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        采用免疫透射比濁法對疑似肝腎疾病患者進行血清視黃醇結(jié)合蛋白檢測的意義

        2021-03-17 07:02:30劉志偉陳書恩吳小花
        當(dāng)代醫(yī)藥論叢 2021年3期
        關(guān)鍵詞:透射比濁法對象

        劉志偉,陳書恩★,吳小花

        (1.深圳市羅湖醫(yī)院集團醫(yī)學(xué)檢驗中心,廣東 深圳 518021;2. 深圳市羅湖區(qū)婦幼保健院檢驗科,廣東 深圳 518021)

        臨床上常見的肝腎疾病有肝炎、肝硬化、肝癌、腎小球腎炎、糖尿病腎病、腎功能衰竭等。有研究資料顯示,采用免疫透射比濁法對疑似肝腎疾病患者進行血清RBP 檢測診斷其病情的準(zhǔn)確率較高[1]。在本次研究中,筆者主要探討采用免疫透射比濁法對疑似肝腎疾病患者進行RBP 檢測的意義。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        本次研究對象是2019 年7 月至11 月期間某醫(yī)院收治的50 例肝病患者、50 例腎病患者及在該院進行體檢的50例健康人。將50 例肝病患者設(shè)為A 組。將50 例腎病患者設(shè)為B 組。將50 例健康人設(shè)為C 組。在A 組研究對象中,男女的比例為30:20 ;其年齡為27 ~81 歲,平均年齡為(54.15±6.23)歲;其中有25 例急性肝炎患者,有17 例肝硬化患者,有8 例肝癌患者。在B 組研究對象中,男女的比例是27:23 ;其年齡為27 ~80 歲,平均年齡為(53.84±6.20)歲;其中有24 例腎小球腎炎患者,有16 例糖尿病腎病患者,有10 例腎功能衰竭患者。在C 組研究對象中,男女的比例為28:22 ;其年齡為25 ~81 歲,平均年齡為(53.58±6.19)歲。三組研究對象的一般資料相比,P >0.05,具有可比性。

        1.2 方法

        1)采用免疫透射比濁法對三組研究對象進行血清RBP檢測,方法為:檢測使用的儀器為全自動生化檢測儀。在清晨采集研究對象的空腹靜脈血4 ml 作為樣本。將研究對象的靜脈血進行離心后獲取4 μl 的血清。在血清樣本中添加240 μl 的試劑A1(由廠家提供),然后放置在37℃的環(huán)境下進行孵育,連續(xù)孵育16 個循環(huán),并讀出第一點吸光值B1。然后,在血清樣本中添加50 μl 的試劑A2(由廠家提供),在37℃的環(huán)境下進行孵育,連續(xù)孵育16 個循環(huán),并讀出第二點吸光值B2。待測血清的吸光值B=B2-B1。血清RBP 的水平= 〔(B2-B1)/ 校準(zhǔn)品吸光值〕 ×RBP 校準(zhǔn)濃度。2)進行空白試驗的方法為:將濃度為0.9% 的生理鹽水作為樣本,按照上述檢測方法連續(xù)檢測三次,并計算樣本的吸光值。3)進行精密度試驗的方法為:根據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)規(guī)定,分別取低、中、高三個濃度的血清樣本,按照上述檢測方法重復(fù)檢測20 次,連續(xù)檢測20 d。4)進行回收試驗的方法為:獲取新鮮血清一份,分別添加三個不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品(由廠家提供),然后按照上述測定方法對標(biāo)準(zhǔn)樣品進行測定。5)進行穩(wěn)定性試驗的方法為:在第0 d、第5 d、第10 d、第20 d、第30 d,對各項參數(shù)均相同的樣本進行RBP 測定。檢測時,分別在2 ~8℃開瓶放置樣本,在2 ~8℃閉瓶放置樣本,在37℃熱破壞樣本的穩(wěn)定性(在第一次校準(zhǔn)儀器后對樣本進行檢測,檢測時不再進行儀器校準(zhǔn),直至檢測失控)。每天檢測結(jié)束后,及時為樣本擰緊瓶蓋,將樣本密封保存。6)進行干擾性試驗的方法為:選取濃度已知的樣本,加入三種不同濃度的膽紅素、三酰甘油、血紅蛋白,然后對樣本進行檢測,觀察檢測的結(jié)果是否受到干擾。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

