姜巍，周劍杰，程寒，宋囡，王垂杰

（1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院消化科，遼寧沈陽 110032；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧沈陽 110847）

功能性消化不良（FD）為一組功能性的胃腸道的癥候群，患者常反復(fù)多次就診，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1]。FD總的患病率為11.5%～14.5%[2-3]。在FD眾多復(fù)雜的發(fā)病機制中，社會心理因素與胃腸動力障礙一直是國內(nèi)外學(xué)者持續(xù)關(guān)注和不斷研究的重要方向。雖然，西醫(yī)促動力劑及抗焦慮、抑郁藥物可以在一定程度上減輕患者的臨床癥狀，但是，也存在不同程度的副作用而影響了臨床應(yīng)用。中醫(yī)藥不僅可以改善患者的臨床癥狀，還可以改善患者焦慮抑郁的狀態(tài)，促進(jìn)胃腸動力，調(diào)節(jié)胃腸道高敏感及腦腸互動，明顯提高了患者的生活質(zhì)量[4]，在FD的治療中發(fā)揮出獨特的優(yōu)勢。我們在前期臨床研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)肝郁可致胃動力下降[4]，且前期實驗研究表明，和胃理氣方可有效改善FD肝郁大鼠抑郁的狀態(tài)，促進(jìn)胃腸動力[5]，但具體機制尚不清楚。因此，本研究擬通過基礎(chǔ)研究揭示肝郁致胃腸動力障礙的作用機制并從分子水平探討和胃理氣方可能的作用靶點，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物SPF級健康Wistar大鼠40只，雌雄各半，體質(zhì)量（200±20）g，購自遼寧中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心。許可證號：SCXK（遼）2015-0001，SYXK（遼）2013-0009。實驗方案經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物倫理委員會批準(zhǔn)備案。動物于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心飼養(yǎng)以備正式實驗使用。

1.2 實驗藥物及制備方法和胃理氣方煎劑由柴胡、枳實、陳皮、厚樸、木香、黨參、白豆蔻、甘草等中藥組成，各中藥材均購自本院中草藥局。按照藥理實驗方法學(xué)中人與動物用藥劑量換算公式，按成人每天用藥等效劑量的4倍濃縮制備成含生藥量0.97 g/mL的煎劑，于4℃密封保存，備用。多潘立酮片（嗎丁啉），由西安楊森制藥有限公司生產(chǎn)，10 mg/片，以蒸餾水稀釋配制成濃度為0.30 mg/mL的混懸液，于4℃密封保存，備用。營養(yǎng)半固體糊制備：250 mL蒸餾水中加入10 g羧甲基纖維素鈉，充分溶解后，逐步加入淀粉8 g、奶粉16 g、糖8 g和2 g活性炭粉末，加蒸餾水?dāng)嚢杈鶆?，制成約300 mL的黑色營養(yǎng)半固體糊。

1.3 主要試劑與儀器干細(xì)胞因子（stem cell factor，SCF）、c-kit兔單克隆抗體，購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；實時PCR試劑盒，購自TaKaRa寶生物工程（大連）有限公司。無蓋曠場箱（自制）；垂直板電泳裝置，美國Bio-Rad公司生產(chǎn)；多色熒光、高性能發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)，美國FluorChem Q公司生產(chǎn)；7500 Real Time PCR儀，美國Applied Biosystems公司生產(chǎn)；Nano 2000型超微量紫外分光光度計，美國Thermo公司生產(chǎn)。

1.4 動物分組與造模根據(jù)Open-field法[6]，按照隨機數(shù)字表將大鼠隨機分為正常組、模型組、中藥組及西藥組等4組，每組10只。常規(guī)喂養(yǎng)1周后，除正常組外，其他3組大鼠均按照文獻(xiàn)[7]夾尾刺激加不規(guī)則喂養(yǎng)復(fù)合法建立FD模型。方法：用包裹有紗布的長尾海綿夾子夾尾刺激大鼠尾后1/3處，間接刺激全籠大鼠，令其發(fā)怒且與其他大鼠相互廝打。每次刺激應(yīng)防止所夾尾部不破皮流血，若有夾傷或抓傷，立即給予0.5%的碘伏涂擦傷口，以避免炎癥干擾，每次持續(xù)時間為45 min，每日2次，夾尾時間固定。同時，對大鼠雙日禁食，單日給予足量飼料，周期14 d。通過觀察大鼠行為學(xué)（包括一般情況、糖水消耗實驗、敞箱實驗）、胃腸動力、胃腸黏膜形態(tài)等方面評價造模是否成功[7]。造模成功后，正常組與模型組給予生理鹽水，中藥組給予和胃理氣方煎劑，西藥組給予嗎丁啉混懸液，均20 mL/kg，每日2次灌胃，持續(xù)14 d。

