徐藹宣 楊 建 陳志勇 張正帆 黃艷玲

(西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，動物科學(xué)國家民委重點實驗室，成都610041)

肉雞被毛厚、無汗腺且代謝旺盛，在全球變暖的大環(huán)境下，肉雞在夏季高密度飼養(yǎng)環(huán)境下易受高溫的影響產(chǎn)生熱應(yīng)激。熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞生長抑制[1]、腹脂沉積增多[2]、肉品質(zhì)下降[3]、機(jī)體免疫力降低[1,4]等，而家禽肉品質(zhì)及脂肪的沉積受飼糧因素的影響[5]。通過營養(yǎng)手段有效緩解家禽熱應(yīng)激，降低腹脂沉積，改善肉品質(zhì)，已成為肉雞養(yǎng)殖業(yè)亟待解決的問題之一。鉻是葡萄糖耐量因子(glucose tolerance factor，GTF)的重要組成成分，可以緩解熱應(yīng)激，提高熱應(yīng)激肉雞生長性能，改善肉品質(zhì)，降低腹脂沉積[6]。丙酸鉻(chromium propionate，CrPro)作為一種新型鉻源，是目前美國食品及藥品管理局(FDA)唯一允許在家禽飼糧中添加的鉻源[7]。共軛亞油酸(conjugated linoleic acids,CLA)是一類含有共軛雙鍵的亞油酸混合物，可以通過調(diào)節(jié)多種核轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，影響脂肪酸的攝取和氧化及脂質(zhì)的合成代謝，進(jìn)而降低體脂沉積，改善胴體品質(zhì)[8]。大量研究表明，CLA和鉻對于降低動物體脂沉積及改善肉品質(zhì)都有一定的作用，但目前關(guān)于CLA對熱應(yīng)激肉雞影響的報道較少，且尚未有對兩者互作的研究。因此，我們提出本試驗假說：熱應(yīng)激肉雞飼糧中同時添加鉻和CLA，對熱應(yīng)激肉雞的生長性能、胴體性能、肉品質(zhì)及脂肪沉積可能存在組合效應(yīng)。為此，本試驗通過在肉雞飼糧中同時添加CLA和鉻，來研究二者及其互作對熱應(yīng)激肉雞生長性能、胴體性能、肉品質(zhì)及脂肪沉積的影響，探討CLA和鉻之間是否有互作效應(yīng)，以期為熱應(yīng)激肉雞養(yǎng)殖提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

CLA購于青島某生物有限公司，純度80%，實測值為81.04%；CrPro購于珠海某工業(yè)有限公司，鉻含量0.04%。

1.2 基礎(chǔ)飼糧

基礎(chǔ)飼糧參照我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)和NRC(1994)[9]肉雞營養(yǎng)需要，配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗采用2×3兩因素隨機(jī)試驗設(shè)計，設(shè)置2個CLA水平(0、1%)和3個鉻水平(0、0.2、0.4 mg/kg)，選用216只體重一致的健康的1日齡科寶(Cobb)500白羽雌雛肉雞，隨機(jī)分為6個組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)6只雞。試驗飼糧是在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上由CLA等量代替葵花籽油，丙酸鉻等量替代玉米淀粉。試驗期42 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

試驗場地為西南民族大學(xué)科研雞場，飼養(yǎng)管理按《Cobb肉雞飼養(yǎng)管理手冊》進(jìn)行。試驗開始前對雞舍消毒。3層重疊式籠養(yǎng)，自由采食和飲水。自動化紅外燈控溫供暖，環(huán)境溫度保持在32～34 ℃，相對濕度為60%～70%。每周末進(jìn)行1次肉雞體溫(肛溫)的測定，以確保其處于熱應(yīng)激狀態(tài)。試驗結(jié)束時，禁食12 h，以重復(fù)為單位空腹稱重。

1.4 樣品采集及指標(biāo)測定

配制試驗飼糧時現(xiàn)場采樣，粉碎過200目篩后置于封口樣品袋中低溫干燥保存，以備分析鈣、總磷、粗蛋白質(zhì)和鉻含量。試驗第42天，所有雞只禁食不禁水12 h，于第2天08：00分別稱雞只空腹個體活重，從每個重復(fù)中按平均體重選取2只雞屠宰，取腹脂、胸肌(右側(cè))和腿肌(右側(cè))測定腹脂率、胸肌率和腿肌率等指標(biāo)，然后將部分胸肌和腿肌樣品用塑料袋分裝置于4 ℃冰箱內(nèi)，用于測定肌肉pH、肉色、滴水損失、蒸煮損失及剪切力。另取部分左側(cè)胸肌、腿肌及肝臟(左側(cè))樣品置-80 ℃保存，用于測定胸肌和腿肌肌內(nèi)脂肪含量及肝臟鉻含量。然后將雞拔毛、去頭、去腳和去內(nèi)臟后稱重，測其全凈膛率(以上采的肌肉樣品均稱重并計算在內(nèi))。