        對本次研究中的數(shù)據(jù)均采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進行處理,計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(± s )表示,采用t 檢驗,計數(shù)資料用百分比(%)表示,采用χ2檢驗。以P <0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 三組研究對象血清RBP 的水平

        B 組研究對象血清RBP 的水平高于C 組研究對象,C組研究對象血清RBP 的水平高于A 組研究對象,P <0.05。詳見表1。

        表1 三組研究對象血清RBP 的水平(mg/L,± s )

        表1 三組研究對象血清RBP 的水平(mg/L,± s )

        C 組 50 50.11±12.79 A 組 50 21.91±9.72急性肝炎患者 25 25.76±9.21肝硬化患者 17 20.17±9.08肝癌患者 8 19.81±10.87 B 組 50 90.58±19.44腎小球腎炎患者 24 88.67±19.54糖尿病腎病患者 16 94.78±20.13腎功能衰竭患者 10 88.28±18.65

        2.2 進行精密度試驗的結(jié)果

        進行精密度試驗的結(jié)果顯示,不同濃度血清樣本的精密度相比,P <0.05。詳見表2。

        表2 進行精密度試驗的結(jié)果

        2.3 進行回收試驗的結(jié)果

        進行回收試驗的結(jié)果顯示,三個不同濃度樣本的回收濃度及回收率相比,P <0.05。詳見表3。

        表3 進行回收試驗的結(jié)果

        2.4 進行穩(wěn)定性試驗的結(jié)果

        進行穩(wěn)定性試驗的結(jié)果顯示,本次研究使用的試劑具有較好的穩(wěn)定性。詳見表4。

        表4 進行穩(wěn)定性試驗的結(jié)果

        2.5 進行干擾試驗的結(jié)果

        進行干擾試驗的結(jié)果顯示,對樣本進行血清RBP 檢測時,樣本中的血紅蛋白≤4 g/L、三酰甘油≤10 mmol/L 及膽紅素≤420 μmol/L 對檢測結(jié)果無干擾。

        3 討論

        血清RBP 是維生素A 的轉(zhuǎn)運蛋白。血清RBP 可與甲狀腺素結(jié)合前白蛋白形成復(fù)合物[2-3]。健康人體內(nèi)多余的RBP 可被腎臟代謝。但腎病患者體內(nèi)多余的RBP 則不能被腎臟代謝完全。因此,血清RBP 的水平是評估腎病患者病情的重要指標(biāo)之一[4]。有研究資料顯示,肝病患者血清RBP 的水平可出現(xiàn)下降。因此,血清RBP 的水平可作為評估肝病患者病情的指標(biāo)之一。目前,臨床檢測血清RBP的方法包括免疫透射比濁法、放射免疫分析法、酶聯(lián)免疫法、免疫電泳等[5]。其中免疫透射比濁法是臨床上檢測血清RBP 的主要方法。采用免疫透射比濁法測定樣本時通過測定樣本的濁度與一系列標(biāo)準(zhǔn)品進行對照,即可計算出樣本中抗原的含量[6]。有研究資料顯示,采用免疫透射比濁法測定血清RBP 具有操作簡單、安全性高、對檢測設(shè)備的要求比較低、環(huán)保、檢測結(jié)果比較準(zhǔn)確等優(yōu)點[7]。但有研究指出,采用免疫透射比濁法檢測血清RBP 時對抗體的純度及特異性有較高的要求[8]。

        本次研究的結(jié)果證實,采用免疫透射比濁法對肝腎疾病患者進行血清RBP 檢測可準(zhǔn)確診斷其病情。

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