1.5 取材給藥結(jié)束后，所有大鼠禁食不禁水24 h取材前30 min灌服半固體營養(yǎng)糊，腹腔注射100 g/L水合氯醛溶液（3.5 mL/kg）麻醉，打開腹腔，分離腸胃，進(jìn)行胃排空和小腸推進(jìn)實驗。大鼠處死后取小塊胃竇及十二指腸組織，分別放入40 g/L多聚甲醛溶液（4℃保存）及1.5 mL滅菌的EP管中（-80℃超低溫冰箱保存）。

1.6 觀察指標(biāo)與方法

1.6.1 模型評價指標(biāo) 觀察實驗鼠進(jìn)食量、飲水量、精神情緒及行為等情況；以糖水偏好實驗及敞箱實驗評價抑郁狀態(tài)[8]；胃排空及小腸推進(jìn)實驗測定胃腸動力[9]。

1.6.2 療效評價指標(biāo)

1.6.2.1 免疫組織化學(xué)法 取胃竇、小腸組織進(jìn)行脫水、石蠟包埋、切片，脫蠟和水化，抗原修復(fù)，消除內(nèi)源性過氧化物酶活性，封閉，一抗孵育，二抗孵育，顯色，復(fù)染、脫水、透明和封片。每組取10張切片，隨機選擇10個不同視野，運用Image-Pro Plus 6.0軟件對c-kit、SCF的表達(dá)進(jìn)行累計光密度分析，求平均光密度值。

1.6.2.2 蛋白免疫印跡法 取胃竇、小腸黏膜組織，提取蛋白，將制備的蛋白樣品通過制膠、上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、染色、一抗孵育、二抗孵育，顯色后，應(yīng)用全自動熒光與可見光凝膠成像分析系統(tǒng)曝光。以β-actin作為內(nèi)參，運用分析軟件對蛋白灰度值進(jìn)行檢測，以目的蛋白與內(nèi)參蛋白灰度值的比值作為該目的蛋白的相對表達(dá)量。

1.6.2.3 實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法 取胃竇、小腸黏膜組織，提取mRNA，逆轉(zhuǎn)錄。c-kit上游引物序列為5’-GCATTTAAAGGTAACAGCAA AGAGC-3’，下游引物序列為5’-GGAAGCTGCGT TGGGTCTAT-3’，擴增長度212 bp；SCF上游引物序列為5’-GACCTCGTGGCATGTATGGA-3’，下游引物序列為5’-TTCCTAAGGGAACTGGCTGC-3’，擴增長度257 bp；GAPDH（內(nèi)參）上游引物序列為5’-GCGAGATCCCGCTAACATCA-3’，下游引物序列為5’-CTCGTGGTTCACACCCATCA-3’，擴增長度178 bp。進(jìn)行實時熒光定量擴增，反應(yīng)條件：①95℃，2 min；②95℃，30 s；60℃，30 s（此時收集熒光），25μL體系（40個循環(huán)）。運用2-△△Ct法計算c-kit mRNA、SCF mRNA的相對表達(dá)量，△△Ct值=（待測目的基因Ct值-待測內(nèi)參Ct值）-（對照目的基因Ct值-對照內(nèi)參Ct值），檢測結(jié)果求取平均值。

1.7 統(tǒng)計方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。若滿足正態(tài)分布，多組比較采用單因素方差分析，否則采用秩和檢驗。進(jìn)一步兩兩比較，方差齊用LSD法；方差不齊則用Dunnett’sT3法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠一般狀態(tài)正常組大鼠飲水量、進(jìn)食量正常，精神狀態(tài)良好，反應(yīng)靈敏，皮毛光亮順滑，鼻頭眼角無分泌物，糞便成形，干稀適中。模型組大鼠進(jìn)食量與飲水量下降，精神緊張、易激惹，懶動，時常蜷臥，毛發(fā)晦暗枯黃、臟亂打結(jié)，眼角分泌物增多，大便溏且臭穢。治療后，中藥組和西藥組大鼠飲水量、進(jìn)食量增多，易激惹等精神狀態(tài)較前改善，行為較前活躍，皮毛枯黃及臟亂改善，大便逐漸成形。

2.2 糖水偏好實驗結(jié)果圖1結(jié)果顯示：于造模第14天，模型組大鼠糖水偏好率明顯降低，與正常組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。治療后，中藥組和西藥組糖水偏好率均較模型組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；但2個治療組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

