邢 英，鄭嶸炅，姜春暉，瑪依拉·卡哈爾，木胡牙提·烏拉斯?jié)h

截至2020年，我國(guó)糖尿病患者近1.3億，其中2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）約占90%[1]。臨床發(fā)現(xiàn)，超重與T2DM的發(fā)生發(fā)展具有密切聯(lián)系[2]。而且，部分研究結(jié)果顯示，超重及糖尿病發(fā)生與腸道菌群變化相關(guān)，腸道菌群作為主導(dǎo)人體健康的關(guān)鍵參與者[3]，影響宿主的營(yíng)養(yǎng)、代謝及免疫，進(jìn)而在糖尿病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[4-5]。因此，腸道菌群結(jié)構(gòu)及功能的研究有可能成為T(mén)2DM防治的重要突破口[6-8]。二甲雙胍與利拉魯肽均是當(dāng)前臨床用于治療超重T2DM患者常用的有效藥物[9]，但關(guān)于2種藥物對(duì)患者腸道菌群結(jié)構(gòu)和功能影響的研究較少。本研究擬采用高通量測(cè)序與生物信息學(xué)相結(jié)合的方法，探究2種藥物對(duì)患者腸道菌群結(jié)構(gòu)和功能的影響，為超重T2DM患者治療方案的選擇提供參考依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選取2018年1月—2019年6月于新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院綜合內(nèi)四科VIP病區(qū)住院的90例初治超重T2DM患者作為研究對(duì)象，平均年齡為（48±9）歲，其中少數(shù)民族患者8例。入選標(biāo)準(zhǔn)：①T2DM診斷符合糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]；②身體質(zhì)量指數(shù)（body mass index,BMI）≥27.5 kg/m2[11]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＜18歲；②長(zhǎng)期吸煙、酗酒；③患有炎癥、腫瘤、潰瘍等腸道器質(zhì)性疾病；④具有腹部手術(shù)史；⑤具有惡性高血壓、嚴(yán)重高脂血癥、自身免疫性疾病病史；⑥處于妊娠期和哺乳期；⑦近2周內(nèi)使用解痙藥、膨脹劑、益生菌、抗菌藥物或近1月內(nèi)使用激素類藥物、質(zhì)子泵抑制劑及中成藥；⑧二甲雙胍及利拉魯肽不耐受。本研究已通過(guò)我院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)（倫理審查批件編號(hào)：20201106-01），入組患者均已簽署知情同意書(shū)。

1.2 分組情況 將超重T2DM患者完全隨機(jī)分為3組，每組30例，并給予3種治療方案，具體如下：Met組給予單用二甲雙胍治療（格華止，中美上海施貴寶制藥有限公司，批號(hào)：AAQ3622），每次劑量為0.5 g，3次/d，口服；Lira組給予單用利拉魯肽治療（利拉魯肽，丹麥諾和諾德公司，批號(hào)：GP51912-1），每次晨起皮下注射利拉魯肽，初始用量為0.6 mg/d，治療1周后，增加用量至1.2 mg/d，再治療1周后，增加用量至1.8 mg/d；Ct組給予二甲雙胍和利拉魯肽聯(lián)合用藥治療。

Met、Lira、Ct 3組年齡依次為（49±10）歲、（48±9）歲、（47±9）歲，男/女例數(shù)依次為16/14例、15/15例、17/13例，病程依次為5（1，7）年、7（3，11）年、6（3，10）年。3組年齡（F=0.409，P=0.699）、性別組成（χ2=0.268，P=0.875）和病程（F=3.620，P=0.698）之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.3 方法

1.3.1 臨床資料及生化指標(biāo) 收集患者性別、年齡、身高、體質(zhì)量、病程和治療情況等資料。采用貝克曼庫(kù)爾特AU5800系列全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、糖化血紅蛋白（hemoglobin A1c,HbA1c）；采用ELISA試劑盒測(cè)定血清IL-6和TNF-α；采用放射免疫法測(cè)定空腹血清胰島素（fasting serum lisulin,FINS），計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)（homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）。

