李賢玉，孫 敏，吳勝英，陳德森

（湖北醫(yī)藥學(xué)院a.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院；b.附屬十堰市太和醫(yī)院普外科，湖北十堰 442000）

0 引言

生物醫(yī)學(xué)的迅猛發(fā)展促進了醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的巨大進步，生物醫(yī)學(xué)離不開動物實驗（兔、大小鼠等），不同物種之間的相似性在特定發(fā)展階段均反映出基本相似的生物學(xué)特征，準確、可靠、科學(xué)的動物實驗數(shù)據(jù)與大多數(shù)人類疾病及并發(fā)癥更加接近［1］。而醫(yī)學(xué)動物實驗是生物醫(yī)學(xué)的重要組成，也是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的重要手段和環(huán)節(jié)，氣管插管、剖開頸部、動脈結(jié)扎、藥物刺激及各種疾病建模等均會使實驗動物遭受巨大痛苦并為此而失去生命［2］。隨著社會的發(fā)展和人類文明的進步，動物實驗中存在的倫理學(xué)問題逐漸暴露［3］。故調(diào)查實驗動物倫理在高校中認知水平，研究實驗動物倫理相關(guān)理論，充分使用實驗動物價值有助于生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展。在動物實驗教學(xué)中融入動物倫理教育，建立相應(yīng)的規(guī)章制度、合理的課程設(shè)置、營造良好的倫理觀氛圍、加強實驗動物倫理審查能夠極大地增強師生及從業(yè)人員的倫理意識，促使大家在實驗過程中落實“3R”原則［減少（Reduction）、優(yōu)化（Refinement）、替代（Replacement）］、充分滿足動物福利、使人們更好地了解生命、敬畏生命［4-5］。

1 現(xiàn)狀調(diào)查

1.1 調(diào)查對象及方法

本研究以我校2017 級五年制本科生、2017 級留學(xué)生（五年制）、2018 級護理學(xué)生（四年制）為主，兼以實驗動物中心從業(yè)人員、教師及科研人員（均具有本科及以上學(xué)歷）。調(diào)查對象分布見圖1。前期通過調(diào)研，在廣泛聽取各方意見和建議后制定了相關(guān)調(diào)查問卷，采用問卷調(diào)查方式并利用微信公眾平臺推送相同內(nèi)容。共發(fā)放調(diào)查問卷2 000 份，回收調(diào)查問卷1 573份，微信公眾平臺收到回復(fù)730 條，合計有效信息2 303條。

圖1 調(diào)查對象分布比例

1.2 調(diào)查內(nèi)容

主要從調(diào)查對象對動物實驗倫理教育、關(guān)于倫理認知和如何對待實驗動物的問答題、實驗人員如何進行動物實驗（包括①實驗操作前的準備、②實驗操作過程中）、實驗結(jié)束后如何對待動物（①如何處死動物、②動物尸體處理）等4 個方面進行相關(guān)調(diào)查和分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，多組比較采用單因素方差分析，資料用例數(shù)和百分數(shù)表示，組間率的比較采用χ2檢驗，以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 動物實驗倫理教育情況

收集到的調(diào)查對象對動物實驗倫理教育一項中的7 個子選項中，實驗動物中心從業(yè)人員、教師及科研人員比較一致，組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。說明這部分調(diào)查對象接受過實驗倫理教育、實驗動物倫理觀淺析明了。2017 級留學(xué)生與2017 級五年制、2018 級護理學(xué)生比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。2018級護理學(xué)生中，對“是否清楚動物保護相關(guān)法律法規(guī)、動物福利及倫理的認知及動物實驗是否需要倫理審批”等選項與2017 級五年制比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。說明有一部分學(xué)生倫理觀滯后或缺失，其中又以2017 級留學(xué)生、2018 級護理學(xué)生較為突出（見圖2）。

圖2 動物實驗倫理教育情況（1 為接受過動物實驗倫理教育和培訓(xùn)；2為認為動物實驗道德；3 為清楚動物保護相關(guān)法律法規(guī)；4為清楚動物福利及倫理的認知；5 為認可有必要開展動物倫理學(xué)教育；6 為感恩動物為人類付出；7為認可動物實驗需要倫理審批）

