韓少玲 吳亞兵 張家友 劉軍慧 陳麗娟

多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一種B細(xì)胞惡性疾病，以克隆漿細(xì)胞異常增生為主要特征，其發(fā)病率在血液系統(tǒng)惡性疾病中位居第二[1]。目前MM治療仍有一定局限，無法完全治愈，但早期診斷及干預(yù)對于患者預(yù)后及生存具有重要臨床意義。研究表明，在MM發(fā)病早期即可存在血清相關(guān)標(biāo)志物的異常，檢測這些指標(biāo)水平差異或可為MM患者的診斷、病情評估提供參考[2]。β2-微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)是MM診斷的常見標(biāo)志物，可反映骨髓瘤細(xì)胞增殖活性，目前已被用于MM病情評估、治療效果評價(jià)、預(yù)后判定中[3,4]。除β2-MG，部分非特異性炎性反應(yīng)指標(biāo)也被證實(shí)在MM患者中可出現(xiàn)含量的顯著改變，白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)是臨床常見炎性因子，對于機(jī)體體液免疫、細(xì)胞免疫功能均有一定調(diào)節(jié)作用，在MM患者中，IL-6是骨髓瘤細(xì)胞生存及生長的關(guān)鍵因子，MM細(xì)胞及骨髓基質(zhì)細(xì)胞、成骨細(xì)胞等均可通過自分泌及旁分泌作用分泌IL-6，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖及凋亡過程[5]。C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，研究表明，在MM患者中CRP可在IL-6的刺激下表達(dá)增強(qiáng)[6]。目前已有部分研究探討了MM患者血清β2-MG及相關(guān)炎性因子水平的變化，但其與臨床分期的關(guān)系及其對MM患者病情的評估效能仍尚需更多樣本研究證實(shí)。本研究以我院68例MM患者作為研究對象，測定血清β2-MG、CRP和IL-6水平并分析其與臨床分期的關(guān)系，旨在為MM患者早期病情評估提供一定參考。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年2月至2019年5月我院血液科收治的68例初診MM患者納入MM組，另擇50例同期于我院查體的健康志愿者作為對照組，對照組受試者均進(jìn)行病史詢問、體格檢查及常規(guī)生化檢查，均未見明顯異常，對本研究知情并簽署同意書。68例MM組患者中男35例，女33例，年齡51～73歲，中位年齡56歲；臨床分型為IgG型32例，IgA型24例，輕鏈型11例，不分泌型1例；Durie-Salmon分期[8]：Ⅰ期22例，Ⅱ期25例，Ⅲ期21例。對照組男27例，女23例;年齡42～80歲，中位年齡57歲。2組患者及對照組受試者性別組成、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國多發(fā)性骨髓瘤診治指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，行骨髓穿刺確診；初診患者；自愿加入本研究并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤者；合并重要器官功能障礙者；合并急慢性感染者；存在免疫系統(tǒng)疾病及其他血液系統(tǒng)疾病者；近期接受抗炎、免疫治療者。

1.3 方法 采集患者空腹靜脈血5 ml，以1 000 g速度離心5 min，分離血清，采用免疫比濁法測定β2-MG、CRP水平，β2-MG試劑盒購自南京澳林生物科技有限公司；CRP試劑盒購自北京利德曼生化股份有限公司；采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清IL-6水平，試劑盒購自艾美捷科技有限公司，實(shí)驗(yàn)檢測均為同一檢驗(yàn)員進(jìn)行檢測，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 MM組患者及對照組受試者血清學(xué)指標(biāo)比較 MM組患者血清β2-MG、CRP和IL-6水平高于對照組受試者，差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 MM組患者及對照組受試者血清學(xué)指標(biāo)比較

2.2 不同臨床分期患者血清學(xué)指標(biāo)分析 不同臨床分期MM患者血清β2-MG、CRP和IL-6水平比較差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，隨著臨床分期的升高，血清β2-MG、CRP和IL-6水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同臨床分期患者血清學(xué)指標(biāo)分析

2.3 血清β2-MG、CRP和IL-6水平與臨床分期的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)性分析示，血清β2-MG、CRP和IL-6水平與臨床分期呈正相關(guān)(r=0.511，0.305，0.255，P<0.05)。見圖1～3。

圖1 血清β2-MG與臨床分期的相關(guān)性分析

圖2 血清CRP水平與臨床分期的相關(guān)性分析

圖3 血清IL-6水平與臨床分期的相關(guān)性分析

2.4 血清β2-MG、CRP和IL-6水平對病情嚴(yán)重程度的評估價(jià)值分析 將ISSⅡ期組、ISSⅢ期納入高分期組，ISSⅠ期組納入低分期組，ROC曲線分析示，血清β2-MG、CRP和IL-6水平評估高分期患者的曲線下面積(AUC)為0.852、0.651、0.633，當(dāng)截點(diǎn)值為9.45 mg/L、18.87 mg/L、60.97 pg/L時(shí)約登指數(shù)最大。見圖4，表3。