1.3.2 腸道菌群測(cè)定 收集患者治療前及治療12周后的糞便標(biāo)本，采用16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)測(cè)定并分析患者腸道菌群變化特征；使用QIAamp DNA Stool mini Kit 強(qiáng)力DNA提取試劑盒（上海拜力生物科技有限公司），從患者糞便樣品中提取細(xì)菌DNA；細(xì)菌16S rRNA基因的V3-V4區(qū)使用引物對(duì)（正向引物338F，5′-ACTCCTAGGGAGGAGCA-3′；反向引物 806R，5′-GGACTCHVGGGTWTTAT-3′）進(jìn)行PCR擴(kuò)增和測(cè)序，樣品測(cè)序基于Illumina Hiseq 2500平臺(tái)完成[10]。

1.3.3 生物信息學(xué)處理 使用FLASH軟件對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接、并通過(guò)Trimmomatic軟件對(duì)所得序列進(jìn)行質(zhì)量過(guò)濾，使用UCHIME軟件去除嵌合體得到高質(zhì)量的標(biāo)簽序列。以序列相似度97%為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行聚類分析，以序列數(shù)的0.005%作為閾值，過(guò)濾操作分類單元（optical transform unit,OTU）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 基于R語(yǔ)言agricolae、phyloseq包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定量資料呈正態(tài)分布，用±s表示，病程用中位數(shù)（最小值，最大值）表示。3組性別分布比較用R×Cχ2檢驗(yàn)，同一組治療前后比較用自身配對(duì)t檢驗(yàn)、3組間定量資料比較用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。使用ggpubr包中Kruskal-Wallis檢驗(yàn)比較組間差異，并使用ggplot2包完成繪圖；使用ggalluvial包繪制菌群豐度變化沖擊圖；基于ggcor包進(jìn)行影響因子、菌群結(jié)構(gòu)和菌群功能矩陣間相關(guān)性分析，繪制mantel檢驗(yàn)組合圖。通過(guò)PICRUSt軟件對(duì)16S rRNA測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行菌群功能與代謝通路預(yù)測(cè)。使用STAMP軟件進(jìn)行腸道菌群功能差異顯著性分析及繪圖[10]。

2 結(jié) 果

2.1 BMI及生化指標(biāo)變化 12周治療后，3組BMI分別為（31.48±1.21）kg/m2、（28.92±1.30）kg/m2、（28.29±1.22）kg/m2，均較治療前有所降低（P均＜0.05）。3種治療方案下，患者所有生化指標(biāo)均較治療前有所降低（P均＜0.05）。見(jiàn)表1～3。

表1 Met組治療前后BMI及生化指標(biāo)變化（±s）Table 1 Changes of BMI and biochemical indexes in Met group before and after treatment(±s)

表1 Met組治療前后BMI及生化指標(biāo)變化（±s）Table 1 Changes of BMI and biochemical indexes in Met group before and after treatment(±s)

指標(biāo) 治療前 治療后 差值d t值 P值BMI(kg/m2) 31.90±1.17 31.48±1.21 1.30±0.96 7.231 0.000 FPG(mmol/L)10.87±1.38 7.93±0.54 2.99±1.46 11.013 0.000 HbA1c(%) 9.59±0.89 7.77±0.46 1.81±0.98 9.938 0.000 FINS(mmol/L) 20.45±7.20 13.06±2.68 9.25±5.18 9.605 0.000 HOMA-IR 7.53±4.25 4.55±1.22 4.39±3.13 7.547 0.000 IL-6(pg/ml) 49.84±7.07 29.11±3.37 20.72±8.04 13.872 0.000 TNF-α(ng/ml) 59.36±6.45 43.11±7.67 16.43±9.11 9.713 0.000 γ-GT(mmol/L)109.99±29.45 73.39±30.93 48.91±32.84 8.020 0.000 TG(mmol/L) 3.90±1.29 3.46±0.75 0.99±0.73 7.321 0.000 TC(mmol/L) 5.36±0.55 4.54±0.49 0.85±0.54 8.478 0.000

