陳其臻，傅夏燕，焦雨帆，尹 喆，紀(jì)亞忠，王炎秋

卵巢癌是3大婦科惡性腫瘤之一，每年全球新發(fā)卵巢癌病例約23萬(wàn)例，約15萬(wàn)例女性患者死于卵巢癌，病死率位居?jì)D科惡性腫瘤首位。由于早期卵巢癌患者無(wú)特異性臨床表現(xiàn)，缺乏有效的早期檢測(cè)手段，約75%的患者確診時(shí)已是晚期[國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO）分期為Ⅲ期或Ⅳ期]，此外，卵巢癌患者易產(chǎn)生化療耐藥，術(shù)后容易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，因此晚期卵巢癌患者的5年生存率僅為29%[1-2]。這已嚴(yán)重影響全球女性的身心健康及生活質(zhì)量，給社會(huì)和家庭帶來(lái)了沉重負(fù)擔(dān)。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，外泌體（exosomes）非編碼RNA有望成為卵巢癌早期診斷及治療的新靶點(diǎn)。

外泌體是一類(lèi)直徑為40～160 nm的細(xì)胞外囊泡，為連續(xù)的細(xì)胞膜內(nèi)陷形成的多囊體，其含有細(xì)胞特異的DNA、RNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì)，并廣泛分布于血液、唾液、卵泡液和子宮腔液等各種體液中[3]。大量的研究表明，外泌體在腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移、副腫瘤綜合征的發(fā)生及腫瘤的化療耐藥等過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[4]。目前，人類(lèi)基因組中僅有2%的基因被翻譯為蛋白質(zhì)，其余均為非蛋白質(zhì)編碼部分，這些非蛋白質(zhì)編碼基因被復(fù)制到數(shù)千個(gè)RNA分子中，即非編碼RNA。非編碼RNA根據(jù)長(zhǎng)度可分為長(zhǎng)鏈非編碼RNA（長(zhǎng)度＞200個(gè)核苷酸）和短鏈非編碼RNA（長(zhǎng)度為18～200個(gè)核苷酸）。ENCODE項(xiàng)目組研究發(fā)現(xiàn)[5]，非編碼RNA不僅會(huì)參與調(diào)節(jié)機(jī)體的生長(zhǎng)和發(fā)育等生理過(guò)程，還會(huì)參與卵巢癌等腫瘤的發(fā)生及進(jìn)展。本文將就外泌體非編碼RNA在卵巢癌中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為卵巢癌的診斷和治療提供一些新的思路。

1 外泌體及其生物學(xué)功能

外泌體產(chǎn)生過(guò)程包括細(xì)胞膜的雙重內(nèi)陷和細(xì)胞內(nèi)多囊小體（multivesicular bodies，MVBs）的形成，細(xì)胞內(nèi)多囊小體包含多種腔內(nèi)囊泡（intraluminal vesicles，ILVs），最終，直徑為40～160 nm的腔內(nèi)囊泡通過(guò)細(xì)胞內(nèi)多囊小體質(zhì)膜融合或胞吐作用以外泌體的形式分泌[6]。外泌體可不斷被細(xì)胞產(chǎn)生并不斷被細(xì)胞重吸收，其可能是新生成的外泌體，也可能為內(nèi)源性外泌體重吸收后的混合物[7]。有研究表明，RAS相關(guān)結(jié)構(gòu)域家族（RAS association domain family proteins，RASSF）蛋白、Bcl-2基因家族相關(guān)蛋白（Bcl-2 gene family proteins，Bcl-2）和神經(jīng)酰胺等物質(zhì)均參與到了外泌體的生物發(fā)生過(guò)程中，但其在該過(guò)程中的精確限速作用和功能仍需進(jìn)一步研究[8-9]。

外泌體主要通過(guò)與靶細(xì)胞特異性受體結(jié)合、細(xì)胞膜融合或胞飲、內(nèi)吞等內(nèi)化機(jī)制實(shí)現(xiàn)細(xì)胞間的物質(zhì)轉(zhuǎn)換與信息交流，如人黑素瘤細(xì)胞能通過(guò)細(xì)胞和細(xì)胞之間細(xì)胞膜的融合攝取外泌體[10]。然而目前尚不明確靶細(xì)胞攝取外泌體的方式是否會(huì)影響外泌體的定位、降解及功能等特性。已有大量研究表明，外泌體在免疫反應(yīng)性疾病、病毒相關(guān)疾病、妊娠、心血管疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病和惡性腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展中均發(fā)揮關(guān)鍵作用。

