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        生物免疫療法聯(lián)合放療對小細(xì)胞肺癌患者腫瘤標(biāo)志物及T淋巴細(xì)胞亞群水平的影響

        2021-03-17 12:39:22李龍鄭振東劉渤娜高霄麗蘆洪波
        疑難病雜志 2021年3期
        關(guān)鍵詞:亞群淋巴細(xì)胞療法

        李龍,鄭振東,劉渤娜,高霄麗,蘆洪波

        小細(xì)胞肺癌是特殊類型肺癌,占所有肺癌類型20%左右,其病情發(fā)展速度快且易發(fā)生轉(zhuǎn)移。臨床上治療小細(xì)胞肺癌方法以手術(shù)、放療及化療為主[1-2]?;瘜W(xué)治療及放射治療受小細(xì)胞肺癌獨(dú)特生物學(xué)行為影響,近期治療效果較好,但容易復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移,且由于患者過度接受放化療使其機(jī)體免疫能力下降,加速死亡[3]。近年來,生物免疫療法越來越多應(yīng)用于臨床治療,通過提取患者血清單核細(xì)胞,經(jīng)相關(guān)技術(shù)進(jìn)行體外培養(yǎng),獲得具有識別和殺滅腫瘤功能的細(xì)胞,通過靜脈注射進(jìn)行回輸,達(dá)到更好的治療效果,同時還可激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫反應(yīng),對腫瘤復(fù)發(fā)可以進(jìn)行有效免疫監(jiān)控[4-6]?,F(xiàn)觀察生物免疫療法聯(lián)合放療對SCLC患者的治療效果及對T淋巴細(xì)胞亞群的影響,報道如下。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 選取2018年12月—2019年12月北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院腫瘤科治療小細(xì)胞肺癌患者62例,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為放療組、聯(lián)合治療組(聯(lián)合組),每組31例。放療組男17例,女14例,年齡44~57(50.5±5.2)歲;病程2~8 (5.1±2.5)個月;TNM分期:Ⅰ~Ⅱ期7例,Ⅲ期12例,Ⅳ期12例。聯(lián)合組男13例,女18例,年齡47~63(55.0±6.4)歲;病程3~8 (5.5±2.1)個月;TNM分期:Ⅰ~Ⅱ期5例,Ⅲ期14例,Ⅳ期12例。2組患者性別、年齡、病程、分期比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn),患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。

        1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)影像學(xué)、細(xì)胞學(xué)檢查確診為小細(xì)胞肺癌患者,且首次接受治療。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):①病例資料不全患者;②患有先天性疾??;③精神疾病患者;④合并心腦血管、肝腎等原發(fā)性疾病。

        1.3 治療方法 放療組:放射前對患者采用CMS治療計劃系統(tǒng)進(jìn)行CT定位,以Varian2100C/D直線加速器6MV-X射線對肺部原發(fā)病灶、肺門及縱隔采用胸部照射野,劑量DT=40 Gy/20次,每次2 Gy,1次/d,1周5次;4周后局部加量,追加DT 10~30 Gy 1~3周,總量DT為50~70 Gy。鎖骨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移照射6周,DT=60 Gy。聯(lián)合組:在放療組治療基礎(chǔ)上聯(lián)合生物免疫療法,放療結(jié)束后,對患者采用多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)生物免疫法。采取靜脈血50 ml,分離單核細(xì)胞,0.9%氯化鈉洗滌3次。使用RPMI1640培養(yǎng)基密度調(diào)節(jié)為2×106/ml,于第1天加入2 000 U/ml重組干擾素,常溫環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)。第2天加入濃度為1 000 U/ml白介素2及5μg/ml抗CD3單抗。每3天更換營養(yǎng)液,補(bǔ)充白介素,測定單個核細(xì)胞。用自體血清培養(yǎng)皿培養(yǎng)后,收集CIK,洗滌后加入5%人白蛋白、白介素2。靜脈滴注定容250 ml氯化鈉溶液,每次回輸細(xì)胞109個,每次間隔1 d,3次為1個療程?;剌斍熬M(jìn)行無菌檢測,達(dá)標(biāo)后回輸。