表2 Lira組治療前后BMI及生化指標(biāo)變化（±s）Table 2 Changes of BMI and biochemical indexes in Lira group before and after treatment(±s)

表2 Lira組治療前后BMI及生化指標(biāo)變化（±s）Table 2 Changes of BMI and biochemical indexes in Lira group before and after treatment(±s)

指標(biāo) 治療前 治療后 差值d t值 P值BMI(kg/m2) 32.03±0.96 28.92±1.30 3.12±1.48 11.350 0.000 FPG(mmol/L) 10.50±1.54 7.74±0.84 2.81±1.35 11.236 0.000 HbA1c(%) 9.61±1.00 7.27±0.57 2.34±1.23 10.239 0.000 FINS(mmol/L)18.66±7.73 11.80±3.44 8.23±6.35 6.979 0.000 HOMA-IR 9.39±3.67 4.06±1.17 5.71±3.59 8.560 0.000 IL-6(pg/ml) 55.21±6.86 26.10±3.73 29.11±7.60 20.635 0.000 TNF-α(ng/ml) 60.72±7.71 37.07±7.69 23.65±9.44 13.496 0.000 γ-GT(mmol/L)102.53±30.32 65.24±26.12 46.35±29.25 8.532 0.000 TG(mmol/L) 4.24±1.14 2.52±0.85 1.94±1.04 10.040 0.000 TC(mmol/L) 5.72±0.59 4.34±0.42 1.39±0.75 9.972 0.000

表3 Ct組治療前后BMI及生化指標(biāo)變化（±s）Table 3 Changes of BMI and biochemical indexes in Ct group before and after treatment(±s)

表3 Ct組治療前后BMI及生化指標(biāo)變化（±s）Table 3 Changes of BMI and biochemical indexes in Ct group before and after treatment(±s)

指標(biāo) 治療前 治療后 差值d t值 P值BMI(kg/m2) 32.14±1.20 28.29±1.22 3.85±1.60 12.937 0.000 FPG(mmol/L)10.70±1.23 7.31±0.68 3.40±1.35 13.593 0.000 HbA1c(%) 9.82±0.88 7.28±0.59 2.53±1.11 12.234 0.000 FINS(mmol/L) 16.77±6.83 12.64±3.26 6.52±6.02 5.834 0.000 HOMA-IR 9.68±3.95 4.50±1.18 5.99±3.40 9.494 0.000 IL-6(pg/ml) 53.30±6.54 21.94±3.48 31.36±7.58 22.265 0.000 TNF-α(ng/ml) 63.59±7.43 36.23±6.94 27.36±9.25 15.921 0.000 γ-GT(mmol/L)110.28±21.46 66.01±25.10 46.37±32.32 7.727 0.000 TG(mmol/L) 3.59±1.35 2.58±0.85 1.50±1.08 7.505 0.000 TC(mmol/L) 5.50±0.57 4.38±0.48 1.17±0.67 9.339 0.000

3種方案治療后，Lira組和Ct組的BMI、IL-6、TNF-α、TG和TC的下降幅度均大于Met組（P均＜0.05）；Ct組的HbA1c下降幅度大于Met組（P＜0.05）。Lira組和Ct組指標(biāo)下降幅度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。見(jiàn)表4。

表4 3組BMI及生化指標(biāo)變化的差值比較（±s）Table 4 Comparison of differences of BMI and biochemical indexes among 3 groups(±s)

表4 3組BMI及生化指標(biāo)變化的差值比較（±s）Table 4 Comparison of differences of BMI and biochemical indexes among 3 groups(±s)

