蔣國強

【摘要】 目的：探討廣州地區(qū)RhD陰性獻血人群中ABO血型及抗原表型與表位分布情況。方法：選取廣州血液中心2017年1月-2019年12月經(jīng)血型儀法初篩RhD陰性樣本1 428例，應用間接抗人球蛋白試驗（IAT）進行確認，同時確定RhD陰性獻血者ABO血型及抗原表型的分布情況。結果：在1 428例初篩為RhD陰性的樣本中，經(jīng)IAT確認為RhD陰性1 374例（96.22%），D變異型54例（3.78%）。RhD陰性獻血人群中血型A型398例（28.97%），B型371例（27.00%），O型426例（31.00%），AB型179例

（13.03%）。確認為RhD陰性分型分布為ccee 774例（56.33%）、Ccee 396例（28.82%）、ccEe 89例（6.48%）、CCee 95例（6.91%）、CCEe 4例（0.29%）、CcEE 3例（0.22%）、CcEe 13例（0.95%）;RhD陰性獻血者的抗原表位中e抗原分布有1 371例，c抗原1 275例，C和E抗原分別為511例和109例。結論：廣州地區(qū)RhD陰性獻血人群中O型血型占比最高，A、B型血型次之，AB型血型占比最低;RhD陰性抗原表型分布以ccee為主，RhD陰性抗原表位以e、c的抗原為主。

【關鍵詞】 RhD陰性 ABO血型 抗原表型 抗原表位

Distribution of ABO Blood Groups and Antigens in RhD Negative Blood Donors in Guangzhou/JIANG Guoqiang. //Medical Innovation of China， 2021， 18（32）： 0-075

[Abstract] Objective： To explore the distribution of ABO blood group， antigen phenotype and epitope in RhD negative blood donors in Guangzhou. Method： A total of 1 428 RhD negative samples screened by blood group analyzer were selected from Guangzhou blood center from January 2017 to December 2019， and then confirmed by indirect antiglobulin test （IAT）. At the same time， the distribution of ABO blood group and antigen phenotype of RhD negative blood donors were determined. Result： Among 1 428 RhD negative samples， 1 374 cases （96.22%） were confirmed as RhD negative by IAT， and 54 cases （3.78%） were D variant. Among the RhD negative blood donors， there were 398 cases （28.97%） of type A， 371 cases （27.00%） of type B， 426 cases （31.00%） of type O and 179 cases （13.03%） of type AB. RhD negative typing was confirmed in 774 cases （56.33%） of ccee， 396 cases （28.82%） of Ccee， 89 cases （6.48%） of ccEe， 95 cases （6.91%） of CCee， 4 cases （0.29%） of CCEe， 3 cases （0.22%） of CcEE and 13 cases （0.95%） of CcEe; there were 1 371 cases of e antigen， 1 275 cases of c antigen， 511 cases of C antigen and 109 cases of E antigen in RHD negative blood donors. Conclusion： Among RhD negative blood donors in Guangzhou， the proportion of O blood group is the highest， followed by A and B blood groups， and AB blood group is the lowest. The phenotype distribution of RhD negative antigen is mainly ccee， and the epitopes of RhD negative antigen are mainly e and c.

[Key words] RhD negative ABO blood group Antigenic phenotype Antigenic epitope

First-author’s address： Guangzhou Blood Center， Guangzhou 510095， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.32.018

Rh血型系統(tǒng)是除ABO血型系統(tǒng)外最重要、最復雜及最具多態(tài)性的血型系統(tǒng)[1]。Rh血型系統(tǒng)目前已發(fā)現(xiàn)超過50個抗原，其中最常見的是C、c、D、E、e抗原[2]。D抗原是這5種抗原中免疫原性最強的一種，可以依據(jù)有無D抗原將Rh血型系統(tǒng)分為Rh陽性和Rh陰性[2-3]。倘若RhD陰性個體在輸血或懷孕過程中接觸正常的RhD陽性細胞免疫刺激后可產(chǎn)生抗-D，則會造成新生兒溶血癥、溶血性輸血反應[4-5]。目前在臨床工作中Rh血型系統(tǒng)的影響僅次于ABO血型系統(tǒng)，對臨床用血交叉配合具有重要的意義[6]。因此，了解RhD陰性獻血人群中ABO的血型分布、抗原表位和抗原表型的情況，對于建立RhD表型庫保障臨床用血安全具有重要作用[7]。為了提高臨床用血的安全性、有效性，提高稀有血型的供血能力，本研究選取廣州血液中心2017年