        1.4 治療效果評價標(biāo)準(zhǔn)[7]CR:腫瘤組織完全消失;PR:腫瘤直徑縮小50%;SD:腫瘤組織得到一定的縮減但沒有達(dá)到部分緩解的程度,或有一定的增加且增加不明顯;PD:腫瘤組織增長25%或出現(xiàn)新腫瘤組織??傆行?(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

        1.5 觀察指標(biāo)與方法

        1.5.1 血清細(xì)胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)水平測定:采用免疫透射比濁法檢測,治療前后抽取患者空腹肘靜脈血6 ml,離心分離上層血清,-70℃環(huán)境中保存待檢。標(biāo)記3個試管為空白管、測定管和標(biāo)準(zhǔn)管,分別加入蒸餾水、血清、 LIF標(biāo)準(zhǔn)液各25 μl,均加入緩沖液350 μl并搖晃均勻,常溫下靜置5~10 min,隨后使用SR-722型分光光度計(上海舍巖儀器有限公司生產(chǎn))對其進(jìn)行比色,在500 nm波長處以空白管凋零為準(zhǔn),記錄吸光度,計算血清CYFRA21-1、CEA水平[8]。

        1.5.2 血清VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3水平檢測: 治療前后分別抽取患者清晨空腹肘靜脈血4 ml,采用酶聯(lián)免疫吸附法對VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3水平進(jìn)行檢測。

        1.5.3 T淋巴細(xì)胞亞群水平檢測:對待測標(biāo)本做抗凝處理,分為2管,分別加入CD8+、CD4+、CD3+單克隆抗體20 μl,室溫環(huán)境下孵育30 min后在各管中加入溶血劑,待其完全溶血后進(jìn)行離心處理, 棄上清液,使用洗滌液對其進(jìn)行洗滌后在各管中加入固定劑150 μl,使用0.5 ml PBS混合均勻制備為懸液,使用流式細(xì)胞儀檢測T細(xì)胞亞群CD4+、CD25+水平。

        1.5.4 不良反應(yīng)發(fā)生情況:對治療過程中出現(xiàn)的白細(xì)胞減少、食管炎、骨髓抑制等不良反應(yīng)進(jìn)行統(tǒng)計比較。

        2 結(jié) 果

        2.1 2組治療效果比較 聯(lián)合組患者治療總有效率為80.65%,高于放療組的54.84%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

        表1 2組患者治療效果比較 [例(%)]

        2.2 2組治療前后血清CYFRA21-1、CEA水平比較 治療前2組血清CYFRA21-1、CEA水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);療程結(jié)束后,2組血清CYFRA21-1、CEA水平均降低,且聯(lián)合組低于放療組(P<0.01),見表2。

        表2 2組患者治療前后血清CYFRA21-1、CEA水平比較

        2.3 2組治療后血清VEGFR水平比較 治療前,2組血清VEGFR水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);療程結(jié)束后,2組血清VEGFR水平均降低,且聯(lián)合組低于放療組(P<0.01),見表3。

        表3 2組患者治療前后血清VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3水平比較

        2.4 2組治療前后血清T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 治療前,2組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);療程結(jié)束后,2組CD4+水平升高,CD8+水平降低,且聯(lián)合組升高/降低較放療組更明顯(P<0.01),見表4。

        表4 2組患者治療前后血清CD4+、CD8+水平比較

        2.5 2組不良反應(yīng)發(fā)生率比較 放療組患者不良反應(yīng)率為35.48%,高于聯(lián)合組的12.90%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.039,P=0.037),見表5。

        表5 2組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 [例(%)]

        3 討 論

        小細(xì)胞肺癌是一種起源于支氣管黏膜或腺體的一種惡性腫瘤,小細(xì)胞肺癌的胞質(zhì)具有神經(jīng)分泌顆粒,其能夠分泌激肽、組胺等物質(zhì)。支氣管鏡下的小細(xì)胞肺癌浸潤生長最為明顯,病變侵及范圍廣,與正常組織之間的邊界極其模糊,導(dǎo)致支氣管表面腫脹,有時可見血性分泌物[9-10]。小細(xì)胞癌的增長速度極快,該病的發(fā)病病因和發(fā)病機(jī)制目前還沒有明確,目前研究表明,與空氣污染、吸煙、飲食和遺傳基因有關(guān)[11]。生物免疫療法由患者靜脈采集外周血,經(jīng)過體外分離后培養(yǎng),獲得更加有效和特異性抗腫瘤殺傷細(xì)胞,在實驗室進(jìn)行培養(yǎng)后,分次進(jìn)行回輸,有效殺死腫瘤情況下,保證機(jī)體免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)及功能不受損傷,提高機(jī)體免疫能力。生物免疫療法是近幾年來發(fā)現(xiàn)的一種治療腫瘤的方法,其可以控制腫瘤細(xì)胞,增強(qiáng)患者的免疫功能[12-14]。