注：a.與Met組比較，P＜0.05

指標(biāo) Met組 Lira組 Ct組 F值 P值BMI(kg/m2) 1.30±0.96 3.12±1.48a 3.85±1.60a26.520 0.000 FPG(mmol/L) 2.99±1.46 2.81±1.35 3.40±1.35 1.363 0.261 HbA1c(%) 1.81±0.98 2.34±1.23 2.53±1.11a 3.239 0.044 FINS(mmol/L) 9.25±5.18 8.23±6.35 6.52±6.02 1.597 0.208 HOMA-IR 4.39±3.13 5.71±3.59 5.99±3.40 1.842 0.165 IL-6(pg/ml)20.72±8.04 29.11±7.60a 31.36±7.58a15.190 0.000 TNF-α(ng/ml)16.43±9.11 23.65±9.44a 27.36±9.25a10.430 0.000 γ-GT(mmol/L)48.91±32.84 46.35±29.25 46.37±32.32 0.063 0.939 TG(mmol/L) 0.99±0.73 1.94±1.04a 1.50±1.08a 7.027 0.001 TC(mmol/L) 0.85±0.54 1.39±0.75a 1.17±0.67a 4.955 0.009

2.2 各組腸道菌群多樣性變化 治療后，Met組和Ct組OTU數(shù)目和可觀測(cè)物種數(shù)均顯著上升（P均＜0.01），但Lira組變化為極顯著降低（P＜0.001）。在菌群多樣性方面，Met組和Ct組腸道菌群Shannon指數(shù)和Chao1指數(shù)均呈極顯著上升趨勢(shì)（P均＜0.001），而Lira組呈顯著下降趨勢(shì)（P均＜0.01）。見(jiàn)圖1。

圖1 3組治療前后腸道菌群多樣性變化A.3組治療前后腸道菌群OTU數(shù)目的變化；B.3組治療前后腸道菌群可觀測(cè)物種數(shù)的變化；C.3組治療前后腸道菌群Shannon指數(shù)的變化；D.3組治療前后腸道菌群Chao1指數(shù)的變化；***.P＜0.001；**.P＜0.01Figure 1 Changes of intestinal flora diversity in 3 groups before and after treatment

2.3 腸道菌群LefSe分析 LefSe分析顯示，3組患者治療前后腸道菌群在分類水平（門(mén)至屬）上呈現(xiàn)多重差異，Met、Lira、Ct組分別存在12、5、23個(gè)細(xì)菌類群豐度發(fā)生顯著變化（P均＜0.05）。見(jiàn)圖2。

圖2 3組治療前后腸道菌群LefSe分析A.Met組治療前后患者腸道菌群顯著性差異；B.Lira組治療前后患者腸道菌群顯著性差異；C.Ct組治療前后患者腸道菌群顯著性差異；LDA=4.0Figure 2 LefSe analysis of intestinal flora in 3 groups before and after treatment

2.4 腸道菌群結(jié)構(gòu)變化 豐度變化結(jié)果顯示，3組患者腸道菌群均以厚壁菌門(mén)（Firmicutes）為主（67.5%～74.7%）；其中Lira組治療前腸道菌群中擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）豐度較低，但在用藥治療后豐度增加了約2.4倍。Met組和Ct組患者腸道菌群中腸桿菌目（Enterobacteriales）豐度較低；Lira組患者治療后腸道Selenomonadales菌目豐度明顯降低。Lira組患者腸道梭桿菌科（Fusobacteriaceae）豐度在治療后大幅降低，而擬桿菌科（Bacteroidaceae）豐度大幅增加。在屬一級(jí)，Lira組普氏菌屬（Prevotella_9）的豐度在治療后明顯增加。見(jiàn)圖3。

