龔紫鳳，梁小妹，呂其壯,2*，覃 婷，農(nóng)可懿，陳旭健*

(1.玉林師范學院生物與制藥學院，廣西玉林 537000；2.廣西農(nóng)產(chǎn)資源化學與生物技術(shù)重點實驗室，廣西玉林 537000)

金花茶(CamellianitidissimaChi,CNC)首次于1933年被我國植物學家左景烈教授在廣西境內(nèi)發(fā)現(xiàn)，1960年由中國植物界胡先骕教授命名為“金花茶”，并于1984年將其列入國家一級保護植物名錄[1]。金花茶被我國劃歸為珍稀瀕危的植物，因其花瓣為蠟質(zhì)的黃金色，被譽為“茶族皇后”，同時在植物界中還享有“大熊貓”的美譽，主要分布于廣西南部和越南北部，且95%金花茶資源分布于廣西南部地區(qū)，其中防城港是我國金花茶的主產(chǎn)區(qū)，該市擁有世界上唯一的一個國家級金花茶自然保護區(qū)，此外南寧市金花茶公園則擁有世界上最大的金花茶基因庫[2]。研究表明，金花茶含有多種對機體具有極其重要保健作用的天然活性物質(zhì)及微量元素，不僅具有較高的觀賞價值，還有相當高的藥用價值，常作為飲茶材料和保健藥材[3-4]。隨著人們對自身健康的不斷追求，開發(fā)具有保健作用及藥用價值的產(chǎn)品已成為趨勢，因此近年來有關(guān)金花茶活性成分及抗病機制等方面的研究資料也在不斷涌現(xiàn)。鑒于此，筆者針對金花茶抗病毒作用的研究進展進行歸納總結(jié)，以期為更好地開發(fā)含金花茶成分的抗病毒藥品提供理論參考。

1 金花茶生物學功能的概述

大量研究表明，金花茶含有豐富的生物活性成分，包括總黃酮、茶色素、茶多酚及維生素等天然營養(yǎng)成分以及對人體有重要保健作用的天然有機硒、鋅、鉬、鋇、鍺等多種微量元素，且具有很高的經(jīng)濟和保健價值[5]。劉云等[6]的研究證明金花茶具有抗腫瘤、抗病毒、抗動脈硬化、防止癌細胞轉(zhuǎn)移等生物學功能。

1.1 黃酮類

黃酮類化合物是自然界中大多數(shù)中草藥的重要有效成分，其具有抗病毒、抗真菌、降低膽固醇等多種功效。已有研究發(fā)現(xiàn)，金花茶中富含黃酮類成分，花朵中的黃酮類成分顯著高于葉片，其黃酮類活性成分包括表沒食子兒茶素(epigallocatechin,EGC)、兒茶素沒食子酸酯(catechin gallate,CG)及槲皮素(quercetin)等，其中總黃酮(主要成分為槲皮素和山柰酚)相對含量較高[7]。李先民等[8]的研究表明不同種類金花茶中的黃酮含量差異比較大，同一種類而不同葉齡的金花茶葉所含的總黃酮含量變化比較大。

1.2 多酚類

金花茶通過酚類化合物清除乙醛來抑制糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end-product,AGE)的形成，進而起到延緩衰老的作用[9]。茶多酚為金花茶葉中多酚類物質(zhì)的主要成分，具有抗腫瘤、抗病毒及清除自由基的能力。金花茶葉中的多酚物質(zhì)主要包括兒茶素(catechin,C)、沒食子酸(gallic acid)、表兒茶素(epicatechin,EC)，兒茶素是茶多酚的主要有效成分，而表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)與表兒茶素沒食子酸酯(epicatechin gallate,ECG)則為兒茶素類中重要的活性物質(zhì)。大量研究表明植物多酚具有降血糖作用，例如馬碩等[10]的研究發(fā)現(xiàn)金花茶中的茶多酚通過修復損傷的胰島，有效降低血糖，從而改善糖尿病的并發(fā)狀況。

1.3 皂苷類

最新研究發(fā)現(xiàn)，皂苷類合成的化合物在抗腫瘤、抗炎、抑制細菌等方面有著顯著的效果[11]。金花茶皂甙分離純化試驗表明，金花茶植物內(nèi)含人參皂甙類化合物且皂甙是由皂甙元與單糖或寡糖結(jié)合后而形成的化合物，這可能對進一步深入研究金花茶的藥用價值提供重要的指導意義。

