巖 銳

(孟連縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 孟連 665800)

0 引言

豬瘟病毒(CSFV)屬于黃病毒科瘟病毒屬，該病原感染豬群后可引發(fā)嚴(yán)重的臨床癥狀，其中包括體溫升高、皮膚發(fā)紺、腹瀉或便秘，且懷孕母豬可出現(xiàn)繁殖障礙性疾病(如流產(chǎn)、死胎等)，而特征性病理變化則包括脾臟腫大與梗死、腎臟表面出血、回腸末端等處有紐扣狀潰瘍等[1-2]。豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)是導(dǎo)致斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征的重要病原之一，該病原可感染不同發(fā)育階段豬群，但對仔豬危害更為嚴(yán)重，可導(dǎo)致病畜出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大、呼吸困難等癥狀，是重要的可引起豬群發(fā)生免疫抑制的病原，對我國養(yǎng)殖業(yè)危害巨大[3]。

目前對于傳染性病原的防控主要依賴于疫苗的免疫接種與加強(qiáng)飼養(yǎng)管理水平等，但部分豬場在對豬群進(jìn)行疫苗免疫接種時往往存在少打或漏打的情況，導(dǎo)致豬群對特定病原存在特定免疫空窗期，極易受到相應(yīng)病原的感染。本文以一例CSFV和PCV2混合感染的案例診斷與治療為切入點(diǎn)，詳細(xì)闡述其發(fā)病原因與診斷經(jīng)過，為此類疫病的防控提供科學(xué)參考。

1 發(fā)病情況

云南昆明某散養(yǎng)戶飼養(yǎng)母豬30余頭，同時在2020年7月中旬向外購入60余頭保育豬進(jìn)行飼養(yǎng)。8月初，該場新購的部分保育豬開始發(fā)病，主要表現(xiàn)為精神沉郁、采食量下降、體溫升高等，同時伴有腹瀉和發(fā)抖癥狀。養(yǎng)殖戶采用抗生素和抗病毒藥物治療基本無效后，期間已有18頭保育豬發(fā)病，6頭病豬死亡。 其后，養(yǎng)殖戶于8月10日至孟連縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所進(jìn)行咨詢。

2 病理變化

筆者前往該場進(jìn)行現(xiàn)場診斷，對即將死亡的病豬進(jìn)行解剖，觀察其病理變化。發(fā)現(xiàn)病豬喉頭出血、全身淋巴結(jié)腫大且充血或出血；腎臟表面有大小不一的出血點(diǎn)、脾臟腫大且邊緣梗死；此外，病豬腸道出血，且回盲瓣有典型的紐扣狀潰瘍。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 樣品采集與處理

采集病豬病變明顯的臟器組織，如腎臟、脾臟、淋巴結(jié)和回盲瓣等處組織，分別裝入潔凈的封口袋并標(biāo)記，低溫保存并送至疫病診斷中心進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。用滅菌手術(shù)刀和眼科剪在超凈工作臺上采集樣品內(nèi)部組織，將組織樣品剪碎后與適量滅菌生理鹽水混合，并充分研磨，將研磨液過濾后，取上清樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。

3.2 細(xì)菌學(xué)檢測

蘸取少量過濾上清液在鮮血瓊脂培養(yǎng)基表面進(jìn)行平板劃線，其后將培養(yǎng)基平皿倒扣在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24～36 h，并每隔12 h拿出觀察培養(yǎng)基表面是否長出菌落。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基表面未出現(xiàn)菌落；為進(jìn)一步確定，筆者將發(fā)病組織直接涂片，進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，結(jié)果在鏡中也未發(fā)現(xiàn)菌株，提示豬群發(fā)病非細(xì)菌感染引起。

