黨志紅，高占林，趙玉敬，安靜杰，竇亞楠，潘文亮，華佳楠，李耀發(fā)

(河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所/河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華北北部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北保定 071000)

棉鈴蟲Helicoverpaarmigera是世界性、多種農(nóng)作物上的重要害蟲，二十世紀(jì)九十年代曾對我國棉花等作物生產(chǎn)造成了重大經(jīng)濟(jì)損失。隨著轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的大面積推廣應(yīng)用，棉鈴蟲的危害得到了有效控制(Wuetal., 2008)，但是，近年來黃河流域棉花種植面積的逐年下降，轉(zhuǎn)基因棉花作為“誘殺陷阱”的作用逐漸減弱，棉鈴蟲在我國北方棉田之外的作物上危害程度加重，如花生、玉米等(陸宴輝等, 2018)。目前，多地棉鈴蟲種群對傳統(tǒng)殺蟲劑品種均已產(chǎn)生了中至高水平的抗性(張緯慶, 2015; 胡紅巖等, 2018)，使得生產(chǎn)上急需篩選出高效低毒的化學(xué)藥劑品種。近年來，雙酰胺類殺蟲劑因其對鱗翅目害蟲特效，對非靶標(biāo)生物安全，并與傳統(tǒng)殺蟲劑無交互抗性而受到廣泛青睞(趙平等, 2015)。除第一代雙酰胺類殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺之外，隨著溴氰蟲酰胺、氟苯蟲酰胺、氟氰蟲酰胺等雙酰胺類殺蟲劑的相繼商業(yè)化，在逐步豐富了該類殺蟲劑品種的同時(shí)，也為鱗翅目害蟲的防治提供了更多的藥劑選擇(Chaietal., 2007; Kambrekaretal., 2017; Wangetal., 2018)。

由于棉鈴蟲易對化學(xué)殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性(張緯慶, 2015)，從而導(dǎo)致殺蟲效果下降，以及中藥材、蔬菜等作物上化學(xué)農(nóng)藥使用受到限制等原因，使得在篩選安全、高效化學(xué)殺蟲劑的同時(shí)，也要考慮如何協(xié)調(diào)使用天敵等其他非化學(xué)防控措施。赤眼蜂Trichogrammaspp.屬膜翅目，是世界范圍內(nèi)商業(yè)化最早、最成功的鱗翅目害蟲天敵昆蟲(van Lenteren, 2012)，松毛蟲赤眼蜂Trichogrammadendrolimi是我國用于防治鱗翅目害蟲的優(yōu)勢赤眼蜂之一(馬春森等, 2005)。利用天敵昆蟲的自然控制能力，能夠減少化學(xué)殺蟲劑的使用和保護(hù)生態(tài)環(huán)境，但是天敵昆蟲的使用存在一定的局限性，如赤眼蜂只能寄生棉鈴蟲卵，針對殘存的棉鈴蟲幼蟲仍可能需要使用化學(xué)殺蟲劑。因此，如何協(xié)調(diào)化學(xué)殺蟲劑與天敵昆蟲的使用，尋找生物防治和化學(xué)防治之間的平衡點(diǎn)，成為棉鈴蟲防治中的重要問題。

第一代雙酰胺類殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺對棉鈴蟲的高毒力已被證明(張丹丹等, 2018)，對松毛蟲赤眼蜂安全性也有報(bào)道(張俊杰等, 2014)。但是尚未見到其他雙酰胺類殺蟲劑品種對棉鈴蟲和松毛蟲赤眼蜂毒力的系統(tǒng)報(bào)道?；诖耍疚臏y定了4種雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲幼蟲和松毛蟲赤眼蜂成蟲毒力，并分析比較了該類藥劑對松毛蟲赤眼蜂的安全性。本研究將為防治棉鈴蟲高效殺蟲劑的選擇與使用，及其與松毛蟲赤眼蜂釋放的協(xié)調(diào)應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試?yán)ハx

