劉源源

(遼陽市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，遼寧 遼陽 111000)

癲癇是多種原因?qū)е碌哪X部神經(jīng)元高度同步化異常放電形成的臨床綜合征，臨床表現(xiàn)具有發(fā)作性、短暫性、重復(fù)性和刻板性的特征[1-2]。近年研究[3]顯示患者血清中神經(jīng)細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)異常，如腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor，BDNF)低表達(dá)與癲癇患者的發(fā)作密切相關(guān)。同時學(xué)者發(fā)現(xiàn)了多種調(diào)控BDNF的因子，如miR-134-5p[4]。我們在數(shù)據(jù)庫中出檢索到miR-134-5p與BDNF之間具有可能的結(jié)合位點。目前藥物控制是治療癲癇的重要方法，傳統(tǒng)用藥為丙戊酸鈉，其作用是參與調(diào)解神經(jīng)遞質(zhì)的釋放和囊泡循環(huán)，維持突觸囊泡的正常功能。左乙拉西坦是新型治療癲癇藥物，屬于第二代廣譜性藥物，吸收迅速，對肝酶活性無抑制作用。本研究觀察左乙拉西坦對成人癲癇患者的治療作用，并探討其對患者血清中BDNF和miR-134-5p的影響，以期為臨床治療提供幫助。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2019年7月至2020年12月在我院就診并診斷為癲癇的成人患者126例作為研究對象。按患者入院的先后順序進行編號，單號為觀察組，雙號為對照組，均為63例。觀察組男性32例，女性31例；年齡16～78歲，平均(38.6±18.1)歲。對照組男性34例，女性29例；年齡18～79歲，平均(37.6±15.5)歲。兩組患者在一般資料比較中均未顯現(xiàn)出統(tǒng)計學(xué)差異(均P>0.05)。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①結(jié)合病史、腦電圖及影像學(xué)，并符合2010年ILAE癲癇診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)；②患者年齡≥16歲，近2周內(nèi)未服用抗癲癇藥物；③發(fā)作頻率≥0.5次/月。排除標(biāo)準(zhǔn)：①藥物難治性癲癇；②有酒精或藥物成癮史；③哺乳期婦女；④神經(jīng)系統(tǒng)有明顯器質(zhì)性病變；⑤有精神疾病史。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者和(或)家屬知情同意簽定知情同意書。

1.2 治療方法 觀察組口服左乙拉西坦片(批號：H20110409)，起始劑量500～1000 mg/d，如癥狀得不到控制，每周增加500 mg/d，最大劑量3000 mg/d。對照組口服丙戊酸鈉緩釋片(批號：H19991395)，起始劑量400～600 mg/d，如癥狀得不到控制，每周增加200 mg/d，最大劑量1800 mg/d。治療后1、3、6、9、12個月定期門診復(fù)診。

1.3 血清BDNF和miR-134-5p表達(dá)水平檢測 治療12個月后檢測患者血清中BDNF和miR-134-5p的相對表達(dá)水平。抽取靜脈血3 ml，2000 r/min離心15 min分離血清，置于冰箱中-80 ℃凍存待檢。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測BDNF。應(yīng)用羅氏Roche LightCycler480 PCR儀，采用實時熒光定量PCR檢測miR-134-5p。首先應(yīng)用TRIzol提取總RNA。引物由北京博奧森生物技術(shù)有限公司合成。miR-134-5p引物上游為5’-TCTGTGGACGTGGACGTG-3’，下游為5’-CTAGGATCGACGTGGTGTTT-3’。以U6為內(nèi)參，引物上游為5’-GGCAGAAAGATTAGC-3’，下游為5’-TTGGAACGCAAATTCCG-3’。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。反應(yīng)體系：95 ℃ 5 min，95 ℃ 25 s，64 ℃ 20 s，72 ℃ 20 s，95 ℃ 25 s，62 ℃ 35 s，72 ℃ 20 s，共31個循環(huán)后延伸，于62 ℃采集信號，讀取Ct值，以2-△△Ct法計算結(jié)果?！鳌鰿t=[Ct目的基因(未知樣品)-Ct對照(未知樣品)]-[Ct目的基因(校正樣品)-Ct對照(校正樣品)]。

1.4 療效評價 控制：治療期間癲癇完全未發(fā)作。顯效：癲癇發(fā)作頻率減少≥75%。有效：發(fā)作頻率減少≥50%，但<75%。無效：發(fā)作頻率減少<50%，或癥狀加重。總有效率=(控制+顯效+有效)例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.5 焦慮、抑郁評分 采用問卷調(diào)查的方式進行焦慮、抑郁評定。應(yīng)用焦慮自評量表(SAS)調(diào)查患者的焦慮水平，應(yīng)用抑郁自評量表(SDS)調(diào)查患者的抑郁水平，分?jǐn)?shù)為20～80分，分?jǐn)?shù)越高表示癥狀越重。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者療效比較 見表1。觀察組共60例患者完成12個月的治療及觀察(1例退出，1例因治療效果不理想改變治療方案，1例因意外死亡，此3例排除觀察)。對照組共61例患者完成12個月的治療及觀察(2例因治療效果不理想改變治療方案，此2例排除觀察)。兩組患者治療總有效率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.2868，P=0.5923)。

表1 兩組患者療效比較[例(%)]

