皿內(nèi)，在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后鏡檢。鏡檢時(shí)，每張玻片取10個(gè)視野，詳細(xì)統(tǒng)計(jì)孢子總數(shù)、萌發(fā)數(shù)和畸變數(shù)[11]。

1.2.3 田間藥效試驗(yàn) 挑選孢子萌發(fā)試驗(yàn)中抑制率和畸變率高的幾種藥劑，在2017年4月份進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)，以清水和多菌靈為對(duì)照。小區(qū)面積為6.5 m2，每個(gè)處理重復(fù)3次。在小麥揚(yáng)花期噴灑配制好的禾谷鐮刀菌孢子懸浮液，2 d后噴灑各種藥劑，乳熟后期調(diào)查發(fā)病情況。調(diào)查時(shí)每個(gè)小區(qū)五點(diǎn)取樣，每點(diǎn)選取200個(gè)麥穗，詳細(xì)記錄發(fā)病情況，根據(jù)病情指數(shù)計(jì)算防治效果。

2 結(jié)果與分析

2.1 皿內(nèi)抑菌試驗(yàn)

測(cè)定結(jié)果各種藥劑對(duì)赤霉病菌的生長(zhǎng)抑制作用強(qiáng)度均隨藥劑濃度增加而增強(qiáng)，但有的藥劑72h的抑制效果比120 h明顯，有的藥劑120 h的抑制效果比72 h的抑制效果明顯，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2、續(xù)表2。

表2 不同藥劑對(duì)小麥赤霉病菌菌落生長(zhǎng)的抑制作用

續(xù)表2 不同藥劑對(duì)小麥赤霉病菌菌落生長(zhǎng)的抑制作用

由表2、續(xù)表2不難看出三唑酮、恒順、灰克、銀法力等藥劑對(duì)禾谷鐮刀菌幾乎沒(méi)有抑制作用；甲基托布津、易保、佳托、小礬等藥劑的藥力作用時(shí)間短暫，72 h時(shí)有較好的抑制作用，120 h時(shí)的抑制作用明顯減弱，有的甚至幾乎喪失抑制作用；福星、歐博、鼎嘉、博醫(yī)等藥劑對(duì)禾谷鐮刀菌的抑制效果一般，EC50偏大；巨樂(lè)、滿艷、使百克等藥劑抑制作用持久且藥力作用時(shí)間長(zhǎng)，72 h與120 h的抑制率相差不大，且EC50都比較理想。

好力克、鮮貯、滿艷、巨樂(lè)、使百克和立克莠這六種藥劑在有效成分含量≥10μg·mL-1時(shí)72h和120 h的抑制率都能達(dá)到95%以上，其中鮮貯、滿艷和使百克這三種藥劑在有效成分含量≥5μg·mL-1時(shí)72 h和120 h的抑制率依舊能達(dá)到95%以上。因此，通過(guò)初步篩選，挑選好力克、鮮貯、滿艷、巨樂(lè)、使百克和立克莠這六種藥劑繼續(xù)做孢子萌發(fā)試驗(yàn)，其他藥劑淘汰。

2.2 藥劑對(duì)孢子的毒力

用懸滴法來(lái)測(cè)定禾谷鐮刀菌(Fusarium graminearum Schw.)分生孢子在各種藥劑不同濃度下的萌發(fā)情況。實(shí)驗(yàn)用藥有好立克、鮮貯、滿艷、巨樂(lè)、使百克、立克秀。每種藥劑設(shè)置11種不同濃度，分別為0、1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100、200、400、800、1 600、(單位為μg·mL-1；0代表清水對(duì)照)，滿艷、鮮貯和使百克的有效成分都是咪鮮胺，立克莠和好力克的有效成分均為戊唑醇，巨樂(lè)的有效成分為咪鮮胺錳絡(luò)合物，結(jié)合抑制率和畸變率，選擇巨樂(lè)、鮮貯和好力克作為田間藥效試驗(yàn)的供試藥劑。不同藥劑對(duì)禾谷鐮刀菌分生孢子具體作用如表3。

表3 各種藥劑對(duì)禾谷鐮刀菌分生孢子抑制和致畸作用

24 h以后，各藥劑對(duì)禾谷鐮刀菌分生孢子的萌發(fā)均有抑制作用，其中以鮮貯和滿艷的抑制作用最強(qiáng)，當(dāng)有效成分含量≥100 μg·mL-1時(shí)，幾乎沒(méi)有孢子能萌發(fā)，但這兩種藥的致畸效果不太明顯。巨樂(lè)和好力克在高濃度時(shí)，對(duì)孢子的致畸作用明顯，也有較好的抑制萌發(fā)的作用。使百克和立克莠因?yàn)楦邼舛葧r(shí)顆粒太多，顯微鏡下無(wú)法觀察孢子的萌發(fā)情況和畸變情況。

2.3 田間藥效試驗(yàn)

各種藥劑對(duì)小麥赤霉病的田間防治效果詳情見表4?？梢娋迾?lè)防治效果優(yōu)異，2 000倍液防效依舊能達(dá)到85%以上，鮮貯次之，好力克最后。巨樂(lè)和鮮貯藥劑用量≥250 μg·mL-1時(shí)防效都比多菌靈500 μg·mL-1的防效好，而好力克用量≥331 μg·mL-1時(shí)，防效也比多菌靈500 μg·mL-1的防效好。因此可見，所篩選出來(lái)的這三種供試藥劑都比多菌靈防治小麥赤霉病更有效。

表4 各種藥劑防治小麥赤霉病(穗腐)的效果

3 結(jié)論與討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，咪鮮胺、戊唑醇和咪鮮胺錳絡(luò)合物對(duì)小麥赤霉病菌有強(qiáng)抑制作用。篩選出來(lái)的三種藥劑鮮貯、好力克和巨樂(lè)對(duì)小麥赤霉病有防治效果。

當(dāng)前麥田病害系統(tǒng)日趨復(fù)雜，小麥銹病、赤霉病、黑穗病、白粉病、紋枯病等是影響小麥產(chǎn)量的主要病害，這些病害并發(fā)或交替發(fā)生，給化學(xué)防治帶來(lái)了不少難題[12]。

筆者研究初步證明咪鮮胺、戊唑醇和咪鮮胺錳絡(luò)合物對(duì)小麥赤霉病菌有比較好的防效，還有其他研究證實(shí)了戊唑醇對(duì)小麥白粉病、小麥條銹病、小麥紋枯病和散黑穗病有著良好的防治效果?？梢娢爝虼加袧摿Τ蔀橐环N小麥病害綜合防治的藥劑。

筆者實(shí)驗(yàn)只是大體的對(duì)市場(chǎng)上現(xiàn)存的藥劑進(jìn)行了篩選，沒(méi)有進(jìn)行過(guò)多的深入的研究。咪鮮胺、戊唑醇和咪鮮胺錳絡(luò)合物對(duì)小麥赤霉病菌是如何抑制的，對(duì)其他病害是否還有沒(méi)發(fā)掘的抑制效果，還需要進(jìn)一步研究。