圖4 血清β2-MG、CRP和IL-6水平單獨(dú)評估病情嚴(yán)重程度的ROC曲線

表3 血清β2-MG、CRP和IL-6水平單獨(dú)評估病情嚴(yán)重程度的價(jià)值

2.5 血清β2-MG、CRP和IL-6水平聯(lián)合評估嚴(yán)重程度的價(jià)值分析 β2-MG聯(lián)合CRP、β2-MG聯(lián)合IL-6、CRP聯(lián)合IL-6、三者聯(lián)合評估MM患者嚴(yán)重程度的AUC分別為0.854、0.873、0.655、0.879，其中三者聯(lián)合評估價(jià)值最高。見表4，圖5。

表4 血清β2-MG、CRP和IL-6水平聯(lián)合評估病情的價(jià)值

3 討論

β2-MG是一種小分子球蛋白，屬于組織相容性抗原HLA的一部分，可反映骨髓瘤細(xì)胞增殖活性。諸多研究證實(shí)，β2-MG與MM患者腫瘤負(fù)荷呈正相關(guān)關(guān)系，β2-MG可在患者骨骼中沉積，與破骨細(xì)胞活化分子及糖基化終產(chǎn)物相互作用，導(dǎo)致骨吸收及周圍組織的淀粉樣改變[9]。CRP和IL-6是臨床常見的炎性細(xì)胞因子，其中IL-6是調(diào)節(jié)B細(xì)胞及T細(xì)胞活性的細(xì)胞因子，可介導(dǎo)抗體的產(chǎn)生，參與機(jī)體炎性反應(yīng)過程，CRP是肝臟產(chǎn)生的急性時(shí)相蛋白，在多種炎癥性疾病中均可見其水平的急劇升高[10-12]。目前認(rèn)為CRP受IL-6調(diào)節(jié)，兩者呈正相關(guān)關(guān)系，在MM患者中，MM細(xì)胞分泌的IL-6可刺激肝臟分泌CRP，形成惡性循環(huán)[6]。本研究對比了MM患者與健康成年人患者血清β2-MG、CRP和IL-6水平，結(jié)果顯示MM患者可伴有各指標(biāo)水平的顯著升高，這一結(jié)果與既往研究結(jié)果類似[12,13]。

圖5 血清β2-MG、CRP和IL-6水平聯(lián)合評估病情嚴(yán)重程度的ROC曲線

目前對于MM患者臨床多采用ISS分期及Durie-Salmon分期標(biāo)準(zhǔn)，其中ISS分期主要根據(jù)血清β2-MG水平進(jìn)行劃分，Durie-Salmon分期主要根據(jù)血紅蛋白、M蛋白、尿輕鏈比例等指標(biāo)進(jìn)行劃分，更為全面及準(zhǔn)確，因此本研究入組病例均采用該分期標(biāo)準(zhǔn)。為探討血清標(biāo)志物與MM患者病情的關(guān)系，本研究比較了不同DS分期患者血清β2-MG、CRP和IL-6差異，結(jié)果顯示隨著病情分期的增加，血清學(xué)指標(biāo)水平明顯升高，提示β2-MG、CRP和IL-6可一定程度反應(yīng)MM患者病情嚴(yán)重程度，或可為MM患者早期病情分級、病情評估提供一定參考，與前人研究結(jié)果[14]類似。值得注意的是，本研究中血清β2-MG與分期呈中等程度的相關(guān)，而CRP及IL-6與臨床分期呈較低程度的相關(guān)甚至無明顯相關(guān)，提示CRP、IL-6變化與臨床分期的關(guān)系不強(qiáng)。

本研究將ISS Ⅱ期組、ISS Ⅲ期納入高分期組，ISS Ⅰ期組納入低分期組，結(jié)果顯示血清β2-MG、CRP和IL-6水平評估高分期患者的(AUC)為0.852、0.651、0.633，各指標(biāo)對于病情的評估均有較高的臨床價(jià)值，其中血清β2-MG診斷價(jià)值最高。本研究中CRP、IL-6與DS分期的相關(guān)性不強(qiáng)，且對于高分期患者的診斷效能不強(qiáng)，結(jié)合血清學(xué)指標(biāo)的特點(diǎn)分析其原因，CRP和IL-6是非特異性炎癥相關(guān)指標(biāo)，機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)、營養(yǎng)、免疫功能的變化均可引起其水平的變化，而β2-MG是一種細(xì)胞膜組織相容性抗原的成分，其可直接反應(yīng)骨髓瘤細(xì)胞的活性，其評估價(jià)值更高[15]。另外，本研究對兩者聯(lián)合及三者聯(lián)合的診斷價(jià)值進(jìn)行分析，結(jié)果顯示兩者或三者聯(lián)合診斷價(jià)值均顯著高于單一指標(biāo)診斷，其中三者聯(lián)合診斷價(jià)值最高，因此在臨床評估中可結(jié)合多種指標(biāo)進(jìn)行綜合評估。

綜上，血清β2-MG、CRP和IL-6與MM患者DS分期有一定程度相關(guān)，其中β2-MG相關(guān)性最強(qiáng)，對于評估MM患者病情嚴(yán)重程度具有較高的價(jià)值，臨床可將其單獨(dú)或聯(lián)合其他指標(biāo)用于臨床中。本研究樣本量較少，未來仍有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行驗(yàn)證。