圖3 3組治療前后腸道菌群結(jié)構(gòu)變化A.3組治療前后腸道菌群變化（門(mén)水平）；B.3組治療前后腸道菌群變化（目水平）；C.3組治療前后腸道菌群變化（科水平）；D.3組治療前后腸道菌群變化（屬水平）Figure 3 Changes of intestinal flora structure in 3 groups before and after treatment

2.5 腸道菌群功能變化 功能預(yù)測(cè)結(jié)果顯示，Lira組氨基酸代謝功能顯著減弱（P＜0.01），Met組能量代謝功能極顯著增強(qiáng)（P＜0.001），Ct組膜運(yùn)輸和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能均顯著減弱（P均＜0.01）。同時(shí)，各組患者腸道菌群的碳水化合物代謝功能表達(dá)呈減弱趨勢(shì)。脂質(zhì)代謝功能整體變化趨勢(shì)不明顯，僅Met組出現(xiàn)明顯降低趨勢(shì)。見(jiàn)圖4。

圖4 3組治療前后腸道菌群功能變化A.3組治療前后腸道菌群氨基酸代謝功能基因豐度變化；B.3組治療前后腸道菌群能量代謝功能基因豐度變化；C.3組治療前后腸道菌群膜運(yùn)輸功能基因豐度變化；D.3組治療前后腸道菌群信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能基因豐度變化；E.3組治療前后腸道菌群碳水化合物代謝功能基因豐度變化；F.3組治療前后腸道菌群脂質(zhì)代謝功能基因豐度變化Figure 4 Changes of intestinal flora function in 3 groups before and after treatment

2.6 腸道菌群相關(guān)性分析 基于目水平，對(duì)患者治療前后重要生化指標(biāo)、腸道菌群結(jié)構(gòu)及功能（Class_2水平）進(jìn)行矩陣相關(guān)性分析結(jié)果顯示，腸道菌群內(nèi)部相關(guān)性不明顯，組間存在差異。Met組中雙歧桿菌目（Bifidobacteriales）與FPG呈顯著正相關(guān)；Lira組中腸桿菌目（Enterobacteriales）、Selenomonadales菌目與γ-GT呈顯著正相關(guān)，擬桿菌目（Bacteroidales）與γ-GT呈顯著負(fù)相關(guān)；而聯(lián)合用藥后，Ct組中并沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的疊加效應(yīng)，Selenomonadales菌目與FINS和γ-GT呈顯著正相關(guān)，擬桿菌目（Bacteroidales）與FPG呈顯著負(fù)相關(guān)，β-變形菌目（Betaproteobacteriales）與TC呈顯著負(fù)相關(guān)，乳桿菌目（Lactobacillales）與FINS、TC呈顯著負(fù)相關(guān)（P均＜0.05）。

所有患者菌群樣本處理分析結(jié)果顯示，患者FPG與乳桿菌目（Lactobacillales）呈負(fù)相關(guān)，與其他類群呈正相關(guān)但均不顯著（P＞0.05）；FINS與乳桿菌目（Lactobacillales）、擬桿菌目（Bacteroidales）呈顯著負(fù)相關(guān)；TC與丹毒絲菌目（Erysipelotrichales）及其他稀有菌群呈顯著負(fù)相關(guān)；γ-GT與Selenomonadales菌目呈顯著正相關(guān)（P均＜0.05）。

菌群結(jié)構(gòu)與菌群功能表達(dá)相關(guān)性方面，紅蝽菌目（Coriobacteriales）與膜運(yùn)輸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能呈顯著負(fù)相關(guān)；雙歧桿菌目（Bifidobacteriales）與能量代謝和膜運(yùn)輸功能呈顯著負(fù)相關(guān)；腸桿菌目（Enterobacteriales）與糖水化合物代謝、膜運(yùn)輸及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能呈顯著正相關(guān)；擬桿菌目（Bacteroidales）與氨基酸代謝、能量代謝、膜運(yùn)輸和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能呈顯著負(fù)相關(guān)（P均＜0.05）。見(jiàn)圖5。