1.4.1 生長性能指標(biāo)

分別在試驗第1天、第21天和第42天以重復(fù)為單位稱雞只空腹重，并記錄耗料量，試驗雞死亡數(shù)量及原因。計算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 胴體性能指標(biāo)

在試驗第21天和第42天每個重復(fù)選取2只試驗雞于宰殺前禁食(不禁水)半天，然后稱活體重。屠宰時，采用頸靜脈放血法，計算屠宰率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率。

1.4.3 肉品質(zhì)指標(biāo)

1.4.3.1 胸肌pH及肉色

宰殺之后取胸肌和腿肌放于封口袋中，編號，放入4 ℃冰箱保存24 h，用pH計(OPTO-STAR)檢測測定pH(pH24 h)。在測完pH24 h基礎(chǔ)上，用色差儀測定胸肌和腿肌肉色的亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)值。

1.4.3.2 胸肌、腿肌蒸煮損失

參照Huang等[10]方法測定胸肌和腿肌蒸煮損失，將待測樣從-20 ℃冰箱取出后，轉(zhuǎn)移到4 ℃冰箱中解凍1 d，剪掉外邊脂肪和結(jié)締組織，切成長×寬×厚為3.0 cm×1.5 cm×0.5 cm的長方體塊狀，稱重(m1)并記錄，然后把肌肉用封口塑料袋包裝，抽去袋內(nèi)空氣，放入80 ℃恒溫水浴鍋10 min，水浴后放置室溫，用濾紙插去肉樣表面水分，稱重(m2)并記錄。計算公式如下：

蒸煮損失(%)=100×(m1-m2)/m1。

1.4.3.3 胸肌、腿肌剪切力

將測定蒸煮損失后的雞肉樣品，用TA-XT Plus物性分析儀測定雞肉嫩度，測定時使切刀垂直肌纖維方向，切割3個點求平均值。

1.4.3.4 脂肪沉積指標(biāo)

屠宰后立即剝離腹脂，稱重。另剝離胸肌、腿肌和左側(cè)肝臟，取約50 g的胸肌、腿肌和整塊左側(cè)肝臟，放置于編號的封口袋中，-20 ℃冰箱保存，待測胸肌肌內(nèi)脂肪和肝臟脂肪含量。

腹脂：包括腹部與肌胃及泄殖腔周圍的脂肪。腹脂率指腹脂重占全凈膛重的百分比。

胸肌、腿肌肌內(nèi)脂肪：用索氏提取法測定胸肌和腿肌肌內(nèi)脂肪含量[11]。取胸肌、腿肌置于105 ℃干燥箱中烘干，稱重；將脫脂濾紙在同條件下烘干，然后取1.5 g磨碎樣品包在濾紙中，再次烘干，稱重；然后將濾紙包放入索氏抽提器進(jìn)行抽提。

肝臟脂肪：同胸肌、腿肌肌內(nèi)脂肪測定方法。

1.4.4 肝臟鉻含量

將風(fēng)干肝臟樣品經(jīng)濃優(yōu)級硝酸(優(yōu)級純)在自動控溫電熱板中濕消化后，在石墨爐原子吸收光譜儀(型號SOLAAR S2，美國熱電公司)上測定肝臟鉻含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用SAS 9.0軟件MIXED程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行兩因素方差分析，以P<0.05為差異顯著，以0.05≤P≤0.10表示有差異顯著的趨勢，在差異顯著的基礎(chǔ)上采用LSD法對各組間進(jìn)行多重比較。數(shù)據(jù)以平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(standard error of mean,SEM)表示。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞生長性能的影響

由表2可知，飼糧中添加CLA和鉻以及二者互作對熱應(yīng)激肉雞平均日采食量、平均日增重和料重比均無顯著影響(P>0.05)。

表2 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞生長性能的影響

2.2 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞胴體性能的影響

由表3可知，飼糧中添加CLA提高了熱應(yīng)激肉雞腿肌率(P<0.05)，并有提高屠宰率的趨勢(P=0.071)。飼糧中添加鉻有降低熱應(yīng)激肉雞胸肌率的趨勢(P=0.099)。CLA和鉻互作對熱應(yīng)激肉雞胴體性能沒有顯著影響(P>0.05)。