由于外泌體的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)可防止其內(nèi)容物被降解或修飾，因此外泌體能夠在人體體液中穩(wěn)定存在并被檢測(cè)到，其含量的變化可反映外泌體的起源細(xì)胞和機(jī)體病理生理的改變，這提示外泌體具有作為生物標(biāo)志物的巨大潛力[11]。由于外泌體的納米性質(zhì)，使其可作為化療藥物以及免疫調(diào)節(jié)劑等藥物的載體以進(jìn)行靶向性治療，而且其生物利用度更高，藥物不良反應(yīng)較少[3]，能在神經(jīng)退行性疾病、免疫反應(yīng)性疾病和惡性腫瘤等疾病治療中發(fā)揮作用如。

2 非編碼RNA在卵巢癌中的研究進(jìn)展

根據(jù)長(zhǎng)度不同，非編碼RNA可分為長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNA）（長(zhǎng)度＞200個(gè)核苷酸）和短鏈非編碼RNA（長(zhǎng)度為18～200個(gè)核苷酸），其中短鏈非編碼RNA包括微小RNA（microRNA，miRNA）、環(huán)狀RNA（circular RNA，CircRNA）和PIWI蛋白相互作用RNA（PIWI-interacting RNA，piRNA）等。根據(jù)功能性的不同，非編碼RNA可分為管家RNA和調(diào)節(jié)性非編碼RNA，調(diào)節(jié)性非編碼RNA包括miRNA、CircRNA和LncRNA等[12]。近年來(lái)，有越來(lái)越多的研究顯示，調(diào)節(jié)性非編碼RNA在卵巢癌發(fā)生及進(jìn)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。此外，不同類(lèi)型的非編碼RNA在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中存在相互作用，如CircRNA和LncRNA可作為miRNA的分子海綿，形成龐大且復(fù)雜的競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源性RNA網(wǎng)絡(luò)，通過(guò)調(diào)控靶基因的表達(dá)從而促進(jìn)或抑制腫瘤的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移。

2.1 LncRNA和miRNA

LncRNA和miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用，LncRNA通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合一個(gè)或多個(gè)具有相同miRNA反應(yīng)元件的miRNA，影響miRNA的表達(dá)水平，從而間接調(diào)控靶基因的表達(dá)，促進(jìn)或抑制腫瘤的發(fā)生或進(jìn)展（圖1）。

Fig.1 A brief overview of the most-studied and well-documented molecular functions of selected long noncoding RNA (LncRNA) and microRNA (miRNA).Metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1 (MALAT1) is overexpressed in ovarian cancer (OC) and acts as a sponge for miR-503-5p,promoting cell proliferation through the janus kinase (JAK)/signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) pathway.And MALAT1 can also be the main mediator of tumor invasion and migration,and epithelial-mesenchymal transition (EMT) through phosphoinositide 3–kinase (PI3K)/protein kinase B (PBK,AKT) signaling pathway in OC patients.Maternally expressed gene 3 (MEG3) is elevated in OC,which in turn increases the expression of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten (PTEN)，thereby inhibiting tumor growth by inhibiting the proliferation of tumor cells.Feline leukemia virus subgroup C receptor antisense RNA 1(FLVCR-AS1) has been reported to enhance the expression of yes-associated protein 1 (YAP1) by reducing miR-513,thereby enhancing cell migration and invasion.ANRIL directly inhibits the apoptosis of OC cells by reducing the level of p15INK4B and inducing the expression of Bcl-2.ABHD11-AS1 is significantly increased in OC and facilitates matrix metalloproteinase 2 (MMP2)-mediated and vascular endothelial growth factor(VEGF)-mediated angiogenesis by targeting RAS homolog gene family member C (RHOC).HOXA terminal transcriptional RNA (HOTTIP) could promote the secretion of IL-6,thereby up-regulating the expression of programmed cell death 1 ligand 1 (PD-L1) in neutrophils,thus inhibiting the activity of T cells and ultimately accelerating the immune escape of OC cells.↑:Up-regulated;↓:Down-regulated.圖1 LncRNA和miRNA在卵巢癌中的發(fā)病機(jī)制