松毛蟲赤眼蜂，北京市密云區(qū)植保植檢站提供，將柞蠶卵繁殖的松毛蟲赤眼蜂卵于室內(nèi)恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)25±1℃條件下培養(yǎng)，取新羽化的松毛蟲赤眼蜂成蜂，測定供試藥劑對其的毒性程度。

棉鈴蟲，采用河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所養(yǎng)蟲室長期人工飼料培養(yǎng)種群，于室內(nèi)25±1℃，相對濕度70%±10%，自然光照條件下進(jìn)行室內(nèi)飼養(yǎng)。挑選生理狀態(tài)一致的棉鈴蟲3齡初期幼蟲，測定供試藥劑對棉鈴蟲的室內(nèi)毒力。

1.2 供試藥劑

96.0%氯蟲苯甲酰胺原藥，河北博佳農(nóng)業(yè)有限公司；95.0%溴氰蟲酰胺原藥，河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司；97.3%氟苯蟲酰胺原藥，拜耳作物科學(xué)(中國)有限公司；89.6%氟氰蟲酰胺原藥，拜耳作物科學(xué)(中國)有限公司；92.0%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽(以下簡稱甲維鹽)原藥，河北威遠(yuǎn)生物化工股份有限公司。將各供試原藥用丙酮溶解后，配制成一定濃度的母液(2 d內(nèi)使用，儲存于4℃下)。

1.3 毒力(毒性)測定方法

1.3.1供試藥劑對棉鈴蟲室內(nèi)毒力測定方法

采用浸葉法測定供試藥劑對棉鈴蟲的室內(nèi)毒力。按預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，用0.1%吐溫-80水溶液將各母液稀釋并配制成5～7個(gè)濃度梯度的藥液備用。將新鮮的甘藍(lán)葉片用打孔器打成直徑1 cm的葉片，將葉片在藥液中浸漬30 s后，置于吸水紙上自然晾干后，放入養(yǎng)蟲管(直徑0.8 cm，長1.8 cm)中，每管3片，管內(nèi)接入健康活潑的棉鈴蟲3齡幼蟲1頭。每個(gè)處理重復(fù)4次，每次重復(fù)15頭幼蟲。將處理后的試蟲置于養(yǎng)蟲室內(nèi)(室內(nèi)25±1℃，相對濕度70%±10%，自然光照條件下)，進(jìn)行室內(nèi)飼養(yǎng)觀察。于處理后72 h檢查試蟲存活情況。用鑷子輕觸蟲體，以蟲體無反應(yīng)為死亡鑒定標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.2供試藥劑對松毛蟲赤眼蜂毒性測定方法

采用玻管藥膜法測定供試藥劑對松毛蟲赤眼蜂成蜂的毒性。按預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，采用丙酮將各母液稀釋并配制成5～7個(gè)濃度梯度的藥液備用。用移液槍吸取供試藥液200 μL放入干凈的指形管(1.6 cm×8 cm)內(nèi)，將指形管置于滾動(dòng)機(jī)上快速滾動(dòng)。待指形管內(nèi)的丙酮完全揮發(fā)后，指形管內(nèi)壁形成一層均勻藥膜，用細(xì)毛筆向每個(gè)指形管接入20頭赤眼蜂，用雙層細(xì)紗布封口。每個(gè)處理重復(fù)4次，以丙酮處理做對照。將處理后的赤眼蜂置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)25±1℃條件下培養(yǎng)。待松毛蟲赤眼蜂與管壁藥膜接觸1 h后，檢查其存活情況。用細(xì)毛筆輕觸蟲體，蟲體無反應(yīng)為死亡鑒定標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 數(shù)據(jù)分析方法

運(yùn)用DPS v6.55軟件分析數(shù)據(jù)，根據(jù)死亡率機(jī)率值和濃度對數(shù)值求出毒力回歸方程式(Y=A+BX)和致死中濃度LC50值。