2.3 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞胸肌和腿肌肉品質(zhì)的影響

由表4、表5可知，飼糧中添加CLA降低了熱應(yīng)激肉雞胸肌和腿肌肉色b*值和胸肌肉色L*值(P<0.05)，對其他肉品質(zhì)指標(biāo)無顯著影響(P>0.05)。飼糧中添加0.2 mg/kg鉻顯著提高了胸肌pH24 h(P<0.05)，飼糧中添加鉻對腿肌肉品質(zhì)指標(biāo)無顯著影響(P>0.05)。CLA和鉻互作對熱應(yīng)激肉雞胸肌和腿肌肉品質(zhì)指標(biāo)無顯著影響(P>0.05)。

2.4 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞脂肪沉積及肝臟鉻含量的影響

由表6可知，飼糧中添加CLA顯著降低了熱應(yīng)激肉雞的腹脂率和腿肌肌內(nèi)脂肪含量(P<0.05)；飼糧中添加鉻有降低熱應(yīng)激肉雞腹脂率的趨勢(P=0.097)，但對胸肌和腿肌肌內(nèi)脂肪含量均無顯著影響(P>0.05)。CLA和鉻互作有降低熱應(yīng)激肉雞腹脂率的趨勢(P=0.071)，其中，1% CLA+0.2 mg/kg鉻組合降低腹脂率效果最好，較對照組降低了14.55%。飼糧中添加CLA和鉻均顯著提高了熱應(yīng)激肉雞肝臟鉻含量(P<0.05)，且CLA和鉻互作對熱應(yīng)激肉雞肝臟鉻含量有顯著影響(P<0.05)。

表3 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞胴體性能的影響

表4 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞胸肌肉品質(zhì)的影響

表5 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞腿肌肉品質(zhì)的影響

3 討 論

3.1 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞生長性能的影響

目前飼糧添加CLA對動物生長性能影響有改善、抑制及無影響等不同的報道，造成這些差異的原因可能與動物種類、飼糧營養(yǎng)水平以及CLA不同的異構(gòu)體及添加劑量有關(guān)。飼糧中添加0.5%～1.0%的CLA提高了豬的平均日增重，并改善了料重比[12-13]。飼糧中添加超過1%的CLA能抑制肉雞的生長[14]。Jiang等[15]報道，在肉雞飼糧中添加1%的CLA對肉雞生長性能沒有顯著影響，Du等[16]和Zhang等[17]在肉雞上的試驗也得到了類似的結(jié)果。目前關(guān)于CLA在熱應(yīng)激肉雞上的研究較少，與常規(guī)飼糧飼喂肉雞的試驗結(jié)果類似，本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加1%的CLA對熱應(yīng)激肉雞的生長性能沒有顯著影響。

表6 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞脂肪沉積及肝臟鉻含量的影響

研究表明，飼糧中添加鉻能夠提高肉雞的平均日采食量、飼料轉(zhuǎn)化效率，促進(jìn)肉雞生長。由于肉雞對鉻的需要量因試驗動物階段、環(huán)境以及鉻源的不同而存在差異，推薦一般情況下鉻添加量為0.2～0.4 mg/kg，應(yīng)激狀態(tài)下肉雞的鉻添加量可以提高到0.4～1.2 mg/kg[18]。Hayat等[19]研究發(fā)現(xiàn)，在常規(guī)飼養(yǎng)狀態(tài)下，飼糧中添加0.15 mg/kg的CrPro可以提高肉雞的生產(chǎn)性能。與此相同，Arif等[20]在肉雞飼糧中添加0、0.2、0.4、0.8、1.6 mg/kg的CrPro，發(fā)現(xiàn)在常規(guī)飼養(yǎng)狀態(tài)下，隨著CrPro添加水平的增加，飼料轉(zhuǎn)化率和平均日增重顯著提高，其中添加0.4 mg/kg的CrPro的肉雞生長性能最好。Jahanian等[1]研究表明，熱應(yīng)激肉雞飼糧中添加0.5、1.0 mg/kg蛋氨酸鉻極顯著提高平均日采食量、均日增重和飼料轉(zhuǎn)化效率。與上述研究結(jié)果不同，本試驗未觀察到飼糧中添加鉻對熱應(yīng)激肉雞生長性能產(chǎn)生影響。Huang等[10]和Xiao等[21]在熱應(yīng)激肉雞飼糧中添加相同劑量的CrPro，其對生長性能的影響結(jié)果與本試驗一致。飼糧中添加鉻對動物生長性能的影響與試驗條件、生長階段、鉻添加水平、基礎(chǔ)飼糧鉻含量及營養(yǎng)水平等有關(guān)。熱應(yīng)激條件下增加了體內(nèi)鉻從尿中的排出，因而提高了動物對鉻的需要量[22]。這說明在熱應(yīng)激條件下，需要較高劑量的鉻來改善肉雞的生長性能。本試驗結(jié)果表明，飼糧中共同添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞的生長性能沒有互作效應(yīng)，這可能是由于鉻的添加量較少，不足夠促進(jìn)熱應(yīng)激條件下肉雞的生長。