圖5 腸道菌群相關(guān)性分析A.Met組臨床指標(biāo)與腸道菌群矩陣相關(guān)分析；B.Lira組臨床指標(biāo)與腸道菌群矩陣相關(guān)分析；C.Ct組臨床指標(biāo)與腸道菌群矩陣相關(guān)分析；D.所有患者腸道菌群與菌群功能相關(guān)分析；連線代表患者臨床指標(biāo)與腸道菌群存在相關(guān)性；相關(guān)性-1表示菌群內(nèi)自相關(guān)關(guān)系；P值表示顯著性（黃色連線代表顯著相關(guān)，P＜0.05；灰色連線代表不顯著相關(guān)，P＞0.05）；相關(guān)性-2表示生化指標(biāo)與菌群相關(guān)關(guān)系；箱圖中，藍(lán)色箱為正相關(guān)，橙色箱為負(fù)相關(guān)，紅叉為無(wú)顯著相關(guān)性，P＞0.05Figure 5 Correlation analysis of intestinal flora

3 討 論

人體腸道菌群在調(diào)節(jié)宿主能量平衡方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，其結(jié)構(gòu)及功能變化與高血糖、胰島素抵抗等病理過(guò)程密切相關(guān)。研究表明，失調(diào)的腸道菌群是多種代謝性疾?。òǔ?、代謝綜合征和T2DM）的重要影響因素[12]。二甲雙胍與利拉魯肽是當(dāng)前臨床用于治療糖尿病合并肥胖的常用有效藥物，目前上述2種藥物對(duì)患者腸道菌群結(jié)構(gòu)和功能具有重要影響。本研究擬通過(guò)高通量測(cè)序與生物信息學(xué)相結(jié)合的方法，比較二甲雙胍與利拉魯肽治療后患者腸道菌群結(jié)構(gòu)和功能的差異，為超重T2DM患者治療方案的選擇提供參考依據(jù)。

本研究中，腸道菌群主要以厚壁菌門(mén)（Firmicutes）為主（67.5%～74.7%），擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）和變形菌門(mén)（Proteobacteria）為主要類群，上述結(jié)果與大多數(shù)研究結(jié)果一致[13-15]。既往文獻(xiàn)表明，腸道菌群結(jié)構(gòu)及功能的變化與超重T2DM等代謝性疾病的發(fā)生發(fā)展具有密切聯(lián)系[16]，腸道菌群結(jié)構(gòu)的失調(diào)如雙歧桿菌、乳酸桿菌等益生菌豐度降低顯著影響血糖變化[17-18]。

本研究發(fā)現(xiàn)，單用二甲雙胍或聯(lián)合用藥均可顯著增加腸道菌群物種多樣性豐度，而單用利拉魯肽產(chǎn)生的結(jié)果則完全相反，為極顯著降低。此外，單用二甲雙胍或聯(lián)合用藥對(duì)入組患者腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)影響顯著，可分別干擾腸道12、23個(gè)細(xì)菌類群；而單用利拉魯肽對(duì)腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)干擾較小，僅可對(duì)5個(gè)細(xì)菌類群產(chǎn)生顯著影響，防止了腸道菌群出現(xiàn)紊亂。腸道菌群結(jié)構(gòu)分析結(jié)果表明，利拉魯肽針對(duì)作用于擬桿菌科、梭桿菌科、普氏菌屬等，對(duì)其他細(xì)菌類群影響不顯著。擬桿菌在幫助宿主分解多糖、腸黏膜血管再生及免疫系統(tǒng)發(fā)育等多方面具有重要作用，是維持腸道微生態(tài)均衡的“多面手”[19]。同時(shí)，利拉魯肽治療后，腸道普氏菌屬（Prevotella_9）豐度同步增加，有助于患者在高纖維飲食后體質(zhì)量的降低[20-21]。

