安曉霞，張亞男，陳 秀，羅震宇，楊雪珍，王 強，向妙蓮，陳 明

10種殺菌劑對獼猴桃果實采后青霉病菌的室內(nèi)毒力測定

安曉霞，張亞男，陳 秀，羅震宇，楊雪珍，王 強，向妙蓮，陳 明*

（江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院/江西省果蔬采后處理關(guān)鍵技術(shù)與質(zhì)量安全協(xié)同創(chuàng)新中心/江西省果蔬保鮮與無損檢測重點實驗室，江西 南昌 330045）

【目的】擴(kuò)展青霉是獼猴桃的重要病害之一，嚴(yán)重影響品質(zhì)與產(chǎn)量。通過試驗，測定10種殺菌劑對獼猴桃果實采后青霉病菌（）的毒力?！痉椒ā坷门＝虮y定不同種殺菌劑對的毒力?！窘Y(jié)果】所供10種殺菌劑對均有一定的抑菌作用，250 g/L丙環(huán)唑、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、40%雙胍三辛烷基EC、95%苯醚甲環(huán)唑WP、50%咪鮮胺WP、95%多菌靈 SC、0.5%申嗪霉素EC、500 g/L噻菌靈WP和95%甲基硫菌靈WP的50分別為0.181 6、0.389 2、0.615 4、0.773 6、0.910 6 mg/kg、1.241 9、9.273 2、15.754 0、31.376 0和37.879 1 mg/kg，實驗結(jié)果表明250 g/L丙環(huán)唑抑菌效果最好，95%甲基硫菌靈WP毒力最弱。【結(jié)論】研究通過殺菌劑抑菌效果篩選可為獼猴桃果實采后青霉病的防治提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。

獼猴桃青霉病；采后貯藏；殺菌劑；室內(nèi)毒力測定

【研究意義】獼猴桃（Planch）隸屬獼猴桃科（Actinidiaceae）的野生落葉植物，原產(chǎn)于我國，果實皮薄多汁、營養(yǎng)豐富，風(fēng)味濃郁，是人們喜愛的水果之一[1-2]。獼猴桃為呼吸躍變型漿果，采后貯藏極易發(fā)生呼吸躍變，易被病原菌侵染而造成果品品質(zhì)下降，果實腐爛，縮短貨架期等問題[3-4]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】由擴(kuò)展青霉（）引起的獼猴桃青霉病是獼猴桃果實成熟期和釆后貯藏的重要病害之一[5-6]，不僅導(dǎo)致果實腐爛變質(zhì)，對我國獼猴桃產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，而且其分泌產(chǎn)生的展青霉素（Patulin, PAT）是一種神經(jīng)毒物，具有致畸性和致癌性，給食品安全帶來潛在威脅[6-7]。青霉病菌（）主要通過皮孔和果皮傷口侵染果實，破壞細(xì)胞膜的完整性，促進(jìn)乙烯的釋放[8-9]，加劇腐爛，果實貯運期間主要通過接觸進(jìn)行傳播。獼猴桃青霉病初期為水漬狀淡褐色圓形病斑，病部果皮變軟腐爛，擴(kuò)展迅速[10-11]?！颈狙芯壳腥朦c】目前主要通過化學(xué)藥劑控制獼猴桃采后青霉病，雖有一定的抑制效果，但長期使用藥劑易造成農(nóng)藥殘留，影響果品品質(zhì)，并會導(dǎo)致病菌抗藥性，甚至破壞生態(tài)安全，因此急需尋找高效低毒的理想替代藥劑來減緩這種危害[12]。【擬解決的關(guān)鍵問題】本實驗采用牛津杯法[13-14]，測定10種不同藥劑對擴(kuò)展青霉（）的毒力，從而篩選出有效藥劑，為制定獼猴桃果實采后青霉病的防治提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試病原菌 獼猴桃青霉病菌（）由江西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物病理實驗室提供。分離自貯藏期‘紅陽’獼猴桃病果，分離純化后-80 ℃保存，試驗前活化備用。

1.1.2 培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（Potato Dextrose Agar, PDA）：葡萄糖20.0 g，瓊脂18.0 g，馬鈴薯20 g，蒸餾水1 000 mL。

1.1.3 供試藥劑 供試藥劑共10種（表1），由江西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物保護(hù)系農(nóng)藥實驗室提供。

表1 10種供試藥劑

1.2 10種殺菌劑對獼猴桃果實青霉病菌的室內(nèi)毒力測定

采用牛津杯法[13-14]，測定10種殺菌劑對獼猴桃青霉病菌的毒力。藥劑系列濃度的配置在無菌操作條件下進(jìn)行，每種藥劑配置成7個濃度梯度的母液。青霉病菌（）培養(yǎng)7 d左右用0.9%生理鹽水洗脫孢子，配置成濃度為106spores/mL的青霉孢子液；待三角瓶中PDA培養(yǎng)基（54 mL）冷卻至45 ℃左右后，每瓶培養(yǎng)基中加入6 mL孢子懸浮液，搖勻，制成含擴(kuò)展青霉孢子平板；含菌平板凝固后，將直徑為8.0 mm的牛津杯置其中心位置，每個牛津杯中加入配制好的7個濃度梯度的藥液25 μL，以加入等體積的無菌水為對照，每處理重復(fù)3次。置25~28 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，逐日觀察，采用十字交叉法量取抑菌圈直徑，按以下公式：抑菌率/%=（抑菌圈平均直徑/培養(yǎng)皿直徑）×100計算各處理的抑菌圈直徑平均值及抑菌率。