2 結(jié)果與分析

2.1 雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲的室內(nèi)毒力

供試藥劑對棉鈴蟲的毒力測定結(jié)果見表1。雙酰胺類殺蟲劑中氯蟲苯甲酰胺對棉鈴蟲3齡幼蟲的毒力最高，其LC50值為0.2882 mg/L；氟苯蟲酰胺的毒力與氯蟲苯甲酰胺相近，其LC50值為0.3894 mg/L；接下來是氟氰蟲酰胺，其LC50值為0.8609 mg/L；溴氰蟲酰胺對棉鈴蟲的毒力(LC50值為3.7638 mg/L)遠(yuǎn)低于其他3種雙酰胺殺蟲劑。

綜合來看，4種雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲的毒力均低于甲維鹽(LC50為0.06493 mg/L)，與供試藥劑中毒力最低的溴氰蟲酰胺相比，甲維鹽的毒力指數(shù)達(dá)到了57.97倍，而其他3種雙酰胺類殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺、氟苯蟲酰胺和氟氰蟲酰胺的毒力指數(shù)為4.37～13.06倍。

表1 雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲的室內(nèi)毒力(72 h)

2.2 雙酰胺類殺蟲劑對松毛蟲赤眼蜂成蜂的毒性

從多種藥劑對松毛蟲赤眼蜂的毒性測定結(jié)果來看，松毛蟲赤眼蜂對雙酰胺類殺蟲劑中溴氰蟲酰胺最敏感，其LC50值僅為0.4952 mg/L；對氟苯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺的敏感性相近，其LC50值分別為0.9933 mg/L和1.0060 mg/L(表2)。4種雙酰胺殺蟲劑中，氟氰蟲酰胺對松毛蟲赤眼蜂毒性最低，其LC50值為1.1541 mg/L。

綜合來看，4種雙酰胺類殺蟲劑對松毛蟲赤眼蜂的安全性均高于甲維鹽(LC50為0.1646 mg/L)，與供試雙酰胺類殺蟲劑中安全性最高的氟氰蟲酰胺相比，甲維鹽的毒性指數(shù)達(dá)到了7.01倍，而其他3種雙酰胺類殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺、氟苯蟲酰胺和溴氰蟲酰胺的毒性指數(shù)為1.15～2.33倍。

表2 雙酰胺類殺蟲劑對松毛蟲赤眼蜂的毒性(1 h)

2.3 雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲和松毛蟲赤眼蜂的選擇毒力

綜合雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲的室內(nèi)毒力和對松毛蟲赤眼蜂的安全性評價(jià)結(jié)果(圖1)來看，與甲維鹽相比，氯蟲苯甲酰胺、氟苯蟲酰胺和氟氰蟲酰胺對棉鈴蟲的毒力稍低，但是3種藥劑對赤眼蜂安全性要高于甲維鹽。而溴氰蟲酰胺對棉鈴蟲的毒力遠(yuǎn)低于甲維鹽，而其對松毛蟲赤眼蜂的安全性卻與甲維鹽相近。

圖1 雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲及松毛蟲赤眼蜂的選擇毒力Fig.1 Selective toxicity of diamide insecticides to Helicoverpa armigera and Trichogramma dendrolimus

3 結(jié)論與討論

二十世紀(jì)九十年代，棉鈴蟲在我國多種作物上暴發(fā)成災(zāi)，造成巨大危害的主要原因之一就是棉鈴蟲對多種殺蟲劑產(chǎn)生了極高的抗藥性，間接導(dǎo)致棉田化學(xué)農(nóng)藥用藥量的成倍增加，大量殺傷了天敵昆蟲，進(jìn)而造成了棉鈴蟲種群的再猖獗(戴小楓等, 1993; 慕立義, 1994; 畢章寶等, 1997)。近年來，以氯蟲苯甲酰胺為首的雙酰胺類殺蟲劑的開發(fā)和應(yīng)用，為棉鈴蟲的化學(xué)防治提供了新的高效殺蟲劑品種。該類殺蟲劑作用靶標(biāo)為昆蟲魚尼丁受體，其靶標(biāo)新穎，使得該類藥劑與其他傳統(tǒng)殺蟲劑沒有交互抗性(周蘊(yùn)赟, 2014)，但是已有研究發(fā)現(xiàn)，棉鈴蟲對氯蟲苯甲酰胺敏感性水平下降的現(xiàn)象(張少華等, 2013)，小菜蛾P(guān)lutellaxylostella、二化螟Chilosuppressalis等也已出現(xiàn)了對該類藥劑的高抗種群(尹飛等, 2015; 趙丹丹等, 2017)。多種害蟲對雙酰胺類殺蟲劑的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)及交互抗性研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，雙酰胺類殺蟲劑具有短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生高水平抗性的風(fēng)險(xiǎn)，并且不同品種間存在著明顯的交互抗藥性問題(趙丹丹等, 2017)。因此，棉鈴蟲田間防治中，不僅需要進(jìn)行氟苯蟲酰胺、氟氰蟲酰胺與氯蟲苯甲酰胺的輪換使用，而且也應(yīng)該進(jìn)行甲維鹽等高效殺蟲劑輪換使用，以降低單一殺蟲劑對棉鈴蟲的選擇壓力，延長雙酰胺類殺蟲劑的使用壽命。

