劉珍欣

(商丘市第四人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 商丘 476100)

早期準(zhǔn)確診斷乙肝病毒感染并給予規(guī)范治療對(duì)改善患者生存質(zhì)量具有重要意義[1]。目前，乙肝病毒感染性標(biāo)志物是臨床發(fā)現(xiàn)疾病的重要指標(biāo)，其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)是臨床常用的檢測(cè)標(biāo)志物方法之一，但其無法動(dòng)態(tài)反映病情發(fā)展，難以判斷血清標(biāo)志物感染復(fù)制情況，因此在臨床應(yīng)用中有一定的局限性[2]。化學(xué)發(fā)光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay，CLIA)是一種新型的標(biāo)志物檢測(cè)方法，此檢測(cè)方法將免疫反應(yīng)和化學(xué)發(fā)光反應(yīng)相結(jié)合，具有較高的特異度及敏感度，近年來逐漸應(yīng)用于乙肝病毒感染性標(biāo)志物檢測(cè)中，且此方法可對(duì)標(biāo)志物進(jìn)行定量分析，能有效提高診斷準(zhǔn)確率[3]。本研究分別采用CLIA法與ELISA法對(duì) 80例疑似乙型肝炎患者進(jìn)行乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)，探討兩種檢測(cè)方法的臨床使用價(jià)值，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2017年1月至2019年6月商丘市第四人民醫(yī)院收治的80例疑似乙型肝炎患者作為研究對(duì)象，其中男58例，女22例；年齡25～64歲，中位年齡31.50(28.00，51.75)歲；體質(zhì)量46～70 kg，平均(57.32±5.32)kg。本研究經(jīng)商丘市第四人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①簽署知情同意書；②無其他血液系統(tǒng)疾??；③無免疫系統(tǒng)疾病。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①研究參與積極性不高；②合并其他惡性腫瘤疾??；③妊娠、哺乳期女性。

1.3 檢測(cè)方法采集80例患者清晨空腹肘靜脈血5 mL，以3 500 r·min-1離心10 min后取上清液，并將血清均等分成2份，血清乙型肝炎e抗體(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗體(HBsAb)標(biāo)志物分別通過全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀(美國貝克曼庫爾特公司，型號(hào)：uniceldxi800 )和酶標(biāo)儀(美國伯樂公司，型號(hào)：Bio-Rad MODEL550)檢測(cè)。操作過程嚴(yán)格遵守儀器及試劑盒使用說明。乙肝血清標(biāo)志物的定值質(zhì)控品來自國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)ELISA法：以標(biāo)本OD與臨界OD值比值(S/CO)作為陽性和陰性的判定標(biāo)準(zhǔn)，S/CO≥1.00為陽性，HBsAg、HBeAb中S/CO≤1.00為陽性。CLIA法：使用定量法評(píng)估HBsAg與HBsAb，使用標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度(relative light units，RLU)與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，計(jì)算血清濃度，若HBsAb>10 IU·mL-1為陽性，HBsAg>0.05 IU·mL-1為陽性；HBeAg、HBeAb、HBcAb則以RLU與臨界值RLU比值(S/CO)作為陽性與陰性判定標(biāo)準(zhǔn)；其中S/CO≤1.00表示HBeAb為陽性，S/CO≥1.00表示HBeAg、HBcAb為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乙肝病毒感染性標(biāo)志物檢測(cè)CLIA法的HBeAb、HBeAg和 HBsAg陽性檢出率均高于ELISA法的陽性檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CLIA法的HBcAb、HBsAb陽性檢出率與ELISA法的陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩種方法檢測(cè)乙肝病毒感染性標(biāo)志物結(jié)果比較[n(%)]

2.2 低水平HBsAg檢測(cè)經(jīng)CLIA法檢測(cè)HBsAg呈低水平陽性標(biāo)本有50例，經(jīng)ELISA法檢測(cè)HBsAg呈低水平陽性標(biāo)本有36例；當(dāng)HBsAg≥1.0時(shí)，兩種檢測(cè)結(jié)果相同；當(dāng)HBsAg<1.0時(shí)，CLIA法陽性檢出率高于ELISA法。見表2。