圖1 各組大鼠糖水偏好率比較（±s）Figure 1 Comparion of the saccharose consumption rate between various groups of rats（±s）

2.3 敞箱實驗結(jié)果圖2～3結(jié)果顯示：于造模第14天，模型組大鼠敞箱實驗水平運動得分、垂直運動得分降低，與正常組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。治療后，中藥組和西藥組敞箱實驗水平運動得分、垂直運動得分較模型組升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；但2個治療組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

圖2 各組敞箱實驗水平運動得分比較（±s）Figure 2 Comparion of the horizontal movement scores in open-field test between various groups（±s）

圖3 各組敞箱實驗垂直運動得分比較（±s）Figure 3 Comparion of the verticalmovement scores in open-field test between various groups（±s）

2.4 胃排空及小腸推進(jìn)實驗結(jié)果圖4結(jié)果顯示：于造模第14天，模型組大鼠胃內(nèi)色素殘留率增加，小腸推進(jìn)率下降，與正常組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。治療后，中藥組和西藥組胃內(nèi)色素色素殘留率減小，小腸推進(jìn)率增加，與模型組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；但2個治療組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

圖4 各組大鼠胃內(nèi)色素殘留率、小腸推進(jìn)率比較（±s）Figure 4 Comparion of the percentage of residual pigment in stomach and rate of propulsion in small intestine between various groups of rats（±s）

2.5 胃竇、小腸組織中c-kit、SCF的表達(dá)

2.5.1 免疫組織化學(xué)實驗結(jié)果 表1、表2、圖5結(jié)果顯示：與正常組比較，模型組大鼠胃竇、小腸組織c-kit、SCF陽性細(xì)胞光密度值明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，中藥組、西藥組大鼠胃竇、小腸組織c-kit、SCF陽性細(xì)胞光密度值明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；但2個治療組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

圖5 各組大鼠胃竇、小腸組織中c-kit、SCF陽性表達(dá)細(xì)胞分布（免疫組織化學(xué)法，×20）Figure 5 Comparison of the distribution of c-kit and SCF positively expressive cells in rat antrum and smallintestinal tissue between various groups（by immunohistochemicalmethod，×20）

表1 各組大鼠胃竇組織c-kit、SCF陽性細(xì)胞光密度值比較Table 1 Comparison of the opticaldensity values of c-kit and SCF positively expressive cells in rat antrum mucosa between various groups（±s）

表1 各組大鼠胃竇組織c-kit、SCF陽性細(xì)胞光密度值比較Table 1 Comparison of the opticaldensity values of c-kit and SCF positively expressive cells in rat antrum mucosa between various groups（±s）

①P＜0.05，與正常組比較；②P＜0.05，與模型組比較

組別正常組模型組中藥組西藥組鼠數(shù)（只）10 10 10 10 c-kit陽性細(xì)胞光密度值0.328 9±0.059 7 0.238 0±0.059 4①0.321 5±0.053 8②0.298 0±0.048 2②SCF陽性細(xì)胞光密度值0.322 3±0.049 6 0.181 3±0.058 8①0.275 3±0.050 1②0.252 8±0.058 3②

表2 各組大鼠小腸組織c-kit、SCF陽性細(xì)胞光密度值比較Table 2 Comparison of the opticaldensity values of c-kit and SCF positively expressive cells in rat small intestinalmucosa between various groups （±s）

表2 各組大鼠小腸組織c-kit、SCF陽性細(xì)胞光密度值比較Table 2 Comparison of the opticaldensity values of c-kit and SCF positively expressive cells in rat small intestinalmucosa between various groups （±s）

①P＜0.05，與正常組比較；②P＜0.05，與模型組比較

組別正常組模型組中藥組西藥組鼠數(shù)（只）10 10 10 10 c-kit陽性細(xì)胞光密度值0.347 7±0.051 7 0.270 5±0.053 5①0.326 8±0.065 3②0.325 7±0.061 7②SCF陽性細(xì)胞光密度值0.302 6±0.047 3 0.260 2±0.064 9①0.286 8±0.061 5②0.286 1±0.076 0②

2.5.2 蛋白免疫印跡實驗結(jié)果 表3、圖6結(jié)果顯示：與正常組比較，模型組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit、SCF蛋白表達(dá)水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，中藥組和西藥組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit、SCF蛋白表達(dá)水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；但2個治療組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表3 各組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit、SCF蛋白表達(dá)水平比較Table 3 Comparion of the protein expression levels of c-kit and SCF in antrum and small intestinalmucosa between various groups （±s）