3.3 病毒學(xué)檢測

取200 μL研磨上清用商業(yè)化DNA/RNA提取試劑盒進(jìn)行核酸提取，其后將核酸RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，采用PCR法分別檢測CSFV、藍(lán)耳病毒(PRRSV)、PCV2和偽狂犬病毒(PRV)。結(jié)果在病豬組織中僅檢測出CSFV和PCV2核酸，且進(jìn)一步測序結(jié)果表明，該場獲得的CSFV毒株與GenBank收錄的HNCS-2011a株(登錄號：JX898523)同源性最高，為2.1c亞型；而PCV2毒株則與GenBank中SX1501株(登錄號：KJ187306)同源性最高，為PCV 2d亞型。

3.4 診斷結(jié)果

通過臨床及實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，我們最終判定該場豬群發(fā)病由CSFV和PCV2混合感染所引起，且均為野毒感染。由于病豬未出現(xiàn)明顯的PCV2感染導(dǎo)致的示病性癥狀，所以豬群發(fā)病主要由CSFV感染引起。

4 緊急措施

4.1 疫苗免疫接種

據(jù)了解，該場未對豬群免疫接種CSFV和PCV2疫苗，而之前也未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的類似CSF疫情，故而筆者猜測此次豬群發(fā)病可能是由于對外購入豬群引起。因此，對全體母豬緊急免疫接種豬瘟E2亞單位疫苗1頭份，對保育豬和仔豬分別免疫接種1頭份和0.5頭份。

4.2 其他防控措施

將發(fā)病豬群與健康豬群進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，為提高發(fā)病豬群存活率或免疫力，在飼料中添加茯苓多糖1 kg/t，均勻攪拌后給豬群飼喂，連續(xù)飼喂2周；在豬群飲水中添加葡萄糖和電解多維。此外，為防止繼發(fā)感染，在飼料中也添加多環(huán)西素500 g/t，連續(xù)用藥2周。

5 治療效果

緊急防控措施實(shí)施1個月后，筆者回訪該養(yǎng)殖場，該場原先發(fā)病豬群基本康復(fù)，新生仔豬未出現(xiàn)疑似感染CSFV相關(guān)癥狀。此外，對采集的20份血清樣品(仔豬、母豬和保育豬分別為5份、5份和10份)進(jìn)行CSFV抗體檢測，發(fā)現(xiàn)豬瘟抗體陽性率達(dá)95%，阻斷率達(dá)93.25%。

6 結(jié)語

豬瘟在我國流行歷史悠久，目前該病在我國流行特點(diǎn)以散發(fā)和混合感染為主，雖然該病在我國豬場發(fā)生頻率較低，但該病仍對我國養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展具有很大的威脅。對于豬瘟的防控主要依賴于疫苗免疫接種，豬瘟兔化弱毒疫苗推廣應(yīng)用是我國防控豬瘟的主要措施之一，但對發(fā)病豬群免疫接種弱毒疫苗會導(dǎo)致病毒被體內(nèi)中和抗體所清除，影響免疫效果，故不適合對發(fā)病豬群進(jìn)行弱毒苗緊急免疫[4]。在本案例中，雖然診斷結(jié)果表明豬群發(fā)病主要是CSFV和PCV2混合感染引起，但病豬未表現(xiàn)出PCV2感染的典型癥狀，故而我們主要對豬瘟進(jìn)行緊急防控，通過對豬群緊急免疫接種豬瘟E2亞單位疫苗，最終使疫情得到控制，E2蛋白可誘導(dǎo)豬群產(chǎn)生針對CSFV的中和抗體，且其中含有的E2蛋白遠(yuǎn)高于弱毒疫苗，且其產(chǎn)生的免疫應(yīng)答受母源抗體干擾小，故可取得較好的防控效果。

由于豬群未表現(xiàn)PCV2感染典型癥狀，通過在飼料中添加多糖、維生素等手段提高豬群免疫力，同時對豬群進(jìn)行抗生素治療防止繼發(fā)感染，使得該場豬群疫情得到有效緩解。值得注意的是，若豬場考慮對豬群CSFV和PCV2進(jìn)行凈化，需要定期對豬群免疫接種相應(yīng)疫苗，同時結(jié)合抗體監(jiān)測及時補(bǔ)免，對病原陽性豬群進(jìn)行隔離治療或淘汰等也十分必要。