此外，本研究通過(guò)分析3組患者BMI變化趨勢(shì)發(fā)現(xiàn)，二甲雙胍對(duì)患者BMI降低有影響，但是作用相對(duì)較弱；相比二甲雙胍，聯(lián)合用藥對(duì)患者BMI的降低作用更為明顯，但有可能進(jìn)一步加劇腸道菌群結(jié)構(gòu)的紊亂；而單用利拉魯肽治療對(duì)患者BMI降低效果與聯(lián)合用藥療效相近，且僅影響少數(shù)腸道菌群，有助于腸道菌群整體穩(wěn)定。因此，可以進(jìn)一步推斷，利拉魯肽和二甲雙胍2種藥物對(duì)腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響機(jī)制可能不完全一致。

3種治療方案下，患者所有生化指標(biāo)均產(chǎn)生極顯著變化。Lira組和Ct組的BMI、IL-6、TNF-α、TG、TC的下降幅度均顯著大于Met組。以上結(jié)果說(shuō)明單用利拉魯肽或聯(lián)合用藥對(duì)2型糖尿病患者的療效優(yōu)于單用二甲雙胍。TNF-α 是引起脂肪組織胰島素抵抗的主要因素之一，近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)在胰島素抵抗患者的脂肪組織中存在著 TNF-α 的過(guò)度表達(dá)[22]。IL-6可由脂肪細(xì)胞等分泌，影響機(jī)體的糖脂代謝。并且隨患者 IL-6表達(dá)增加，胰島素敏感性降低[23]。本研究中，Lira組治療后 HOMA-IR和IL-6等炎性介質(zhì)指標(biāo)均極顯著降低，這證實(shí)了利拉魯肽可以通過(guò)減輕炎癥反應(yīng)來(lái)改善胰島素抵抗。此外，Lira組和Ct組指標(biāo)下降幅度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果說(shuō)明利拉魯肽在患者生化指標(biāo)變化中發(fā)揮了主要作用，臨床治療效果優(yōu)于二甲雙胍。此外，菌群功能預(yù)測(cè)結(jié)果表明，腸道菌群功能與生化指標(biāo)存在一定關(guān)聯(lián)性，Met組中雙歧桿菌目（Bifidobacteriales）可能通過(guò)影響膜運(yùn)輸和調(diào)節(jié)能量代謝而降低FPG；Lira組腸道菌群變化與γ-GT保持顯著相關(guān)關(guān)系，表明利拉魯肽優(yōu)先通過(guò)調(diào)節(jié)激素以及酶系統(tǒng)達(dá)到治療效果；Ct組結(jié)果顯示諸多細(xì)菌類群豐度變化同時(shí)與FPG等諸多生化指標(biāo)保持顯著的相關(guān)關(guān)系。藥物通過(guò)調(diào)節(jié)多種代謝途徑、膜運(yùn)輸以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等途徑從而影響宿主的代謝過(guò)程。

本研究患者均來(lái)自于西北地區(qū)且樣本量偏小，而且基于菌群功能預(yù)測(cè)研究也難以完整揭示菌群代謝通路改變與機(jī)體代謝的內(nèi)在聯(lián)系，須要開(kāi)展更多的深入研究進(jìn)行明確。

綜上所述，本文通過(guò)對(duì)3種用藥方案下超重T2DM患者治療前后腸道菌群結(jié)構(gòu)與功能變化的研究，發(fā)現(xiàn)二甲雙胍與利拉魯肽對(duì)腸道菌群結(jié)構(gòu)和功能都有影響。其中，利拉魯肽對(duì)患者腸道菌群干擾較小，二甲雙胍與利拉魯肽聯(lián)合治療對(duì)患者腸道菌群結(jié)構(gòu)干擾較大，建議未來(lái)在治療方案選擇上應(yīng)適當(dāng)考慮藥物對(duì)腸道菌群結(jié)構(gòu)影響。