到目前為止，科研人員已進(jìn)行了大量LncRNA在卵巢癌發(fā)病及進(jìn)展中的機(jī)制研究。LncRNA-人肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1（metastasisassociated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1）作為卵巢癌的一種癌基因，可通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和凋亡促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。SUN等[13]研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA-MALAT1通過(guò)與miR-503-5p相互作用，負(fù)向調(diào)節(jié)miR-503-5p的表達(dá)，介導(dǎo)Janus激酶2（janus kinase 2，JAK2）/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）信號(hào)通路的激活，從而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的增殖，并抑制癌細(xì)胞凋亡。此外，JIN等[14]研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA MALAT1可通過(guò)磷脂酰肌醇-3激酶（phosphoinositide-3 kinase，PI3K）-蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，又稱(chēng)AKT）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，強(qiáng)化卵巢癌細(xì)胞的侵襲、遷移及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）功能，從而促進(jìn)了腫瘤生長(zhǎng)。WANG等[15]研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA-母系表達(dá)基因3（maternally expressed gene 3，MEG3）和第10號(hào)染色體同源丟失性磷酸酶基因和張力蛋白（phosphate and tension homology deleted on chromsome ten，PTEN）在卵巢癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，這提示LncRNA-MEG3可能通過(guò)正向調(diào)節(jié)PTEN的表達(dá)，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，阻斷細(xì)胞周期進(jìn)程，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，最終起到抑制腫瘤生長(zhǎng)作用。YAN等[16]研究發(fā)現(xiàn)，貓白血病病毒C亞類(lèi)受體反義RNA1（feline leukemia virus subgroup C receptor antisense RNA1，LncRNA FLVCR1-AS1），其作為一種長(zhǎng)鏈非編碼RNA，可通過(guò)調(diào)控miR-513/Yes相關(guān)蛋白1（Yes-associated protein1，YAP1）信號(hào)通路促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的遷移、侵襲和EMT過(guò)程。LncRNA ABHD11-AS1，位于人類(lèi)第7號(hào)染色體q11.23區(qū)域，其通過(guò)正向調(diào)控RAS同源基因家族成員C（RAS homolog gene family member C，RhoC）的表達(dá)，并進(jìn)一步調(diào)控RhoC下游分子基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的表達(dá)，MMP-2可分裂層黏連蛋白-5（laminin 5，LN-5），增加內(nèi)皮細(xì)胞的遷移及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的釋放，這刺激了癌組織周?chē)律艿纳?，最終促進(jìn)了腫瘤生長(zhǎng)。HOXA遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)錄本（HOXA transcript at the distal tip，HOTTIP）是同源盒基因（homeobox gene，HOX）的LncRNA，其在多種腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。已有研究發(fā)現(xiàn)，HOTTIP的高表達(dá)可增加卵巢癌細(xì)胞中白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的表達(dá)和分泌，IL-6通過(guò)與癌細(xì)胞周?chē)行粤＜?xì)胞表面的IL-6受體結(jié)合，激活STAT3通路，從而增加中性粒細(xì)胞表面程序性死亡分子配體1（programmed death ligand-1，PD-L1）的表達(dá)，進(jìn)一步抑制T細(xì)胞的活性，加速卵巢癌細(xì)胞的免疫逃逸，最終促進(jìn)了卵巢癌的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移[17]。