2.2 關(guān)于倫理認知和如何對待實驗動物的調(diào)查結(jié)果

通過批改調(diào)查對象關(guān)于倫理認知和如何對待實驗動物的相關(guān)問題，除實驗動物中心從業(yè)人員、教師及科研人員獲得較高評分外，學(xué)生不及格（＜60 分）得分占了一定比例。其中2017 級留學(xué)生“除實驗動物在生命科學(xué)中的價值”一項外，其他均與2017 級五年制和2018 級護理比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。說明留學(xué)生對動物實驗倫理的理解和實驗動物對生命科學(xué)的重要性比較模糊（見圖3）。

2.3 調(diào)查對象如何進行動物實驗

除“動物是否麻醉充分”1 項外，2018 級護理與2017 級五年制比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）；提示護理專業(yè)學(xué)生受外界因素的影響較2017 級五年制明顯。2017 級留學(xué)生5 個子項均與2017 級五年制、2018 級護理學(xué)生比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）（見圖4）。

圖3 關(guān)于倫理認知和如何對待實驗動物的調(diào)查（1 為實驗動物在生命科學(xué)中的價值；2 為動物福利指什么；3 為什么是“3R”原則；4為你對倫理教學(xué)教育的體會；5 為談?wù)勀阍谖磥淼目蒲泄ぷ髦袑⑷绾螌Υ龑嶒瀯游铮?/p>

圖4 實驗操作前的準備（1 為不因同情動物而拒絕或逃避實驗；2為預(yù)習(xí)實驗內(nèi)容；3為同情動物痛苦掙扎；4 為不因?qū)嶒灦绊憘€人情緒；5為動物麻醉充分）

2.4 實驗操作過程的調(diào)查結(jié)果

2018 級護理關(guān)于動物大出血后如何處理與2017級五年制比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05），說明護理學(xué)生受外界因素的影響較2017 級五年制明顯。除動物痛苦掙扎你如何處理和是否做與本次實驗無關(guān)的操作兩項外，2017 級留學(xué)生其他選項與2017 級五年制本科生、2018 級護理與2017 級五年制比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）（見圖5）。

圖5 實驗操作過程中的處理方式（1 為動物痛苦掙扎時選擇補充麻醉后再進行實驗；2 為傷害或虐待實驗動物；3 為對操作失誤導(dǎo)致動物額外受傷選擇無所謂；4 為動物大出血后止血并輸液后繼續(xù)實驗；5 為不做與本次實驗無關(guān)的操作）

2.5 調(diào)查對象在實驗結(jié)束后如何對待動物

2017 級留學(xué)生在實驗結(jié)束后如何對待動物的6個選項與2017 級五年制、2018 級護理與2017 級五年制比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。調(diào)查對象就如何處死動物方式中，選擇空氣栓塞占絕對多數(shù)，只有少量學(xué)生選擇過量麻醉安樂死。實驗動物中心從業(yè)人員、教師及科研人員選擇過量麻醉安樂死和空氣栓塞各半（見圖6）。

圖6 處死動物方式（1 為空氣栓塞致死；2 為過量麻醉安樂死；3為頸動脈放血致死；4為頸椎脫臼致死；5 為暴力擊打致死；6為任其自然死亡）

2.6 調(diào)查對象如何處理實驗后的動物或動物尸體

在如何處理實驗動物尸體的調(diào)查中，選擇統(tǒng)一回收占絕對多數(shù)，但學(xué)生選擇縫合創(chuàng)面等待回收和緬懷2 min的比例較低。2017 級留學(xué)生縫合創(chuàng)面等待回收肢解后丟掉緬懷2 min 3 個選項與2017 級五年制、2018級護理與2017 級五年制比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）（見圖7）。