表2 兩種方法檢測(cè)低水平HBsAg結(jié)果比較(n，%)

3 討論

我國為乙型肝炎高發(fā)國家，近年來，受人們不良生活習(xí)慣的影響，該病發(fā)病率不斷上升?；颊呷舨荒芗皶r(shí)接受規(guī)范治療，可進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌，嚴(yán)重危害患者的生命[4]。因此，早期準(zhǔn)確的診斷疾病并實(shí)施規(guī)范治療對(duì)改善患者預(yù)后十分重要。

目前，臨床檢測(cè)乙肝病毒感染性標(biāo)志物的方法較多，包括實(shí)時(shí)熒光PCR檢驗(yàn)病毒DNA、ELISA法等，其中ELISA法具有價(jià)格優(yōu)廉、操作便捷、快速等優(yōu)點(diǎn)，是臨床常用方式，在乙肝疾病的診治中具有一定作用[5]。但臨床中發(fā)現(xiàn)，ELISA法雖然在定性分析方面具有較高的檢測(cè)效能，但該方法無法進(jìn)行定量檢測(cè)，且當(dāng)標(biāo)本檢測(cè)物質(zhì)濃度過高時(shí)可出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)，易出現(xiàn)假陰性，從而降低檢測(cè)準(zhǔn)確性，因此需要尋求特異度較強(qiáng)、敏感較高的檢測(cè)方式。

CLIA法是近年來新興起的一種檢測(cè)乙肝病毒感染性標(biāo)志物的方法，其主要利用發(fā)光底物自身的發(fā)光強(qiáng)度這一特點(diǎn)對(duì)標(biāo)志物進(jìn)行直接檢測(cè)，檢測(cè)靈敏度較高。臨床研究指出，血清標(biāo)志物的定量檢測(cè)可直觀的反映病情動(dòng)態(tài)變化，且CLIA法在定量檢測(cè)方面效果良好。因此，CLIA法可以有效彌補(bǔ)ELISA法定量檢測(cè)的不足，提高疾病診斷準(zhǔn)確度，在臨床中被廣泛應(yīng)用[6]。本研究結(jié)果顯示， CLIA法的HBeAb、HBsAg、HBeAg陽性檢出率均高于ELISA法的HBeAb、HBsAg、HBeAg陽性檢出率； CLIA法的HBcAb、HBsAb陽性檢出率與ELISA法的HBcAb、HBsAb陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；當(dāng)HBsAg≥1.0時(shí)，兩種檢測(cè)結(jié)果相同；當(dāng)HBsAg<1.0時(shí)，CLIA法陽性檢出率高于ELISA法。由此可見，相較于ELISA法，CLIA法檢測(cè)乙肝病毒感染性標(biāo)志物準(zhǔn)確度更高，可為早期確診乙肝病毒感染及病情監(jiān)測(cè)提供重要依據(jù)。分析原因在于，ELISA法主要采用酶顯色法檢測(cè)血清標(biāo)志物，易受到洗板、孵育時(shí)間、手工加樣等外界因素影響，導(dǎo)致受檢標(biāo)志物顏色深淺度發(fā)生改變，從而降低診斷準(zhǔn)確度[7-10]。而CLIA法使用試劑盒通過全自動(dòng)檢測(cè)儀器對(duì)血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，可有效降低外界因素的干擾，提高診斷穩(wěn)定性[11]。此外，還可循環(huán)利用標(biāo)志物，延長(zhǎng)發(fā)光時(shí)間，更加準(zhǔn)確得顯示乙肝病毒感染進(jìn)程，提高臨床診斷準(zhǔn)確性[12]。但因本研究納入樣本量較少，且未將CLIA法與其他診斷方法相比較，因而研究結(jié)果存在一定局限性。

綜上所述，相較于ELISA法，CLIA法檢測(cè)乙肝病毒感染性標(biāo)志物準(zhǔn)確度更高，可為早期診斷乙肝及病情監(jiān)測(cè)提供重要依據(jù)，值得臨床推廣應(yīng)用。