2.2 CircRNA和miRNA

CircRNA是一類(lèi)圓形閉合結(jié)構(gòu)的非編碼RNA，是具有高度穩(wěn)定性、保守性及多樣性的RNA分子。CircRNA具有miRNA分子海綿作用、蛋白質(zhì)海綿作用和調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄與翻譯等生物學(xué)功能。同時(shí)CircRNA的表達(dá)情況具有組織特異性及階段特異性，能夠反映機(jī)體不同的生理或病理狀態(tài)[18]。越來(lái)越多的研究表明，CircRNA在卵巢癌疾病進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。NING等[19]對(duì)4例卵巢癌組織及正常卵巢組織進(jìn)行了CircRNA表達(dá)譜檢測(cè)，通過(guò)與正常卵巢組織進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)了4 388個(gè)不同程度表達(dá)的CircRNA，其中有2 556個(gè)CircRNA表達(dá)上調(diào)，1 832個(gè)CircRNA表達(dá)下調(diào)，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法對(duì)CircRNA測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果證實(shí)了其中6個(gè)CircRNA（CircBNC2、CircEXOC6B、CircFAM13B、CircN4BP2L2、CircRHOBTB3和CircCELSR1）的表達(dá)水平存在差異。ZHAO等[20]研究發(fā)現(xiàn)，小腦變性相關(guān)蛋白1反義RNA（cerebellar degeneration-related 1 antisense，CircRNA CDR1as），主要存在于人類(lèi)和小鼠的大腦中，通過(guò)調(diào)節(jié)miR-1270/腫瘤細(xì)胞侵襲抑制因子（suppressor of cancer cell invasion，SCAI）信號(hào)通路可使卵巢癌對(duì)順鉑增敏，并發(fā)現(xiàn)CDR1as在順鉑耐藥患者的血清外泌體中表達(dá)下調(diào)。CHEN等[21]研究發(fā)現(xiàn)，hsa_circ_0061140通過(guò)發(fā)揮miR-370分子海綿的作用，可上調(diào)叉頭框蛋白M1（forkhead box protein M1，F(xiàn)OXM1）的表達(dá)以促進(jìn)卵巢癌的發(fā)生與發(fā)展。ZHANG等[22]研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌組織中hsa_circ_0051240表達(dá)明顯上調(diào)，hsa_circ_0051240通過(guò)抑制miR-637/人組織激肽釋放酶（kallikreins4，KLK4）軸促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，因此hsa_circ_0051240/miR-637/KLK4軸可作為卵巢惡性腫瘤治療的有效靶點(diǎn)。ZOU等[23]通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)78例卵巢癌組織及正常卵巢組織行Circ LARP4表達(dá)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織中Circ LARP4表達(dá)下調(diào)，此外ZOU等[23]還發(fā)現(xiàn)Circ LARP4的表達(dá)情況與FIGO分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性，并通過(guò)COX風(fēng)險(xiǎn)比例回歸模型驗(yàn)證了Circ LARP4表達(dá)下調(diào)為卵巢癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

3 外泌體非編碼RNA在卵巢癌中的作用機(jī)制

隨著外泌體和非編碼RNA在腫瘤中的作用不斷被發(fā)掘，科研人員也注意到外泌體及其攜帶的非編碼RNA在卵巢癌發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中的作用。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，癌細(xì)胞來(lái)源的外泌體不僅數(shù)量多于正常細(xì)胞，內(nèi)容物也不盡相同[24]?，F(xiàn)已有大量研究證實(shí)，外泌體通過(guò)參與腫瘤細(xì)胞增殖、EMT、調(diào)節(jié)免疫狀態(tài)、腫瘤周?chē)苌珊娃D(zhuǎn)移前腫瘤微環(huán)境形成等過(guò)程促進(jìn)卵巢癌的發(fā)生與進(jìn)展。

Fig.2 Schematic diagram of the role of ovarian cancer (OC)-secreted microRNA (miR)-205 in tumour angiogenesis.Cancer-derived miR-205 can be transported to endothelial cells via exosomes,while exosomal miR-205 promotes angiogenesis in vitro and in vivo by regulating the phosphate and tension homology deleted on chromsome ten (PTEN)/protein kinase B (PBK,also known as AKT) pathway.圖2 卵巢癌分泌的外泌體miR-205在腫瘤血管生成中的作用示意圖

目前的相關(guān)報(bào)道主要集中在miRNA和CircRNA。HE等[25]通過(guò)共培養(yǎng)和外泌體標(biāo)記實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了miR-205以外泌體形式由卵巢癌細(xì)胞分泌至細(xì)胞外液中，并高效轉(zhuǎn)移到鄰近的內(nèi)皮細(xì)胞中，此外脂筏蛋白相關(guān)通路在調(diào)節(jié)靶細(xì)胞對(duì)外泌體miR-205的攝取過(guò)程中起到重要作用。HE等[25]發(fā)現(xiàn)miR-205在卵巢癌患者血清中顯著富集，并且循環(huán)系統(tǒng)中富集的外泌體miR-205通過(guò)調(diào)控PTEN/AKT途徑誘導(dǎo)血管生成及腫瘤生長(zhǎng)（圖2）。ZONG等[26]將卵巢癌細(xì)胞注入裸鼠腹腔，并分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組每隔2 d注射外泌體Circ WHSC1，對(duì)照組注射相同劑量的磷酸緩沖鹽溶液，結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組裸鼠腹腔的周長(zhǎng)較對(duì)照組增長(zhǎng)迅速，腹腔轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)灶數(shù)目較對(duì)照組顯著增多，腹腔間皮細(xì)胞原有的緊密結(jié)構(gòu)消失。ZONG等[26]通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)到，相較于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組腹膜間皮細(xì)胞黏蛋白1（mucin1，MUC1）的表達(dá)水平顯著升高，由此認(rèn)為外泌體Circ WHSC1可被腹膜間皮細(xì)胞吸收，并誘導(dǎo)其發(fā)生EMT，同時(shí)MUC1高表達(dá)，可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞與腹膜的黏附及轉(zhuǎn)移。