圖7 處理實驗后動物尸體的方式（1 為尸體統(tǒng)一回收；2 為縫合創(chuàng)面等待回收；3為肢解后丟掉；4為緬懷2 min）

3 存在的主要問題和應(yīng)對措施

3.1 醫(yī)學(xué)生實驗動物倫理學(xué)認知方面存在的主要問題和應(yīng)對措施

根據(jù)圖2、3 所示的調(diào)查結(jié)果，說明有一部分學(xué)生倫理觀滯后或缺失，包括“3R”原則、動物福利和動物保護相關(guān)法律法規(guī)均認知不足，其中又以2017 級留學(xué)生、2018 級護理學(xué)生尤為突出，特別是留學(xué)生對動物實驗倫理的理解和實驗動物對生命科學(xué)的重要性相對模糊。鑒于上述調(diào)查結(jié)果，學(xué)校應(yīng)將實驗動物倫理學(xué)設(shè)置為必修內(nèi)容，課時以4 學(xué)時為宜，或在機能實驗學(xué)開展時增加2 學(xué)時用以實驗動物倫理學(xué)教育，引導(dǎo)學(xué)生了解動物保護相關(guān)法律法規(guī)，使學(xué)生知悉動物福利，在實驗中遵守“3R”原則。作為輔助，可在校園網(wǎng)開辟關(guān)于動物倫理知識專門網(wǎng)站，增加相關(guān)講座和文獻，使學(xué)生隨時了解國內(nèi)外動物倫理研究與應(yīng)用現(xiàn)狀，引導(dǎo)學(xué)生在實驗及以后的科研工作中遵守“3R”原則。這有利于學(xué)生增強對生命的尊重，對促進醫(yī)德醫(yī)風(fēng)建設(shè)、推動醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展具有積極意義。還應(yīng)該增設(shè)實驗動物學(xué)并建立適合醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)的實驗教學(xué)體系，使醫(yī)學(xué)生全面了解實驗動物，這有利于醫(yī)學(xué)生認識實驗動物以及其在生命科學(xué)研究中的重要意義。

3.2 實驗操作過程中存在的主要問題和應(yīng)對措施

從圖4、5 可見，2018 級護理與2017 級留學(xué)生易受外界因素的影響占比較2017 級五年制本科生高。2018 級護理均為女生，可能性別更易受外界因素的影響。學(xué)生沒有認真預(yù)習(xí)實驗相關(guān)內(nèi)容，也沒有認真學(xué)習(xí)相關(guān)視頻，可能是操作失誤導(dǎo)致動物額外受傷的主因。另外，學(xué)生實驗動手能力較差、在對動物大出血可能死亡時束手無策，這也間接說明老師在參與學(xué)生實驗時可能存在消極因素。還有學(xué)生在實驗過程中不顧及實驗動物的痛苦、濫用實驗動物、非正規(guī)操作甚至是虐待實驗動物等個別極端行為。針對這些問題，應(yīng)該特別強調(diào)學(xué)生在實驗前認真預(yù)習(xí)實驗相關(guān)內(nèi)容。各實驗室應(yīng)該加強相關(guān)課程的網(wǎng)站建設(shè)，豐富實驗課相關(guān)視頻、錄像及課件，使學(xué)生熟悉實驗操作步驟、注意事項等，達到既控制實驗時間、又減少誤操作、提高學(xué)生對實驗中出現(xiàn)突發(fā)事件的應(yīng)變和處理能力，使實驗教學(xué)達到預(yù)期效果。各實驗室在顯眼位置增設(shè)動物倫理學(xué)相關(guān)內(nèi)容，制定相關(guān)準則、詳細列出被禁止的操作并注明相應(yīng)的處罰措施，彰顯實驗動物在醫(yī)學(xué)實驗福利的重要地位，使動物福利得以落實，這有利于提高醫(yī)學(xué)生對“3R”原則和動物福利認識水平并落實于未來的科研實驗中。動物實驗倫理審查制度在目前還不夠完善，加強動物實驗倫理審查制度建設(shè)，充分發(fā)揮教師對動物實驗倫理意識與規(guī)范的導(dǎo)向作用可提高實驗動物和利用率［6-7］。故還應(yīng)加強倫理委員會職能、對實驗動物從嚴審批以減少動物用量，避免實驗動物無謂的犧牲和浪費實驗經(jīng)費現(xiàn)象。實驗教學(xué)質(zhì)量好壞與人才培養(yǎng)質(zhì)量密切相關(guān)，督導(dǎo)工作則是實驗教學(xué)質(zhì)量監(jiān)控體系的重要組成，實驗督導(dǎo)在實驗教學(xué)質(zhì)量監(jiān)控體系中發(fā)揮著重要作用［8］。故學(xué)校還應(yīng)加強實驗督導(dǎo)、定期或不定期進行實驗督導(dǎo)。另外，還應(yīng)該順應(yīng)科技發(fā)展的大潮，大力推進虛擬仿真實驗這一全新的實驗?zāi)Ｊ?，這可徹底改變實驗動物倫理缺失之現(xiàn)狀，使動物福利最大限度地得以保障，真正實現(xiàn)人類與動物及生態(tài)環(huán)境的協(xié)調(diào)發(fā)展。