1月-2020年6月RhD陰性樣本1 428例，探討廣州地區(qū)RhD陰性獻血人群中ABO血型及抗原表型與表位分布情況。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取廣州血液中心2017年1月-

2020年6月經(jīng)過血型儀法初篩RhD陰性的無償獻血者1 428例，其中男722例，女706例;年齡18～56歲，平均（34.62±5.80）歲;納入標準：廣州地區(qū)RhD陰性的無償獻血者;年齡18～55歲。排除標準：獻血后血液檢查不合格。本研究均獲得獻血者的知情同意并簽署知情同意書，且經(jīng)本血站中心醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 方法 選用瑞士貝克曼公司生產(chǎn)的全自動血型分析儀，日本Kubota（久保田）公司的KA-2200型離心機，Thermo fisher（型號Sorvall BP16）離心機。血型儀法（貝克曼PK7300）初篩試劑應用北京金豪制藥股份有限公司提供RhD（IgM）血型定型試劑盒（單克隆抗體）進行篩選[8];應用間接抗人球蛋白試驗（indirect antihuman globulin testing，IAT）進行RhD陰性確認，試劑選用江蘇力博醫(yī)藥生物技術股份有限公司制品，采用兩種不同廠家的RhD抗體試劑進行陰性確認，對陽性結果進行直接抗球蛋白試驗以排除假陽性。分別應用抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑對RhD陰性的樣本進行血清學表型鑒定[9]?？?DIgG、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑以及間接抗人球蛋白試劑均選用珠海貝索生物技術有限公司制品。所有試劑均在有效期間使用。

1.3 觀察指標 針對初篩RhD陰性樣本，分析ABO血型分布情況，進行血清學表型鑒定，確定血樣分別為C、c、E、e的抗原表型以及抗原表位分布。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用（x±s）表示，計數(shù)資料用例（%）表示。

2 結果

2.1 RhD陰性獻血者的ABO血型分布情況 RhD陰性獻血人群中血型A型398例（28.97%），B型371例（27.00%），O型426例（31.00%），AB型179例（13.03%）。O型獻血者在RhD陰性獻血者所占比例最高，A、B型血型次之，AB型獻血者所占比例最低，見表1。

2.2 RhD陰性獻血者的抗原表型分布 1 428例初篩RhD陰性獻血者中，IAT確認為RhD陰性1 374例（96.22%），其中RhD陰性分型分布為ccee 774例（56.33%）、Ccee 396例（28.82%）、ccEe 89例（6.48%）、CCee 95例（6.91%）、CCEe 4例（0.29%）、CcEE 3例（0.22%）、CcEe 13例（0.95%），未見ccEE表型。見表2。

2.3 RhD陰性獻血者的抗原表位分布 c抗原陽性初篩RhD陰性1 316例，IAT確認RhD陰性1 275例;C抗原陽性初篩RhD陰性551例，IAT確認RhD陰性511例;E抗原陽性初篩RhD陰性126例，IAT確認RhD陰性109例;e抗原陽性初篩RhD陰性1 423例，IAT確認RhD陰性1 371例。見表3。