4 外泌體非編碼RNA在卵巢癌診療中的應(yīng)用前景

4.1 外泌體非編碼RNA在卵巢癌早期診斷及判定預(yù)后的應(yīng)用

早期卵巢癌無(wú)特異性癥狀且缺乏有效的檢查手段，這使得大多數(shù)患者在初次就診時(shí)就已為卵巢癌晚期（Ⅲ/Ⅳ期），卵巢癌晚期患者的5年生存率僅為29%，而早期卵巢癌患者（Ⅰ/Ⅱ期）5年生存率可高達(dá)92%。目前，針對(duì)晚期卵巢癌的常用治療手段為瘤體減滅術(shù)合并以鉑類(lèi)藥物為基礎(chǔ)的化療治療，大部分患者在應(yīng)用一線化療藥之后產(chǎn)生耐藥，并且復(fù)發(fā)率高。因此，尋找一個(gè)高效靈敏且方便快捷的早期檢測(cè)手段對(duì)卵巢癌的有效治療具有重大意義。

近期的研究表明，外泌體的磷脂雙分子層可保護(hù)其內(nèi)容物非編碼RNA不被核酸酶降解，使其具有較高的穩(wěn)定性，同時(shí)相較于循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cells，CTCs）檢測(cè)，其在體液中含量更為豐富，這些優(yōu)點(diǎn)均為利用外泌體對(duì)卵巢癌的早期診斷創(chuàng)造了條件[27]。MENG等[28]研究發(fā)現(xiàn)，上皮性卵巢癌患者的血清中外泌體miR-373、miR-200a、miR-200b和miR-200c的濃度明顯高于健康婦女，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的晚期（Ⅲ～Ⅳ期）患者中，外泌體miR-200b和miR-200c的表達(dá)水平也均高于早期患者（Ⅰ～Ⅱ期），由此提示外泌體非編碼RNA可作為卵巢癌早期診斷的指標(biāo)。VAKSMAN等[29]通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR法對(duì)86例上皮性卵巢癌患者胸腔積液中的外泌體miRNA進(jìn)行檢測(cè)，研究結(jié)果顯示，胸腔積液中外泌體miRNA-21、miRNA-23b和miRNA-29a的表達(dá)水平與患者的無(wú)進(jìn)展生存期呈負(fù)相關(guān)（P＝0.01，P＝0.015和P＝0.009），而外泌體miRNA-21的表達(dá)水平與患者預(yù)后總生存期呈負(fù)相關(guān)（P＝0.017）；此外，通過(guò)COX風(fēng)險(xiǎn)比例回歸模型驗(yàn)證了外泌體miRNA-21高表達(dá)為卵巢癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＝0.017）。雖然，目前關(guān)于外泌體非編碼RNA在卵巢癌中的研究仍相對(duì)較少，但非編碼RNA具有穩(wěn)定性高、豐度大和組織特異性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，這使得外泌體非編碼RNA非常適合作為卵巢癌早期診斷及預(yù)后評(píng)估的生物標(biāo)志物。

4.2 外泌體及其攜帶的非編碼RNA在卵巢癌治療中的應(yīng)用

鑒于外泌體非編碼RNA以多種途徑參與了惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程，可以此為切入點(diǎn)將外泌體非編碼RNA應(yīng)用于腫瘤的治療中。目前已證實(shí)的途徑包括：（1）減少外泌體的產(chǎn)生和釋放；（2）清除外周血中存在的外泌體；（3）利用外泌體增強(qiáng)機(jī)體免疫能力；（4）作為藥物載體靶向傳送藥物。