表3 各組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit、SCF蛋白表達(dá)水平比較Table 3 Comparion of the protein expression levels of c-kit and SCF in antrum and small intestinalmucosa between various groups （±s）

①P＜0.05，與正常組比較；②P＜0.05，與模型組比較

組別正常組模型組中藥組西藥組鼠數(shù)（只）10 10 10 10胃竇組織c-kit蛋白相對表達(dá)量0.956±0.018 0.634±0.030①0.938±0.192②0.854±0.082②SCF蛋白相對表達(dá)量0.789±0.139 0.407±0.030①0.757±0.040②0.588±0.113②小腸黏膜組織c-kit蛋白相對表達(dá)量0.768±0.178 0.388±0.076①0.669±0.156②0.647±0.131②SCF蛋白相對表達(dá)量0.656±0.051 0.173±0.066①0.480±0.024②0.399±0.150②

圖6 各組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit、SCF的免疫蛋白印跡電泳條帶Figure 6 Comparion of the western blotting strips of c-kit and SCF proteins in antrum and small intestinalmucosa between various groups

2.5.3 RT-PCR結(jié)果 表4結(jié)果顯示：與正常組比較，模型組大鼠胃竇、小腸黏膜組織c-kit mRNA、SCF mRNA表達(dá)水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，中藥組和西藥組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit mRNA、SCF mRNA表達(dá)水平明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；但2個治療組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表4 各組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit、SCF的mRNA表達(dá)水平比較Table 4 Comparion of the mRNA expression levels of c-kit and SCF in rat antrum and small intestinal mucosa between various groups （±s）

表4 各組大鼠胃竇、小腸黏膜組織中c-kit、SCF的mRNA表達(dá)水平比較Table 4 Comparion of the mRNA expression levels of c-kit and SCF in rat antrum and small intestinal mucosa between various groups （±s）

①P＜0.05，與正常組比較；②P＜0.05，與模型組比較

組別正常組模型組中藥組西藥組鼠數(shù)（只）10 10 10 10胃竇組織c-kit mRNA相對表達(dá)量1.000±0.000 0.492±0.012①0.832±0.095②0.681±0.078②SCF mRNA相對表達(dá)量1.000±0.000 0.421±0.038①0.785±0.052②0.585±0.023②小腸黏膜組織c-kit mRNA相對表達(dá)量1.000±0.000 0.320±0.078①0.806±0.152②0.582±0.061②SCF mRNA相對表達(dá)量1.000±0.000 0.495±0.028①0.783±0.110②0.677±0.017②

3 討論

功能性消化不良（FD）屬臨床常見的功能性胃腸病范疇，發(fā)病機制復(fù)雜，易反復(fù)發(fā)作，可影響患者生活質(zhì)量，造成嚴(yán)重的心理負(fù)擔(dān)。目前，胃腸動力障礙仍然是FD的主要病理生理基礎(chǔ)[4]，促動力藥物雖可改善上腹脹等部分癥狀，但長期應(yīng)用可產(chǎn)生諸多不良反應(yīng)，且因存在停藥后復(fù)發(fā)等問題限制了其在臨床的使用。隨著醫(yī)學(xué)模式的轉(zhuǎn)變，精神心理因素在FD發(fā)病中的作用受到越來越多學(xué)者的關(guān)注，已成為消化界研究的熱點問題之一。研究[10]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)D伴焦慮、抑郁狀態(tài)檢出率為37.2%、39.7%，而且焦慮、抑郁評分越高，胃腸道癥狀評分也越高。我們在前期研究也發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)D患者焦慮、抑郁發(fā)生率可達(dá)75%、63.3%，且消化不良的癥狀程度與焦慮、抑郁分?jǐn)?shù)成明顯正相關(guān)[11]。臨床上應(yīng)用抗焦慮和抗抑郁藥物確實對部分FD患者有明顯療效[12]，但長期應(yīng)用存在不同程度的副作用，導(dǎo)致患者依從性較差，影響療效。