3.2 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞胴體性能的影響

CLA作為一種有效的營養(yǎng)重分配劑，能夠促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)的沉積，提高肉雞肌肉蛋白質(zhì)含量，還可降低肉雞脂肪沉積，從而提高瘦肉率[23]。Szymczyk等[24]在肉仔雞飼糧中添加0、0.5%、1.0%、1.5%的CLA不影響胴體產(chǎn)量、胸肌比例，但顯著增加腿肌比例。馬建爽等[25]在飼糧中添加0.3%、0.6%、0.9%的CLA，發(fā)現(xiàn)添加0.9%的CLA組肉雞胸肌率和腿肌率顯著高于其他各組，而各組肉雞的屠宰率和全凈膛率均無顯著差異。目前關(guān)于CLA在熱應(yīng)激肉雞上的研究較少，與常規(guī)飼糧飼喂肉雞的試驗結(jié)果類似，本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加1%的CLA提高了熱應(yīng)激肉雞腿肌率，并有提高屠宰率的趨勢。

熱應(yīng)激可導(dǎo)致肉雞礦物質(zhì)代謝、糖代謝紊亂以及糖原酵解、異生作用加強(qiáng)，葡萄糖利用的加強(qiáng)會導(dǎo)致組織鉻動員并排出體外，在熱應(yīng)激條件下，飼糧中添加鉻能夠改善胴體性能。Toghyani等[22]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.5、1.0和1.5 mg/kg的煙酸鉻(chromium polynicotinate，CrNic)和氯化鉻(chromium chloride，CrCl3)可以提高熱應(yīng)激肉雞的胴體率。王剛等[6]研究不同鉻源(三氯化鉻和吡啶羧酸鉻)和鉻水平對熱應(yīng)激狀態(tài)下4周齡愛拔益加肉雞胴體性能的影響，結(jié)果表明，飼糧中添加0.4、10.0、20.0 mg/kg鉻均能有效提高肉雞胸肌率，并且添加10.0 mg/kg鉻對腹脂率也有降低效果。與前人研究結(jié)果不同，本試驗研究表明飼糧中添加不同水平的鉻對熱應(yīng)激肉雞的胴體性能(屠宰率、胸肌率和腿肌率等)并無顯著影響。造成結(jié)果差異的原因可能是添加的鉻源以及劑量不同，以致無法達(dá)到預(yù)期的效果，具體作用機(jī)制尚不清楚。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中共同添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞的胴體性能沒有互作效應(yīng)。

3.3 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞胸肌及腿肌肉品質(zhì)的影響

CLA可以通過調(diào)控脂肪細(xì)胞分化、糖脂代謝和肌肉發(fā)育(肌纖維類型)來影響肌內(nèi)脂肪沉積、肌肉發(fā)育和肌纖維類型，進(jìn)而影響脂肪酸組成、肉色、系水力、風(fēng)味、嫩度和pH等肉的感官品質(zhì)和營養(yǎng)品質(zhì)[26]。本研究結(jié)果顯示，飼糧中添加CLA降低了胸肌L*和b*值以及腿肌b*值，這與前人研究結(jié)果一致。Du等[16]給5～8周齡肉雞添加2%和3%的CLA，其中2%的CLA顯著降低了胸肌b*值，但對胸肌L*、a*值、pH沒有顯著影響。張廣民等[27]研究發(fā)現(xiàn)，18周齡北京油雞飼糧中添加1%的CLA能顯著降低胸肌b*值，但胸肌L*和a*值、胸肌pH、腿肌pH、胸肌剪切力等沒有發(fā)生顯著變化。CLA影響肉品質(zhì)可能是通過2種途徑：一是作為強(qiáng)抗氧化劑，清除細(xì)胞內(nèi)的過氧化物自由基，保護(hù)細(xì)胞膜的完整性和穩(wěn)定性，減少雞肉表面的滲水，進(jìn)而降低肌肉表面的反光度[27]；二是通過增加肌肉內(nèi)飽和脂肪酸與不飽和脂肪酸的比例，減少脂質(zhì)氧化，從而降低肉的b*值[28]。