以藥劑質(zhì)量濃度（mg/kg）對數(shù)值為橫坐標(biāo)（），采用DPS統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，以抑菌率機率值為縱坐標(biāo)（），繪制回歸直線，求出毒力回歸方程和相關(guān)系數(shù)（），計算出50。

2 結(jié)果與分析

10種殺菌劑的測定結(jié)果如表2所示。50值越小，表明藥劑對病菌的毒力指數(shù)越高[13]。由表2可知，250 g/L丙環(huán)唑EC、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、40%雙胍三辛烷基EC、95%苯醚甲環(huán)唑WP、50%咪鮮胺WP對獼猴桃青霉病菌的50值較小，分別為0.181 6、0.389 2、0.615 4、0.773 6、0.910 6和1.241 9 mg/kg，而250 g/L丙環(huán)唑EC對獼猴桃青霉病菌的毒力最強，其50值為0.181 6 mg/kg；95%多菌靈SC、0.5%申嗪霉素EC對獼猴桃青霉病菌的毒力相對弱，其50值分別為9.273 2 mg/kg、15.754 0 mg/kg；500 g/L噻菌靈WP、95%甲基硫菌靈WP毒性較低，50分別為31.376 0、37.879 1 mg/kg。

表2 10種殺菌劑對P. expansum的室內(nèi)毒力測定結(jié)果

3 結(jié)論與討論

本試驗測定了10種殺菌劑對的毒力，結(jié)果表明，供試的10種殺菌劑對均有一定的抑菌活性。250 g/L丙環(huán)唑EC、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP和40%雙胍三辛烷基EC對獼猴桃青霉病菌都具有較高的毒力，50均小于1.0 mg/kg，其中250 g/L丙環(huán)唑EC的50值最低，為0.181 6 mg/kg，可以考慮與95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、40%雙胍三辛烷基EC、95%苯醚甲環(huán)唑WP、50%咪鮮胺交替使用，提高田間防治效果。本試驗中，95%甲基硫菌靈WP、500 g/L噻菌靈WP和0.5%申嗪霉素EC對抑菌活性較低，其50分別為37.879 1，31.376 0，15.754 0 mg/kg，說明可能已經(jīng)對上述殺菌劑產(chǎn)生了抗藥性。甲基硫菌靈等殺菌劑廣泛應(yīng)用于果蔬采后病害防治當(dāng)中，但因其作用位點單一，長期使用同一種殺菌劑，抗藥性問題越來越嚴(yán)重。因此，亟需深入研究對甲基硫菌靈等殺菌劑的抗性水平。

獼猴桃果實采后青霉病的防控可通過低溫冷藏[15]和粘紅酵母處理[16]等多種方式，目前主要通過化學(xué)殺菌劑控制該病害。因單一化學(xué)殺菌劑重復(fù)使用的局限性，研究者建議篩選多種殺菌劑交替或者復(fù)配使用以維持良好的防治功效。此外，本試驗10種殺菌劑對室內(nèi)毒力測定結(jié)果，僅限于在離體條件下上述殺菌劑對獼猴桃青霉病菌的直接活性，尚不能反映殺菌劑的滲透能力，所以不同殺菌劑對獼猴桃果實采后青霉病防控的貯藏試驗需待后續(xù)進(jìn)一步驗證。

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Indoor Toxicity Test of Ten Kinds of Fungicides Againstin Kiwifruit

AN Xiaoxia, ZHANG Ya’nan, CHEN Xiu, LUO Zhenyu, YANG Xuezhen, WANG Qiang, XIANG Miaolian, CHEN Ming*

(Collaborative Innovation Center of Postharvest Key Technology and Quality Safety of Fruits and Vegetables in Jiangxi Province, Jiangxi Key Laboratory for Postharvest Technology and Non-destructive Testing of Fruits & Vegetables, College of Agronomy, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China)

[]is one of the important diseases of kiwifruit, which seriously affects the quality and yield of kiwifruit. Indoor toxicity test of 10 fungicides againstin kiwifruit was determined. []The Indoor toxicity test of different fungicides againstwas carried out with oxford cup method. [] The results showed that all the 10 fungicides had certain inhibition effect onand 250 g/L. The50of 250 g/L Propiconazole, 95% Trifloxystrobin, 96% Tebuconazole, 40% Iminoctadine tris, 95% Difenoconazole, 95% Prochloraz, 95% Carbendazim, 0.5% Phenazine-1-carboxylic acid, 500 g/L Probenazole and 95% Thiophanate-methyl were 0.181 6, 0.389 2, 0.615 4, 0.773 6, 0.910 6, 1.241 9, 9.273 2, 15.754 0, 31.376 0 and 37.879 1 mg/kg respectively. Propiconazole had the best inhibition effect while 95% Thiophanate- methyl was the weakest one. [] In this study, the screening of antibacterial effects of fungicides could provide a theoretical basis and technical reference for the prevention and control of blue mold in postharvest kiwifruit.

kiwifruit blue mold; postharvest storage; fungicides? indoor toxicity test

S763.11；S663.4

A

2095-3704（2021）01-001-04

2021-01-05

2021-02-10

江西省果蔬采后處理關(guān)鍵技術(shù)及質(zhì)量安全協(xié)同創(chuàng)新中心項目（JXGS-03）和江西省自然科學(xué)基金項目（20192 BAB204018）

安曉霞（1993—），女，碩士生，主要從事果實采后生理研究，1275015991@qq.com；*通信作者：陳明，博士，副教授，mingchen@jxau.edu.cn。

安曉霞, 張亞男, 陳秀, 等. 10種殺菌劑對獼猴桃果實采后青霉病菌的室內(nèi)毒力測定[J]. 生物災(zāi)害科學(xué), 2021, 44(1):1-4.