1.4 其他成分

金花茶除含有以上成分外，還含有多種維生素，如維生素C(Vitamin C,Vit C)、維生素E(Vitamin E,Vit E)、維生素B2(Vitamin B2,Vit B2)等，其花朵富含鉀、鈣、鎂、鋁等多種礦質(zhì)元素，同時植株中鉬、錳、銅等多種微量元素含量也不少。金花茶茶花中富含有游離的氨基酸，已有研究表明，在其茶花上共檢測出18種氨基酸，其中谷氨酸和天冬氨酸的含量比較高，這可能是促使花茶鮮美爽味更為濃郁的原因[12]。

2 金花茶的抗病毒作用

病毒是一類結(jié)構(gòu)簡單，只含一種核酸，且不能獨立生活的非細胞生物，只能通過宿主細胞完成自身遺傳物質(zhì)的自我復制。病毒感染引發(fā)的疾病問題是人類迫切需要解決的事情，因此，目前開發(fā)天然高效且低毒性的抗病毒藥物十分迫切，而中草藥對病毒性疾病的防治效果獨特，金花茶是珍稀的中草藥，不少試驗表明其黃酮、茶多酚及提取物為有效的抗病毒成分。

2.1 金花茶與RNA病毒

2.1.1 金花茶與流感病毒 流感病毒(Influenza virus,IFV)是一種單股負鏈RNA呼吸道病毒，具有易傳染性、多樣性以及強致病性的特點，嚴重危害人類的健康，而引起人類高發(fā)病率與死亡率的流感病毒主要分為甲型和乙型兩種，甲型H1N1流感病毒有著較強的遺傳變異性[13]。Wu W J等[14]在槲皮素存在的條件下，用犬腎上皮連續(xù)細胞系(Madin-Darby canine kidney cells,MDCK cells)感染流感病毒，感染后48 h觀察細胞病變效應(cytopathic effect,CPE)，發(fā)現(xiàn)槲皮素對感染甲型流感H1N1和H3N2亞型的病毒株均有明顯的抑制作用。同時，研究表明槲皮素可能針對的是流感病毒顆粒而不是宿主細胞。黃深惠等[15]通過檢測7種茶多酚類物質(zhì)對MDCK細胞內(nèi)流感病毒活性的抑制試驗，發(fā)現(xiàn)ECG和EGCG對H1N1、H5N1和H9N2這3種亞型流感病毒的神經(jīng)氨酸酶(neuraminidase,NA)活性具有較為顯著的抑制作用，表明茶多酚能夠有效抑制流感病毒的增殖。因此，推測金花茶中的重要活性成分能有效抵抗傳染性的流感病毒。

2.1.2 金花茶與人類免疫缺陷病毒 人類免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)是一種正鏈RNA病毒，能夠攻擊人類免疫系統(tǒng)。HIV入侵人體后，能夠大量破壞人類白細胞分化抗原4(cluster of differentiation 4,CD4)分子，造成人體免疫功能受損，導致機體免疫缺陷，其表面有類脂囊膜，最表面為囊膜蛋白gp120，gp41為其跨膜蛋白。該病毒感染細胞是通過gp120囊膜蛋白與靶細胞膜上的受體分子(CD4)結(jié)合，引起gp41跨膜蛋白空間構(gòu)象的改變，使病毒囊膜和靶細胞膜相融合，接著病毒的核酸成功地被釋放到胞漿內(nèi)[16]。Kawai K等[17]通過流式細胞儀分析EGCG對gp120與CD4分子結(jié)合的影響，表明EGCG可以直接與CD4分子相結(jié)合，能夠有效抑制HIV-1囊膜蛋白gp120與受體分子的結(jié)合，從而抑制HIV對細胞的感染。EGCG對病毒顆粒有破壞作用，當其濃度大于1 μmol/L時，病毒吸附后進入細胞的逆轉(zhuǎn)錄過程明顯受到抑制，EGCG的抗HIV活性可能是與HIV-1生命周期中的幾個步驟相互作用的結(jié)果[18]。