2.2 兩組不同分型患者療效比較 見表2。兩組中局灶性發(fā)作患者、全面性發(fā)作患者治療12個月時的總有效率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.3898、0.0109，P=0.5324、0.9167)。

表2 兩組不同分型患者療效比較[例(%)]

2.3 兩組患者治療后SAS、SDS評分比較 見表3。觀察組治療12個月時 SAS、SDS評分均明顯低于對照組(均P<0.05)。

表3 兩組患者治療后SAS、SDS評分比較(分)

2.4 兩組患者治療后血清BDNF和miR-134-5p表達(dá)水平比較 見表4。觀察組治療12個月時血清BDNF表達(dá)水平明顯高于對照組，miR-134-5p表達(dá)水平明顯低于對照組(均P<0.05)。

表4 兩組患者治療后血清BDNF和miR-134-5p表達(dá)水平比較

2.5 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 見表5。觀察組患者出現(xiàn)的不良反應(yīng)有心煩、易激惹、頭暈；對照組患者出現(xiàn)的不良反應(yīng)有心煩、易激惹、乏力、體重增加及肝功能障礙，但是均較輕微，未進行干預(yù)便自行緩解，亦未影響治療及觀察。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，兩組患者不良反應(yīng)總發(fā)生率比較無統(tǒng)計學(xué)差異(χ2=0.0836，P>0.05)。

表5 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較[例(%)]

3 討 論

癲癇是多種原因引起的腦部神經(jīng)元高度同步化異常放電形成的臨床綜合征，致殘率及致死率均高于普通人群[5-6]。近年隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)多種神經(jīng)功能相關(guān)指標(biāo)在癲癇患者中異常表達(dá)。BDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子，具有調(diào)控神經(jīng)細(xì)胞代謝及保護受損傷神經(jīng)功能的作用。其作為大腦和外周系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)生長因子、神經(jīng)因子家族的一員，通過調(diào)節(jié)突觸、記憶過程在邊緣系統(tǒng)中起作用，特別在突觸可塑性的腦多巴胺能和膽堿能神經(jīng)元、5-羥色胺能神經(jīng)元扮演重要角色。近年BDNF相關(guān)研究較多，其在一些疾病如腦炎、膠質(zhì)瘤及癲癇時病變組織和血清中的表達(dá)均下調(diào)[7]。同時，人們也發(fā)現(xiàn)多種對BDNF表達(dá)具有調(diào)控作用的因子，如miR-134-5p、S-100B等。近年研究[8]也證實了miR-134-5p高表達(dá)是神經(jīng)損傷及癲癇形成相關(guān)的重要因子之一。傳統(tǒng)的抗癲癇藥物中丙戊酸鈉應(yīng)用最為廣泛，但是長期應(yīng)用副作用較大，且具有肝酶誘導(dǎo)作用，血漿蛋白結(jié)合率高。左乙拉西坦在提高藥效及減少副作用方面具有一定的優(yōu)勢[9-10]，已有多項研究[11-12]顯示左乙拉西坦對治療癲癇部分性發(fā)作和全面性發(fā)作具有良好的效果。

本研究觀察左乙拉西坦對成人癲癇的治療效果，結(jié)果顯示其總有效率與丙戊酸鈉相當(dāng)，且在局灶性發(fā)作患者和全面性發(fā)作患者的治療效果中無統(tǒng)計學(xué)差異，提示左乙拉西坦具有很好的臨床效果，適合臨床應(yīng)用[13]。本研究還發(fā)現(xiàn)左乙拉西坦在治療過程中少數(shù)患者有心煩、易激惹、頭暈的表現(xiàn)，由于癥狀輕微，未影響治療，且發(fā)病率低，亦提示臨床治療是安全的。本研究中，左乙拉西坦治療后患者的焦慮、抑郁評分均明顯低于丙戊酸鈉治療組，提示左乙拉西坦在治療過程中可能對改善患者的負(fù)性情緒有一定價值，其機制有待進一步研究明確。另外，左乙拉西坦治療后患者血清中BDNF的表達(dá)水平明顯高于對照組，miR-134-5p的表達(dá)明顯低于對照組，提示左乙拉西坦在治療過程中可以改善BDNF的表達(dá)水平，同時能優(yōu)化神經(jīng)因子的損傷及修復(fù)[14-16]。BDNF表達(dá)的增加對維持突觸的可塑性有重要作用[17-18]。miR-134-5p是BDNF等多種神經(jīng)相關(guān)因子的上游調(diào)控因子，在正常機體中微量表達(dá)，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞損傷時表達(dá)增加。有研究[4]通過實驗誘導(dǎo)了大鼠海馬神經(jīng)元中miR-134高表達(dá)，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)樹突棘的強度發(fā)生改變，影響了神經(jīng)樹突的功能。本研究觀察到左乙拉西坦能降低miR-134-5p的表達(dá)水平，改善神經(jīng)細(xì)胞樹突的強度，維持神經(jīng)元的正常極化狀態(tài)，但是基于miR-134-5p的調(diào)控機制及干預(yù)途徑有待更多基礎(chǔ)研究證實。

綜上所述，左乙拉西坦對成人癲癇有較好的治療效果，與丙戊酸鈉有類似的作用。左乙拉西坦還能改善患者負(fù)性情緒，有效優(yōu)化血清中BDNF和miR-134-5p的表達(dá)水平，臨床中可以積極應(yīng)用。