目前關(guān)于飼糧中添加鉻對肉雞肉品質(zhì)影響的研究報道比較少，大多研究集中在對豬方面的研究上。Sales等[29]通過已有的數(shù)據(jù)薈萃分析發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加鉻對豬的肉色、滴水損失、蒸煮損失、剪切力等均沒有顯著影響。關(guān)于鉻對肉雞肉品質(zhì)的影響，Untea等[30]發(fā)現(xiàn)在添加亞麻薺的肉雞飼糧中加入0.2或0.4 mg/kg的吡啶甲酸鉻可以顯著提高肌肉的抗氧化性，改善肉品質(zhì)。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加鉻顯著提高了肉雞胸肌pH24 h，暗示補(bǔ)鉻可降低胸肌肌肉氧化酵解，但對其他肉品質(zhì)沒有顯著影響。本試驗結(jié)果與前人研究結(jié)果不同，可能與鉻的添加水平和形式、作用時間、動物類型和性別、生長階段、營養(yǎng)狀況及環(huán)境因素有關(guān)。飼糧中同時添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞的肉品質(zhì)沒有互作效應(yīng)。

3.4 飼糧中添加CLA和鉻對熱應(yīng)激肉雞脂肪沉積及肝臟鉻含量的影響

與之前大量肉雞上的研究一致，本試驗結(jié)果表明飼糧中添加CLA降低了熱應(yīng)激肉雞腹脂沉積，但目前關(guān)于CLA對動物肌內(nèi)脂肪影響的研究結(jié)論不一。豬上的研究表明，飼糧中添加CLA增加了背最長肌肌內(nèi)脂肪的沉積[31-32]。肉雞上的研究則不盡相同，柴路等[33]研究表明，飼糧中添加CLA對1～3周齡熱應(yīng)激肉雞胸肌、腿肌肌內(nèi)脂肪含量均無顯著影響。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加CLA降低了熱應(yīng)激肉雞腿肌肌內(nèi)脂肪含量。

有研究表明，來自于不同鉻源的鉻均可以降低高溫應(yīng)激環(huán)境下肉雞腹脂的沉積[22]，與前人研究結(jié)果類似，本試驗結(jié)果顯示飼糧中添加鉻有降低熱應(yīng)激肉雞腹脂率的趨勢。飼糧中添加鉻對肉雞肌內(nèi)脂肪沉積影響的結(jié)果不統(tǒng)一。Samanta等[34]在常規(guī)飼養(yǎng)肉仔雞飼糧中添加0.5 mg/kg來自于CrCl3的鉻降低了肌肉中脂肪的含量。本試驗結(jié)果與Huang等[10]研究結(jié)果一致，飼糧中鉻添加對熱應(yīng)激肉雞胸肌肌內(nèi)脂肪含量沒有顯著影響。本試驗研究了飼糧同時添加CLA和鉻對肉雞脂肪沉積的影響，發(fā)現(xiàn)CLA和鉻互作有降低腹脂率的趨勢，其中1% CLA+0.2 mg/kg鉻組合降低腹脂率效果較明顯，具體作用機(jī)理尚待進(jìn)一步研究。

本試驗研究了飼糧鉻和CLA的互作效應(yīng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者共同添加增加了熱應(yīng)激肉雞肝臟鉻含量，從而達(dá)到加強(qiáng)鉻抑制肉雞腹脂沉積的效果，這在降低腹脂外在表現(xiàn)中得以驗證。Tian等[35]在生長肥育豬的飼糧中添加蛋氨酸鉻，研究其對生長肥育豬腹脂中脂肪酸組成的影響，結(jié)果表明隨著蛋氨酸鉻添加劑量的增加，腹脂中CLA含量線性上升，而對其他脂肪酸含量沒有顯著影響。鉻和CLA互作的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加CLA對熱應(yīng)激肉雞生長性能無顯著影響，但改善了肉雞的胴體性能并促進(jìn)了肝臟中鉻沉積。

② 飼糧中添加鉻對熱應(yīng)激肉雞生長性能、胴體性能均無顯著影響，但顯著提高了胸肌pH24 h，并有降低腹脂率的趨勢。

③ CLA和鉻的互作有降低腹脂率的趨勢，其中以1% CLA+0.2 mg/kg鉻組合效果較好。