2.1.3 金花茶與小鼠乳腺腫瘤病毒 小鼠乳腺腫瘤病毒(Mouse mammary tumor virus,MMTV)是一類RNA病毒，主要通過哺乳傳播，感染MMTV后的小鼠易誘發(fā)乳腺癌。MMTV感染人體細胞后，將自身的遺傳信息整合到被感染細胞的基因組中，從人乳腺癌中可以檢測到完整的MMTV樣病毒基因序列，其序列與小鼠的MMTV序列相似度較高，可稱其為人乳腺腫瘤病毒。侯曉瑩等[19]隨機地將相同周齡的MMTV驅(qū)動多瘤病毒中間T抗原(Polyoma virus middle T antigen,PyMT)轉(zhuǎn)基因小鼠分為藥物組、模型組以及FVB/NJ背景鼠對照組，藥物組每天灌胃金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物(methylene chloride ethyl acetate,JHC) 100 mg/kg，其余兩組灌胃等劑量的5 mg/mL羧甲基纖維素鈉(sodium carboxymethylcellulose,CMC-Na)，結(jié)果表明JHC對MMTV-PyMT轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺癌的發(fā)生有一定的抑制作用，對人乳腺癌細胞的體外增殖具有顯著的抑制作用?？梢?，金花茶可能為今后探索更有效的乳腺癌靶向藥物提供研究方向，但針對JHC對小鼠是否有副毒性的影響，有待更進一步的探究。

2.2 金花茶與DNA病毒

2.2.1 金花茶與乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)屬于一種嗜肝細胞的DNA病毒，是引起原發(fā)性肝癌發(fā)生的重要因素，原發(fā)性肝癌在全球范圍內(nèi)發(fā)病率較高，每年因患肝癌而死亡的人數(shù)占比例較大。隨機將健康大鼠分為7組，分別連續(xù)喂養(yǎng)含不同的金花茶成分的飼料及向其腹腔注射1劑量的二乙基亞硝胺(diethylnitrosamine,DEN)150 mg/kg，結(jié)果表明，金花茶濃縮液與其茶葉、茶花的浸泡液對人肝癌細胞具有明顯的抑制效果，能夠抵抗DEN的毒性作用，對肝癌細胞的增殖起到一定的抑制效果[20]。Zhang X M等[21]研究發(fā)現(xiàn)金花茶含水乙醇提取物能夠拮抗四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)誘導的急性肝損傷(acute liver injury,ALI)。由此可見，金花茶對肝臟有一定的保護作用，可對肝癌的早期預防有一定程度上的作用，并有可能在抑制乙型肝炎病毒所導致的肝癌中起到積極作用。

2.2.2 金花茶與巨細胞病毒 巨細胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV) 是一種雙螺旋DNA病毒，為皰疹病毒β亞科最常見的引起宮內(nèi)感染的病毒。該病毒與嬰兒智力低下、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育落后密切相關(guān)，易導致胎兒畸形、先天性感染、流產(chǎn)等現(xiàn)象。一般原發(fā)性感染HCMV在人體內(nèi)具有潛伏性，對于健康個體表現(xiàn)為無癥狀，但對免疫能力較弱的人群，病毒易被激活，引起HCMV裂解并進一步感染人體各大系統(tǒng)[22]。李丹等[23]用不同濃度的槲皮素溶液作用于被HCMV感染的細胞，通過四甲基偶氮唑鹽比色法(3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT)檢測細胞毒性，發(fā)現(xiàn)槲皮素能有效抑制HCMV感染所引起的細胞病變效應，其溶液對被感染HCMV細胞的增殖具有一定的抑制作用，由于金花茶中富含槲皮素成分，因此推測金花茶也能抑制巨細胞病毒感染，但有待進一步證實。

2.2.3 金花茶與人乳頭瘤病毒 人乳頭瘤病毒(Human papilloma virus,HPV) 是一類雙鏈環(huán)狀DNA病毒，常引起女性泌尿生殖道受感染。宮頸癌是由該病毒多種基因共同調(diào)控下引發(fā)的女性生殖器官惡性腫瘤，宮頸癌的發(fā)病與人乳頭瘤病毒有著密切的聯(lián)系[24]。趙元華[25]隨機分試驗組(含不同濃度的金花茶花水提取物)和對照組(只含不加藥物的癌細胞和培養(yǎng)基)，采用MTT法檢測金花茶花水提取物作用于人宮頸癌細胞在不同時間內(nèi)細胞的增長情況，研究表明金花茶花水提取物對人宮頸癌細胞植株具有抑制作用。用不同濃度的金花茶種子的不同提取物處理人宮頸癌細胞，發(fā)現(xiàn)金花茶種子中的乙醇提取物、水溶及正丁醇部分能顯著抑制人宮頸癌細胞的增殖。因此，表明金花茶的提取物對宮頸癌的預防有一定的作用。