3 討論

血型是一種抗原，是人類各種血液成分的遺傳性狀表達，不同的血液成分表面存在不同的抗原類型[10]。1900年奧地利醫(yī)生Landsteiner發(fā)現(xiàn)了第一個血型系統(tǒng)，即ABO血型系統(tǒng)，從此人類揭開了血型的奧秘，同時也為人類醫(yī)學的發(fā)展提供了更為安全的輸血治療手段。目前Rh血型與ABO、MNS和P血型系統(tǒng)等是人類發(fā)現(xiàn)的較為重要的血型系統(tǒng)，其中Rh血型系統(tǒng)和ABO血型系統(tǒng)在臨床中應用廣泛[11-13]。Rh血型系統(tǒng)被認為是紅細胞血型中最為復雜的一個血型系統(tǒng)，其中RhD血型由于獨特的基因組構造，容易產(chǎn)生變異，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)的D變異型主要有弱D、部分D和D放散型（Del）等不同的變異表型[14-15]。此外，臨床中約有80%的RhD陰性患者在輸注了RhD陽性的紅細胞后，都會產(chǎn)生抗-D IgG抗體，可引發(fā)遲發(fā)性溶血性輸血反應和胎兒母親血型不合引起的新生兒溶血病[16]，為此，RhD變異型的孕婦、新生兒等需要更安全有效的血液。

ABO血型系統(tǒng)是臨床中最為熟悉的血型系統(tǒng)，關于ABO血型輸血發(fā)生的不良反應也逐年降低[17-18]。研究表明，臨床工作中較多見的輸血反應大多是由于Rh血型表型不符所導致，臨床主要監(jiān)測Rh中D抗原，而忽視抗原E在輸血中的不安全因素。因此，針對RhD血型的抗原表型和抗原表位研究，不僅有助于建立RhD表型庫提升血液中心血庫的能力，更可以預防因血型不符導致的臨床輸血反應，保障臨床輸血的安全[19-21]。

目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)超過250多種等位基因，RhD與編碼C、c、E、e抗原的RHCE基因位于1p34.3-36.1，RHD基因編碼RhD抗原，RHCE基因編碼RhCE抗原，兩基因緊密連鎖，具有很高的同源性[22-23]，文獻[1]研究發(fā)現(xiàn)，RhD基因與RHCE基因二者只有40個核苷酸不同，這40個核苷酸分別位于RHD和RHCE基因第3、4、5、6、7、9外顯子[24]。在本次研究的1 428例初篩RhD陰性獻血者中，IAT確認為RhD陰性1 374例（96.22%），D變異型標本54例（3.78%），這一結論與步曉筠等[11]在寧夏地區(qū)RhD陰性獻血人群D變異型所占比例5.49%相差較大，究其原因，研究者認為寧夏地區(qū)RhD陰性獻血人群D變異型居多主要與地域差異、種族差異存在相關性。觀察RhD陰性獻血者的ABO血型分布情況，發(fā)現(xiàn)O型獻血者在RhD陰性獻血者所占比例最高，A、B型血型次之。本研究發(fā)現(xiàn)AB型獻血者所占比例最低，與凌勵等[12]在河南省南陽市RhD陰性獻血者血型抗原分布規(guī)律的研究結論具有一致性。

本次研究中1 374例RhD陰性獻血者其分型按構成比排序分別為ccee（56.33%）、Ccee（28.82%）、ccEe（6.48%）、CCee（6.91%）、CCEe（0.29%）、CcEE（0.22%）、CcEe（0.95%），閆芳等[9]研究結果顯示ccee分型檢出率所占比例達到56.36%，與本研究結果類似，抗原表型均以ccee為主，但在閆芳等[9]研究中發(fā)現(xiàn)ccEE分型的獻血者有12例，本次的研究中未發(fā)現(xiàn)ccEE分型。本研究RhD陰性獻血者抗原分布結果顯示c抗原陽性初篩RhD陰性

1 316例，C抗原陽性初篩RhD陰性551例，E抗原陽性初篩RhD陰性126例，e抗原陽性初篩RhD陰性1 423例，表明RhD陰性獻血者抗原表位主要以e抗原和c抗原為主。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)廣州地區(qū)RhD陰性獻血人群中O型血型占比最高，A、B型血型次之，AB血型占比最低。RhD陰性抗原表型分布以ccee為主，RhD陰性抗原表位以e、c抗原為主。RhD陰性獻血者ABO血型及抗原分布情況有助于RhD表型數(shù)據(jù)庫的建立，可預防因Rh表型不符輸血而導致嚴重的溶血反應，保障臨床安全用血。本研究樣本數(shù)量較少，后期研究應擴大獻血人群中的樣本量。

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（收稿日期：2021-09-17） （本文編輯：張爽）