李寶霞，董雙濤，張春泓，馬 鄭*

（1.山西藥科職業(yè)學(xué)院，太原 030031；2.大連市藥品檢驗所，遼寧大連 116021）

國家評價性抽驗是藥品主管部門為掌握全國藥品的質(zhì)量水平而進(jìn)行的抽查檢驗工作〔1〕，國產(chǎn)藥品依法定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗；然后以問題為導(dǎo)向，開展針對性的探索性研究。

鹽酸奧洛他定（C21H23NO3·HCl）為治療過敏性鼻炎、結(jié)膜炎的抗過敏藥，也可用于治療銀屑病的瘙癢〔2-4〕，其不良反應(yīng)輕微〔5〕。我國鹽酸奧洛他定口服制劑分為片劑和膠囊劑，且均是仿制藥。為全面系統(tǒng)地評價仿制藥的質(zhì)量優(yōu)劣，我們對國產(chǎn)鹽酸奧洛他定口服制劑進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，首先依照法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗，然后基于風(fēng)險控制的理念開展了詳實的探索性研究〔6〕，全面系統(tǒng)地對鹽酸奧洛他定口服制劑進(jìn)行質(zhì)量評價。

1 制劑的概況

鹽酸奧洛他定為新型選擇性組胺受體阻斷劑。本品口服后，消除半衰期為8～12 h。該藥60%～70%經(jīng)腎臟以原形形式消除，17%以糞便排出。不良反應(yīng)以頭痛、困倦較為常見。

本次抽驗涉及鹽酸奧洛他定片、鹽酸奧洛他定膠囊、鹽酸奧洛他定滴眼液3 個劑型，收集到114 批次樣品（本文只介紹口服制劑），分別來自26 個省區(qū)、直轄市。片劑和膠囊劑的內(nèi)包裝均為鋁塑板，外包裝均為紙盒，規(guī)格均為5 mg。涉及生產(chǎn)企業(yè)為某國外制藥企業(yè)（片劑，原研制劑生產(chǎn)商）、某制藥有限公司（片劑）、某制藥有限公司（膠囊劑）。

2 法定檢驗結(jié)果及質(zhì)量分析

2.1 法定檢驗結(jié)果依法定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗。本部分內(nèi)容主要考察質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的合理性、科學(xué)性、可操作性，對數(shù)據(jù)進(jìn)行對比，對法定檢驗中發(fā)現(xiàn)的問題進(jìn)行剖析，并開展針對性的探索性研究。

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)涉及的檢查項目有性狀、鑒別（分別為化學(xué)鑒別、紫外鑒別、液相色譜鑒別）、含量均勻度、溶出度、有關(guān)物質(zhì)及含量。所有樣品的檢驗結(jié)果均合格，提示樣品均能達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的各項要求。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)各檢查項目齊全，檢查方法具備可操作性，符合我國藥典規(guī)定的技術(shù)要求〔7〕。存在的問題：膠囊劑的溶出度檢查法采用小杯法（其他兩個質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均采用槳法），該法是我國特有的檢查法，隨著我國加入人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會（ICH）并與國際制藥行業(yè)發(fā)展不斷融合，建議修改為槳法，與原研制劑一致。其次，膠囊劑有關(guān)物質(zhì)檢查法未控制特定雜質(zhì)，且有關(guān)物質(zhì)的限度過寬，應(yīng)對質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行提升。

2.2 質(zhì)量分析法定檢驗結(jié)果雖然均合格，但從均勻度、含量、溶出度等多項統(tǒng)計結(jié)果來看，原研制劑數(shù)據(jù)的離散性明顯小于國產(chǎn)制劑。以溶出度結(jié)果為例，測定結(jié)果的統(tǒng)計結(jié)果見圖1。由圖1 可知，本品溶出完全，在15 min 時，片劑已完全溶出（近100%）說明進(jìn)口制劑的工藝水平優(yōu)于國產(chǎn)制劑。從有關(guān)物質(zhì)的數(shù)據(jù)來看，國產(chǎn)片劑的雜質(zhì)水平優(yōu)于或與原研制劑相當(dāng)。膠囊劑的雜質(zhì)水平明顯偏大，提示存在一定安全性風(fēng)險。

圖1 溶出度檢查頻數(shù)分布圖

3 探索性研究

本研究以風(fēng)險控制的理念，結(jié)合法定檢驗中發(fā)現(xiàn)的問題，從藥品的安全性、有效性以及標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)、合理性三個方面，對貫穿于藥物全生命周期中可能存在的高風(fēng)險因素展開與原研制劑的對比研究，以期最大程度保障人民群眾用藥安全。

3.1 安全性評價安全性評價基于與原研制劑的對比研究并考察了貫穿于藥品整個生命周期的高風(fēng)險因素。在風(fēng)險因素的設(shè)置上，重點考慮到我國國情及監(jiān)管方向，同時關(guān)注美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）、歐洲藥品管理局（EMA）近年來重點警示的內(nèi)容。

3.1.1 基因毒性雜質(zhì)的研究 基因毒性雜質(zhì)本身能直接或間接損傷細(xì)胞DNA，產(chǎn)生基因突變或體內(nèi)誘變，具有致癌可能或者傾向。由于毒性強(qiáng)烈，應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格控制〔8〕。近期，業(yè)內(nèi)爆出“纈沙坦”事件，其原料中存在基因毒性雜質(zhì)N-亞硝基二甲胺。

本品從合成工藝的理論上分析，也可能存在該基因毒性雜質(zhì)。因此，開展了可能存在的基因毒性雜質(zhì)的研究。據(jù)文獻(xiàn)〔9〕報道，N-亞硝基二甲胺可采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）法，以特征離子m∕z74，選擇m∕z15、42、43作為限定離子，進(jìn)行定量分析。