2.2.4 金花茶與愛潑斯坦-巴爾病毒 鼻咽癌是危害人體頭頸部較為嚴重的惡性腫瘤，相關(guān)研究表明鼻咽癌患者與感染愛潑斯坦-巴爾病毒(Epstein-Barr virus,EBV)有很大的關(guān)聯(lián)，鼻咽癌患者血清中EBV潛伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)抗體表達的水平明顯高于正常對照組，LMP2A抗體可作為一種輔助診斷鼻咽癌的指標[26]。EBV是一種DNA病毒，人群普遍容易感染EBV，該病毒初次感染機體后并在個體內(nèi)持續(xù)存在[27]，EBV感染與多種淋巴及上皮細胞瘤的發(fā)生有著密切的聯(lián)系。朱華等[28]將人鼻咽癌細胞分為試驗組和對照組，試驗組加入不同終濃度的金花茶醇提物，對照組不加任何藥物，經(jīng)檢測后發(fā)現(xiàn)金花茶醇提物對人鼻咽癌細胞的增殖具有抑制性。此外，金花茶茶花提取物中分離出來的一種?；S酮糖苷不但能夠誘導人淋巴瘤細胞凋亡，還對其淋巴瘤細胞的增殖具有抑制作用[29]。因此，可推測金花茶對鼻咽癌的發(fā)生有一定的預防作用，在治療淋巴瘤引起的相關(guān)疾病方面發(fā)揮著重要作用。

2.3 金花茶與其他病毒

已有不少學者對金花茶中所含的黃酮類物質(zhì)與茶多酚成分進行分離提取，研究其藥理作用?，F(xiàn)有研究表明，黃酮類和茶多酚對多種病毒的生命活性有影響。兒茶素的主要活性成分EGCG對呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)在體內(nèi)外的感染與復制均有抑制作用[30]；茶多酚能夠有效提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力，可作用于主要由人類皰疹病毒引發(fā)的老年癡呆癥的早期預防[31]；給固始雞雛雞日糧中添加適量的茶多酚，發(fā)現(xiàn)可以延長雛雞體內(nèi)新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)抗體存留的時間，促進肉雞體內(nèi)各免疫器官的發(fā)育及增強其免疫能力[32]。黃酮類化合物在體外以抗病毒生物合成的方式抑制腺病毒在人喉癌細胞內(nèi)的增殖，也可以抑制單純皰疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)與柯薩奇病毒B組2型(Coxsackievirus B2,CVB2)的復制及生物合成[33]。

3 小結(jié)與展望

近年來的研究表明，金花茶茶葉中的黃酮類物質(zhì)與茶多酚中的EGCG在抗病毒作用方面表現(xiàn)較好，且其茶葉、茶花以及種子的提取物在抗腫瘤、抗病毒、抗炎等方面呈現(xiàn)著較為理想的效果。不少研究者發(fā)現(xiàn)，金花茶果皮醇乙酸乙酯萃取物以及種子醇提物可以抗IgE介導Ⅰ型過敏反應，對嗜酸性粒細胞有抑制作用，能增強機體免疫能力[34]。中國古代李時珍的《本草綱目》與現(xiàn)代醫(yī)學《廣西藥用植物名錄》均有記載，金花茶有清熱解毒之功效[2]。但由于金花茶對生存環(huán)境比較敏感以及相關(guān)管理機構(gòu)監(jiān)管不周的問題，導致其生長受到重大影響。目前對金花茶藥效作用機制研究較少及其具體的抗病毒機制還尚未清楚，仍需進一步的深入研究，進而為開發(fā)一系列金花茶類藥品或保健品提供有效的參考價值，為研究抗病毒藥物與提高人類健康生活水平做出貢獻。