許杰妤，王廣成

(1.成都彩虹電器(集團(tuán))股份有限公司，四川 成都 610045；2.四川省農(nóng)藥檢定所，四川 成都 610041)

1 前言

吡蟲啉(Imidacloprid)是一種硝基亞甲基類內(nèi)吸殺蟲劑，屬氯化煙酰類殺蟲劑，又稱為新煙堿類殺蟲劑，化學(xué)式為C9H10ClN5O2，具有廣譜、高效、低毒、低殘留優(yōu)點(diǎn)，并有觸殺、胃毒和內(nèi)吸等多重作用[1]。害蟲接觸藥劑后，中樞神經(jīng)正常傳導(dǎo)受阻，使其麻痹死亡。產(chǎn)品速效性好，藥后1d即有較高的防效，殘留期長(zhǎng)達(dá)25d左右。藥效和溫度呈正相關(guān)，溫度高，殺蟲效果好。主要用于防治刺吸式口器害蟲。吡蟲啉殺蟑餌劑是以吡蟲啉原藥為有效成分，添加引誘劑及適宜助劑配制而成的防治蜚蠊的衛(wèi)生殺蟲劑，其施用方式為投放。目前對(duì)蟑螂的防治有氣霧劑觸殺，殺蟑煙片熏殺等，餌劑在使用過(guò)程中不會(huì)產(chǎn)生氣味，煙霧，對(duì)環(huán)境更友好，并且能與上述殺蟑方式共同存在，綜合治理[2-4]。

市場(chǎng)上流通的殺蟑餌劑有效成分主要為吡蟲啉、氟蟲腈。吡蟲啉殺蟑餌劑最早由拜耳公司引進(jìn)中國(guó)，在中國(guó)已持續(xù)銷售十幾年，目前尚未查得蟑螂對(duì)吡蟲啉的相關(guān)抗性情況報(bào)道。氟蟲腈現(xiàn)在屬于限制使用農(nóng)藥，吡蟲啉與之相比在安全性上更具有優(yōu)勢(shì)。

本文為研究吡蟲啉殺蟑餌劑生產(chǎn)控制過(guò)程中對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的控制，建立了高效液相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定殺蟑餌劑中吡蟲啉含量。吡蟲啉含量的檢測(cè)方法一般為液相色譜外標(biāo)法，本文采用的液相色譜內(nèi)標(biāo)法較之液相色譜外標(biāo)法，測(cè)試結(jié)果更精準(zhǔn)，能更好的對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

2 試驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑 水(新蒸二次蒸餾水)；溶劑：乙腈(分析純)；吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品(已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%)；對(duì)氯苯酚(分析純)。

高效液相色譜儀，具有紫外波長(zhǎng)可變檢測(cè)器(Aglient 1260)；色譜柱：250mm×4.6mm不銹鋼柱，C18、5μm；微量注射器：10μL。

2.2 方法提要 試樣用乙腈溶解，用對(duì)氯苯酚為內(nèi)標(biāo)，以乙腈和水作流動(dòng)相，使用以O(shè)DS-C18為填料的色譜柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，用內(nèi)標(biāo)法對(duì)試樣中的吡蟲啉進(jìn)行分離和測(cè)定。

2.3 氣相色譜操作條件 柱溫：(30±2)℃，流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm；進(jìn)樣量：10μL。

吡蟲啉標(biāo)樣和吡蟲啉殺蟑餌劑樣品液相色譜圖(圖1-2)。

1-吡蟲啉; 2-對(duì)氯苯酚圖1 吡蟲啉標(biāo)樣和內(nèi)標(biāo)對(duì)氯苯酚高效液相色譜圖

1-吡蟲啉; 2-對(duì)氯苯酚圖2 吡蟲啉殺蟑餌劑和內(nèi)標(biāo)對(duì)氯苯酚高效液相色譜圖

2.4 測(cè)定步驟

2.4.1 內(nèi)標(biāo)溶液配制 稱取對(duì)氯苯酚約0.6g(精確到0.000 2g)置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解，并稀釋到刻度、混勻。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制 稱取吡蟲啉標(biāo)樣約0.05g(精確到0.000 2g)的試樣，置于50mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入內(nèi)標(biāo)溶液5.0mL，用乙腈溶解，并稀釋至刻度、搖勻。