氣相色譜：色譜柱：SH-RXI-5sil（30 m × 0.25 mm×0.25 μm），甲基（5%苯基）聚硅氧烷為固定相；程序升溫，初始溫度為150 ℃，保持5 min，再以40 ℃∕min 升至220 ℃，保持15 min。進(jìn)樣口280 ℃，流速1.0 mL∕min，電離方式EI，溶劑延遲5 min，分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μL。

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源，電離能力70 eV，離子源溫度250 ℃，四級桿溫度150 ℃。

測定法：分別取國產(chǎn)片劑，加N，N-二甲基甲酰胺（DMF）制成濃度為1 mg∕mL的溶液。

結(jié)果：原料中未發(fā)現(xiàn)該基因毒性雜質(zhì)。

結(jié)論：本品國產(chǎn)片劑原料未發(fā)現(xiàn)N-亞硝基二甲胺。通過工藝、結(jié)構(gòu)分析，本品工藝及產(chǎn)品中不存在其他警示性結(jié)構(gòu)基團(tuán)。原料未發(fā)現(xiàn)安全性風(fēng)險。

3.1.2 有關(guān)物質(zhì)研究 依據(jù)法定檢驗，國產(chǎn)制劑有關(guān)物質(zhì)檢查方法存在諸多不足：雜質(zhì)控制不嚴(yán)、定量方法不先進(jìn)。在探索性研究中，以問題為導(dǎo)向，開展針對性的探索性研究，建立了新的有關(guān)物質(zhì)檢查方法，同時測定制劑（片劑、膠囊劑）中4種已知雜質(zhì)的含量。在擬定條件下，有關(guān)物質(zhì)色譜圖見圖2，在此條件下分離出更多的雜質(zhì)，并實現(xiàn)了4 種已知雜質(zhì)的控制。

圖2 擬定條件下膠囊劑有關(guān)物質(zhì)色譜圖

對比研究數(shù)據(jù)結(jié)果見表1。由表1可知，國產(chǎn)片劑質(zhì)量較好，與原研制劑雜質(zhì)譜一致；國產(chǎn)膠囊劑的雜質(zhì)水平相對較高。

表1 對比研究結(jié)果

3.2 有效性評價有效性評價研究內(nèi)容見表2。經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研本品為BCS1類或3類的藥物。在現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，溶出度檢查法是以水為介質(zhì)，并規(guī)定在15 min 內(nèi)釋放85%以上。通過進(jìn)一步研究，本品片劑以水為介質(zhì)，槳法50 轉(zhuǎn)的條件下迅速崩解，基本在5 min 內(nèi)可釋放85%以上。膠囊劑在小杯法中的釋放稍慢，但是在15 min 內(nèi)也可達(dá)到80%的溶出量。依據(jù)FDA〔10〕發(fā)布的相關(guān)指導(dǎo)原則，本品可視為速釋制劑，溶出不為本藥物吸收的“限速步驟”。因此，本研究將溶出度檢查項視為中低風(fēng)險因素。但是為更好反應(yīng)制劑廠家工藝水平，我們開展了3 種條件下溶出曲線的對比研究，發(fā)現(xiàn)基本一致。由于膠囊劑檢查法為小杯法，我們又開展了與槳法的對比研究，發(fā)現(xiàn)槳法同樣適合本品溶出度檢查，因此建議更改為槳法，即與原研制劑溶出方法一致。對于本類藥物，晶型與粒度均為低風(fēng)險因素。對于晶型，經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研，未檢索到晶型與藥效之間的報道。

3.3 標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)、合理性

3.3.1 原料藥標(biāo)準(zhǔn) 在項目的設(shè)置上，我國鹽酸奧洛他定原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與國外藥典標(biāo)準(zhǔn)基本一致。在限度的設(shè)立上，我國標(biāo)準(zhǔn)與國外標(biāo)準(zhǔn)主要差別在重金屬和有關(guān)物質(zhì)項。重金屬檢查項，國外藥典如《美國藥典》〔11〕限度均為10 ppm，嚴(yán)于我國20 ppm的限度。對于口服片劑品種，20 ppm 的限度符合我國現(xiàn)階段對口服制劑的技術(shù)要求?；陲L(fēng)險控制的理念，從安全性、劑型、給藥途徑等綜合考慮，我們認(rèn)為基本合理〔12〕。

表2 有效性評價研究內(nèi)容

3.3.2 制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 我國制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的缺陷有：

（1）片劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：單個雜質(zhì)限度較寬；定量方法采用主成分自身對照法。其次，含量測定項下檢測波長設(shè)置不合理。

（2）膠囊劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：單個雜質(zhì)限度較寬，未控制特定雜質(zhì)；溶出度方法為小杯法。含量測定方法采用四氫呋喃、離子對試劑等多種試劑，繁瑣復(fù)雜，耐用性差。檢測波長混亂，如含量測定采用206 nm（流動相為四氫呋喃含離子對試劑），溶出度采用300 nm（介質(zhì)為水），有關(guān)物質(zhì)采用245 nm，而主藥及雜質(zhì)的最大吸收波長均在270～299 nm處。

4 結(jié)論

本研究開展了鹽酸奧洛他定口服制劑國家評價性抽驗。按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗，該品種合格率為100.0%。基于風(fēng)險控制的理念開展探索性研究，內(nèi)容包括基因毒性雜質(zhì)研究，有關(guān)物質(zhì)研究、晶型和粒度的調(diào)研等。經(jīng)詳實的研究，結(jié)果表明我國片劑總體質(zhì)量較好，膠囊劑質(zhì)量需進(jìn)一步提高，并建議廠家提升原料和制劑的有關(guān)物質(zhì)控制方法，修改膠囊劑的溶出度檢查法。