精神心理活動與中醫(yī)“肝”的疏泄功能密不可分，“郁怒傷肝”“肝失疏泄”，可影響脾胃的氣機升降，從而出現(xiàn)消化不良的癥狀及抑郁、焦慮狀態(tài)。臨床研究發(fā)現(xiàn)氣郁質(zhì)是FD患者最常見的中醫(yī)體質(zhì)類型[13]，肝胃不和證為主要證型[14]，在FD肝胃不和證患者中抑郁者可占47.5%[15]，可見肝郁與FD關(guān)系十分密切[16]。夾尾刺激造模方法為傳統(tǒng)制備肝郁型FD的病證結(jié)合動物模型，這個模型是從中醫(yī)“怒傷肝”理論角度出發(fā)的，雖在一定程度上反映了FD的肝郁型病因特點，但在FD的發(fā)病過程中略顯片面。故本研究采用夾尾刺激加不規(guī)則喂養(yǎng)復(fù)合因素法建立FD模型，可更真實地反映FD的自然發(fā)病過程，而且引入了評價抑郁模型的敞箱、糖水偏好實驗，充分體現(xiàn)了“肝郁”型FD的病因特點。本研究應(yīng)用此造模方法，結(jié)果顯示：模型組大鼠進(jìn)食量與飲水量明顯下降，易激惹，毛發(fā)晦暗枯黃、臟亂打結(jié)，眼角分泌物增多，大便溏且臭穢，糖水消耗率下降，敞箱實驗水平及垂直運動得分下降，胃排空及小腸推進(jìn)減慢，胃腸解剖肉眼未見明顯潰瘍及其他器質(zhì)性病變，符合“肝郁”致FD的發(fā)病過程。

我們前期研究[17]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)D肝郁模型大鼠胃腸道Cajal間質(zhì)細(xì)胞（ICC）數(shù)量減少，形態(tài)結(jié)構(gòu)紊亂，最終導(dǎo)致胃腸運動信號的起搏及傳導(dǎo)發(fā)生異常，影響了胃腸運功。ICC是胃腸道運動的起搏細(xì)胞，ICC的數(shù)量以及形態(tài)結(jié)構(gòu)的異常直接影響胃腸道動力；而c-kit基因正是胃腸道ICC的特異性標(biāo)志物，其與SCF結(jié)合后，迅速磷酸化以激活下游一系列信號分子，調(diào)節(jié)ICC發(fā)育、存活與增殖，同時在維持ICC表型和生理功能方面有非常重要的作用。因此，從SCF/c-kit信號通路開展對功能性胃腸運動障礙性疾病的研究已成為一個嶄新的方向[18]。本研究結(jié)果顯示：與正常組比較，肝郁FD模型大鼠胃腸動力明顯減慢，胃竇及小腸黏膜組織中c-kit、SCF陽性表達(dá)細(xì)胞光密度值降低，c-kit、SCF蛋白與mRNA表達(dá)水平均下降（P＜0.05），說明“肝郁”可能通過影響SCF/c-Kit信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)而影響胃腸運動。

中藥可通過多靶點地協(xié)同作用治療FD，療效更加多元化，且不良反應(yīng)較少，與單純應(yīng)用西藥相比具有一定的優(yōu)勢[19]。我們前期臨床研究[20]顯示，和胃理氣方可顯著改善FD肝胃不和證患者的中醫(yī)癥狀積分，療效優(yōu)于嗎丁啉。本研究結(jié)果顯示：和胃理氣方可明顯加快FD大鼠胃排空及小腸推進(jìn)，與嗎丁啉作用相當(dāng)。還可增加大鼠糖水消耗率，敞箱實驗水平、垂直運動得分，升高胃竇、小腸組織中c-kit、SCF陽性表達(dá)細(xì)胞光密度值，增加c-kit、SCF蛋白與mRNA表達(dá)水平。表明和胃理氣方可通過上調(diào)FD大鼠胃竇、小腸組織SCF/c-Kit信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)，從而促進(jìn)胃腸動力，同時還可以改善大鼠抑郁狀態(tài)。本方中以柴胡等為主的調(diào)氣藥占75%，可見調(diào)氣在FD治療中的重要地位，同時，配伍黨參、甘草，在于調(diào)補脾胃之氣。方中半數(shù)以上中藥歸脾、胃經(jīng)，著重調(diào)理脾胃之氣機，而柴胡為肝經(jīng)引經(jīng)藥，亦為君藥，主要調(diào)節(jié)脾胃氣機的升降。肝氣調(diào)達(dá)，情志舒暢，脾胃升降有常，才能維持正常的消化系統(tǒng)功能。

綜上所述，肝郁可致胃腸動力下降，和胃理氣方可通過調(diào)控FD大鼠胃竇、小腸黏膜組織SCF/c-Kit信號通路調(diào)節(jié)胃腸動力，改善抑郁狀態(tài)。下一步研究可進(jìn)一步通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法挖掘其藥靶和疾病靶基因之間的關(guān)系，并進(jìn)行實驗驗證，以期從腦腸互動角度探討和胃理氣方的作用機制。