        相關(guān)資料顯示,作為腫瘤標(biāo)志物的CYFRA21-1在小細(xì)胞肺癌患者血清中表達(dá)出現(xiàn)異常,其水平變化與小細(xì)胞肺癌分期及腫瘤組織大小等具有密切聯(lián)系,具有重要診斷價值。CYFRA21-1異常表達(dá)與小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后密切相關(guān),對CYFRA21-1水平檢測能夠有效對患者治療效果進(jìn)行評價。CEA屬于光譜血清腫瘤標(biāo)志物,是具有抗原特性的糖蛋白,腫瘤組織的發(fā)生發(fā)展與其水平表達(dá)關(guān)系密切。CEA進(jìn)入血液導(dǎo)致其血清濃度增加,最終導(dǎo)致機(jī)體臟器中細(xì)胞發(fā)生癌變,對CEA水平進(jìn)行檢查可以輔助對小細(xì)胞肺癌的診斷[15]。本研究結(jié)果顯示,通過生物免疫療法聯(lián)合放療對SCLC患者進(jìn)行治療,可有效調(diào)控腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1、CEA水平,對診斷及預(yù)后具有重要作用。

        VEGF是一種具有高度生物活性的二聚體陽離子糖蛋白,特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞,有效提升機(jī)體血管通透性、促進(jìn)血管形成。VEGF作為促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長的重要因子對腫瘤細(xì)胞增殖具有重要作用,因此對VEGF進(jìn)行檢測可以有效直觀的對治療效果進(jìn)行評價。VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3屬于VEGF受體,對癌組織新生血管形成具有重要影響,與癌細(xì)胞的生長具有密切聯(lián)系[16-17]。本研究結(jié)果顯示,通過生物免疫療法聯(lián)合放療對SCLC患者進(jìn)行治療,血清VEGFR水平降低,對癌組織的發(fā)生發(fā)展具有明顯抑制作用。

        T細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中扮演重要角色,臨床與研究證明,小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展會對機(jī)體免疫功能造成損傷[18]。CD4+是T細(xì)胞輔助細(xì)胞,對體液免疫和細(xì)胞免疫功能具有明顯輔助效果。作為細(xì)胞毒T細(xì)胞或T抑制細(xì)胞,CD8+主要作用包括抑制細(xì)胞毒作用及免疫作用。相關(guān)研究資料顯示,通過治療對小細(xì)胞肺癌患者T淋巴細(xì)胞亞群水平進(jìn)行調(diào)控,能夠有效提高免疫功能[19]。本研究結(jié)果顯示,通過生物免疫療法聯(lián)合放療對SCLC患者進(jìn)行治療,能夠有效調(diào)控T淋巴細(xì)胞亞群水平,達(dá)到改善免疫功能的治療效果。

        綜上所述,通過生物免疫療法聯(lián)合放療對SCLC患者進(jìn)行治療,可有效調(diào)控腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1、CEA水平,提高自身機(jī)體免疫能力,有效抑制癌組織及癌組織細(xì)胞新生血管的生長,治療效果顯著,對小細(xì)胞肺癌的診斷及預(yù)后具有一定參考價值。

        利益沖突:所有作者聲明無利益沖突

        作者貢獻(xiàn)聲明

        李龍:設(shè)計研究方案,實施研究過程,論文撰寫;鄭振東:提出研究思路,分析試驗數(shù)據(jù),論文審核;劉渤娜:實施研究過程,資料搜集整理,論文修改;高霄麗:進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析;蘆洪波:課題設(shè)計,論文撰寫

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