已有研究表明甲維鹽對棉鈴蟲、甜菜夜蛾Asparaguscaterpillar、小菜蛾和草地貪夜蛾Spodopterafrugiperda等多種鱗翅目害蟲具有較高毒力和優(yōu)秀的田間防治效果(張丹丹等, 2018; 袁偉寧等, 2019; 趙勝園等, 2019)，但對松毛蟲赤眼蜂同樣高毒，風(fēng)險(xiǎn)性極高(袁偉寧等, 2019)，而對螟黃赤眼蜂、玉米螟赤眼蜂和短管赤眼蜂T.pretiosum等毒性風(fēng)險(xiǎn)相對較低(Giraddietal., 2006)。以甲維鹽作為對照藥劑，本文研究發(fā)現(xiàn)，雙酰胺類殺蟲劑中氯蟲苯甲酰胺、氟苯蟲酰胺和氟氰蟲酰胺對棉鈴蟲幼蟲的毒力雖低于甲維鹽，但仍對該蟲表現(xiàn)出了較高的毒力水平，而這3種殺蟲劑對松毛蟲赤眼蜂的毒性明顯低于甲維鹽，表現(xiàn)出了較高的安全性。張俊杰等(2014)曾評估了氯蟲苯甲酰胺對螟黃赤眼蜂和玉米螟赤眼蜂的安全性，分析了藥劑處理后兩種赤眼蜂的羽化率、死亡率和寄生米蛾卵量等指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)與高效氯氰菊酯和阿維菌素相比，氯蟲苯甲酰胺對2種赤眼蜂也表現(xiàn)出了較高的安全性?；瘜W(xué)藥劑對赤眼蜂安全性研究中還發(fā)現(xiàn)，不同發(fā)育階段赤眼蜂對化學(xué)藥劑的敏感性存在明顯差異。以甲維鹽為例，與成蟲期赤眼蜂相比，該藥劑對蛹期赤眼蜂發(fā)育和寄生行為影響較小(潘悅等, 2013; Karthiketal., 2015)。這也說明化學(xué)藥劑與赤眼蜂協(xié)調(diào)使用防治害蟲過程中，選擇適宜的施藥時(shí)期能夠有效的降低對天敵昆蟲的殺傷作用。

本文僅研究了雙酰胺類殺蟲劑對棉鈴蟲和松毛蟲赤眼蜂室內(nèi)選擇毒力，未涉及該類藥劑對不同發(fā)育階段赤眼蜂影響的研究。從赤眼蜂的發(fā)育階段來看，其生長發(fā)育共分為卵、幼蟲、蛹和成蟲期4個(gè)階段，而其前3個(gè)階段均生活在寄主卵內(nèi)，因而對藥劑的敏感性以成蟲期最敏感(向玉勇等, 2012)。因而，應(yīng)進(jìn)一步研究化學(xué)防治與不同發(fā)育階段赤眼蜂的關(guān)系，選擇最佳的用藥時(shí)期和方式，以盡可能保護(hù)和利用天敵昆蟲赤眼蜂，充分發(fā)揮其在棉鈴蟲防治中的作用，以達(dá)到棉鈴蟲的有效治理。