AU YEUNG等[30]研究發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-21可以從基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至卵巢癌細(xì)胞中，并通過(guò)靶向凋亡蛋白酶激活因子-1（apoptotic protease activating factor-1，APAF1）誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇的化療耐藥，由此提示抑制外泌體miR-21的產(chǎn)生及釋放可改善卵巢癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇治療的敏感性，但該方法仍需進(jìn)一步在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)予以驗(yàn)證。ALVAREZERVITI等[31]給小鼠注射了攜帶有針對(duì)β位淀粉樣前體裂解酶-1（β-site APP cleaving enzyme protein，BACE1）基因siRNA的外泌體后，小鼠腦中β-淀粉樣蛋白表達(dá)水平下調(diào)。雖然該方法目前在卵巢癌耐藥研究中尚無(wú)相關(guān)報(bào)道，但由此提示通過(guò)外泌體包裹siRNA下調(diào)卵巢癌相關(guān)耐藥基因表達(dá)將有望成為一個(gè)治療途徑。MARLEAU等[32]開(kāi)發(fā)了一種類(lèi)似于血液透析設(shè)備的裝置，其含有一種與外泌體高親和力的纖維物質(zhì)，該機(jī)器以類(lèi)透析機(jī)制達(dá)到去除循環(huán)系統(tǒng)中存在的外泌體。外泌體用于制備疫苗是腫瘤免疫治療的一個(gè)新方向，腫瘤細(xì)胞來(lái)源外泌體（tumor-derived exosomes，TEX）表面可負(fù)載主要組織相容性負(fù)荷體Ⅰ類(lèi)分子（major histocompatibility complex Ⅰ，MHCⅠ）和腫瘤抗原，并可有效誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞反應(yīng)；TEX的抗腫瘤作用很大程度上依賴(lài)樹(shù)突性細(xì)胞（dendritic cells，DCs），其作為無(wú)細(xì)胞性結(jié)構(gòu)，具有容易制備及量產(chǎn)等優(yōu)勢(shì)，是一種理想的腫瘤疫苗載體。TAGHIKHANI等[33]通過(guò)電穿孔的方法將miR-142裝載在TEX上，結(jié)果發(fā)現(xiàn)修飾后的TEX可以誘導(dǎo)DCs的成熟，強(qiáng)化其免疫功能，并對(duì)免疫抑制的腫瘤微環(huán)境起到一定程度的抗腫瘤作用。這一研究提示，TEX既可作為藥物或基因的載體對(duì)卵巢癌進(jìn)行靶向治療，又可以作為一種腫瘤疫苗抑制腫瘤生長(zhǎng)。KIM等[34]通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，TEX包裹的紫杉醇可直接作用于耐藥的腫瘤干細(xì)胞，其對(duì)耐藥腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性為游離紫杉醇的50倍?？傊?，TEX作為藥物載體具有免疫原性低、藥物損耗率低和組織中易于擴(kuò)散等優(yōu)點(diǎn)。目前外泌體非編碼RNA在卵巢癌治療中的應(yīng)用仍較少，需要進(jìn)一步完善大樣本的體內(nèi)試驗(yàn)及具體免疫機(jī)制的研究。

5 總結(jié)與展望

卵巢癌作為3大婦科惡性腫瘤之一，由于其早期診斷率低、復(fù)發(fā)率高及化療耐藥，其病死率位居?jì)D科腫瘤首位。近年來(lái)，外泌體非編碼RNA與腫瘤的關(guān)系已成為熱門(mén)研究領(lǐng)域，外泌體非編碼RNA結(jié)合了外泌體及非編碼各自的優(yōu)勢(shì)，可作為卵巢癌早期診斷及預(yù)后評(píng)估的生物標(biāo)志物。同時(shí)，外泌體非編碼RNA亦可作為卵巢癌治療的特異性靶點(diǎn)，減少化療耐藥的發(fā)生，降低藥物不良反應(yīng)，改善患者的治療效果及預(yù)后。然而目前有關(guān)外泌體非編碼RNA的研究相對(duì)較少，非編碼RNA在外泌體中的富集及降解機(jī)制尚不明確。此外，外泌體非編碼RNA作為腫瘤標(biāo)志物的靈敏度及特異性如何仍需進(jìn)一步研究。外泌體非編碼RNA在卵巢癌治療方面的應(yīng)用仍存在亟待解決的問(wèn)題，體外外泌體過(guò)濾裝置不具有選擇性，非腫瘤來(lái)源外泌體的減少是否對(duì)卵巢癌的疾病進(jìn)程有影響需要進(jìn)一步研究，特異性消除或抑制外泌體非編碼RNA的分泌及如何通過(guò)外泌體非編碼RNA逆轉(zhuǎn)化療耐藥的發(fā)生仍需進(jìn)一步研究。