3.3 實驗結(jié)束后如何處理動物存在的主要問題和應(yīng)對措施

從圖6 所示分析，調(diào)查對象就如何處死動物方式中，選擇空氣栓塞占絕對數(shù)，只有少量學(xué)生選擇過量麻醉安樂死。實驗動物中心從業(yè)人員、教師及科研人員選擇過量麻醉安樂死和空氣栓塞各半。從倫理角度上講，在動物實驗過程中或結(jié)束后為免除或減輕動物痛苦、節(jié)約動物飼養(yǎng)成本、獲取精確的實驗數(shù)據(jù)等原因而對實驗動物施行安樂死，而過量麻醉為安樂死首選［9-10］。選擇空氣栓塞致死是次要選擇，這可能與大多數(shù)院校醫(yī)學(xué)實驗或?qū)嶒灲虒W(xué)結(jié)束后處死動物方式有關(guān)。圖7 顯示在如何處理實驗動物尸體的調(diào)查中，選擇統(tǒng)一回收占絕大多數(shù)，但學(xué)生選擇縫合創(chuàng)面等待回收和緬懷2 min 的比例較低。其中2017 級留學(xué)生縫合創(chuàng)面等待回收肢解后丟掉選項較其他組多，選擇緬懷2 min較其他組少。從全部調(diào)查結(jié)果來看，留學(xué)生各方面要比我校學(xué)生差，這可能是各地區(qū)的風(fēng)俗習(xí)慣差異所致，他們關(guān)于倫理方面的教育相對較為滯后。鑒于此，建議醫(yī)學(xué)實驗或?qū)嶒灲虒W(xué)結(jié)束后統(tǒng)一選擇過量麻醉“安樂死”，并在實驗結(jié)束后對實驗動物默哀緬懷2 min，紀念為科學(xué)研究而獻身的實驗動物，培養(yǎng)學(xué)生對實驗動物的感激、尊重和緬懷之情。實驗動物統(tǒng)一回收后由有資質(zhì)的專門處理機構(gòu)集中無害化處理，避免可能存在二次生物危害。

4 結(jié)語

實驗動物是支撐生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的重要基礎(chǔ)，也是生命科學(xué)研究的重要手段，是人類健康和發(fā)展做出貢獻的生命體，對于醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展起著極其重要的作用，實驗動物為醫(yī)學(xué)研究做出了巨大的貢獻，但實驗動物福利教育的缺乏導(dǎo)致醫(yī)學(xué)生實驗動物倫理意識淡薄，在實驗中不能正確認識和對待實驗動物的生命，尊重實驗動物、善待實驗動物的意識薄弱［11-12］。在動物實驗教學(xué)中融入動物倫理教育，能夠極大地增強醫(yī)學(xué)教學(xué)效果和學(xué)生的倫理意識，在實驗過程中落實“3R”原則能更好地讓學(xué)生珍惜生命、敬畏生命，可以大幅減少實驗動物的使用量［13-14］。促進動物實驗福利倫理的改善，增強實驗動物福利倫理關(guān)懷有利于更好地開展醫(yī)學(xué)研究以造福人類［15］。通過調(diào)研，發(fā)現(xiàn)了動物實驗在醫(yī)學(xué)實驗和實驗教學(xué)存在的問題并提出相應(yīng)解決辦法。通過這些措施，提高醫(yī)學(xué)實驗人員對實驗動物倫理的認識、滿足動物福利、貫徹“3R”原則、科學(xué)合理地進行動物實驗以提高教學(xué)和科研效率，這更能體現(xiàn)實驗動物為人類作出的貢獻和價值。