2.4.3 試樣溶液的配制 稱取吡蟲啉殺蟑餌劑約2.3g(精確到0.000 2g)的試樣，置于錐形瓶中，準(zhǔn)確加入內(nèi)標(biāo)溶液5.0mL，乙腈45.0mL溶解，超聲波振蕩，搖勻后用0.45μm濾膜過(guò)濾，待用。

2.4.4 測(cè)定 在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)數(shù)針注入標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針吡蟲啉峰面積相對(duì)變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4.5 計(jì)算 將測(cè)得的2針試樣溶液及試樣前后2針標(biāo)準(zhǔn)溶液中吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比，分別進(jìn)行平均。產(chǎn)品中吡蟲啉的含量x1(%)按式(1)進(jìn)行計(jì)算：

(1)

式中：x1-殺蟑餌劑中吡蟲啉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)；r1-標(biāo)樣溶液中吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值平均值；r2-試樣溶液中吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值平均值；m1-標(biāo)樣溶液中標(biāo)樣質(zhì)量，g；m2-樣品溶液中樣品質(zhì)量，g；p-標(biāo)樣純度，%。

3 試驗(yàn)結(jié)果與討論

3.1 分析方法的特異性 采用HPLC-DAD對(duì)吡蟲啉、對(duì)氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品在210～400nm進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果(圖3)。吡蟲啉在269nm波長(zhǎng)有較強(qiáng)的吸收，對(duì)氯苯酚的最大吸收波長(zhǎng)225nm，2種物質(zhì)吸收曲線的交點(diǎn)為220nm。在220nm左右，吡蟲啉和對(duì)氯苯酚均有較好的吸收，而且雜質(zhì)吸收較小，主峰和雜質(zhì)峰分離效果較好，故確定220nm為吡蟲啉分析方法的檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn) 在一定質(zhì)量范圍內(nèi)，按照濃度遞增的順序配制數(shù)個(gè)吡蟲啉標(biāo)樣樣品。以吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比為橫坐標(biāo)，吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。上述操作條件下，當(dāng)吡蟲啉/內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比在0.975 8～2.460 6之間，與相應(yīng)的吡蟲啉/內(nèi)標(biāo)物峰面積比有良好的線性關(guān)系，計(jì)算得回歸方程為y=0.438x+0.011，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.999 8。

圖3 吡蟲啉與對(duì)氯苯酚的紫外吸收光譜圖

表1 吡蟲啉線性關(guān)系實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

3.3 分析方法的精密度試驗(yàn) 對(duì)同一樣品中的吡蟲啉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行5次平行測(cè)定，并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)偏差及變異系數(shù)的統(tǒng)計(jì)運(yùn)算。同時(shí)運(yùn)用修改的Horwitz公式作為精密度是否合格的判定依據(jù)(表2)。可知，本分析方法的變異系數(shù)

表2 吡蟲啉方法精密度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

3.4 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn) 為驗(yàn)證本方法的系統(tǒng)誤差，對(duì)方法的精確度進(jìn)行了試驗(yàn)，取經(jīng)分析已知有效成分準(zhǔn)確含量的樣品，加入已知含量吡蟲啉標(biāo)樣，測(cè)定吡蟲啉的回收率，其結(jié)果(表3)。對(duì)吡蟲啉的添加回收率在99.28%～100.88%之間，因此本方法可以滿足對(duì)產(chǎn)品中吡蟲啉的分離測(cè)定。

表3 吡蟲啉準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

4 結(jié)論

綜上所述，本試驗(yàn)建立了高效液相色譜法檢測(cè)吡蟲啉殺蟑餌劑中的吡蟲啉含量分析方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，采用本方法測(cè)定吡蟲啉含量具有較高的線性響應(yīng)，較高的準(zhǔn)確度和精密度。本方法具有操作簡(jiǎn)單、高效的特點(diǎn)，是企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量控制較為理想的分析檢測(cè)方法，提高了檢測(cè)效率。