邢 昕，許金鵬，王愛華

安徽中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗中心輸血科，安徽合肥 230000

輸血前血型鑒定試驗常規(guī)要求ABO定型必須同時做正定型和反定型，正、反定型不一致時，常提示標本為疑難血型[1]。對于ABO正、反定型不一致的疑難血型標本，醫(yī)院輸血科或血庫工作人員常常是求助于試劑充足、設備完善及經(jīng)驗豐富的血站血型參比實驗室，但日常工作中，輸血科工作人員可以結合臨床資料，尤其是臨床檢驗結果，對正、反定型不一致的原因做出合理的解釋，根據(jù)檢驗異常指標有針對性地處理標本干擾，從而正確判定血型?，F(xiàn)將3例疑難血型鑒定過程報道如下。

1 臨床資料

患者1：女，49歲，在無明顯誘因下出現(xiàn)雙下肢水腫，就診于當?shù)卦\所，查尿常規(guī)顯示尿蛋白2+。后水腫進行性加重，伴活動后胸悶、乏力及肉眼血尿，就診于本院，查血常規(guī)血紅蛋白(Hb)41 g/L，無既往病史。為糾正貧血，送檢血型，結果顯示，正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集為AB型Rh(D)陽性，反定型A1細胞、B細胞全凝集為O型，不規(guī)則抗體篩檢陽性。

患者2：男，52歲，反復上腹部脹痛7個月余，于外院檢查結果顯示，肝功能異常，高尿酸血癥及蛋白尿，全腹部CT示雙側胸腔積液。對癥處理后未見明顯好轉，遂就診于本院，查體見貧血貌，雙下肢水腫；查血常規(guī)顯示Hb 51 g/L，無既往病史。為糾正貧血，送檢血型，結果：正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集為AB型Rh(D)陽性，反定型A1細胞、B細胞全凝集為O型，不規(guī)則抗體篩檢陰性。

患者3：男，79歲，2年前因“胸悶20 d，發(fā)熱1 d”在外院確診惡性淋巴瘤，定期化療復查。4 d前出現(xiàn)胸悶氣喘，咳嗽咳痰及低熱，就診于本院，查血常規(guī)顯示Hb 55g/L，既往有輸血史。為糾正貧血，送檢血型，結果顯示，正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集為AB型Rh(D)陽性，反定型A1細胞、B細胞全凝集為O型，不規(guī)則抗體篩檢陰性。

2 結 果

2.1正反定型結果不一致 3份患者標本試管法血型血清學結果均為：正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集為AB型Rh(D)陽性，反定型A1細胞、B細胞全凝集為O型，見表1。

2.2結合臨床異常指標最終血型鑒定結果

2.2.1患者1血型鑒定結果 患者1生化和免疫自身抗體檢測結果見圖1，直接抗人球蛋白(GLO)試驗(DAT)陽性，56 ℃熱放散處理，鹽水試管法血型鑒定為O型Rh(D)陽性，見表2。

表1 3份標本血型鑒定及不規(guī)則抗體鑒定結果

圖1 患者1生化和免疫自身抗體檢測結果

表2 患者1處理前、后試管法血型鑒定結果

2.2.2患者2血型鑒定結果 患者2生化檢測結果見圖2，GLO明顯增高，清蛋白/球蛋白(A/G)比例倒置，鹽水稀釋法后，血型鑒定為AB型Rh(D)陽性，見表3。

圖2 患者2生化檢驗結果

2.2.3患者3血型鑒定結果 患者3血常規(guī)檢測結果見圖3，平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)異常增高，37 ℃水浴后血型鑒定為B型Rh(D)陽性，見表4。

圖3 患者3血常規(guī)檢驗結果

表3 患者2處理前、后試管法血型鑒定結果

表4 患者3處理前、后試管法血型鑒定結果

3 討 論

疑難血型[1]是一種血型難以鑒定或判定的現(xiàn)象，在鑒定血型時，標本如果受多種因素干擾使結果難以判定，便呈現(xiàn)疑難血型現(xiàn)象。醫(yī)院輸血科或血庫在遇到正、反定型不一致的疑難血型時，解決辦法多為送檢血液中心的血型參比實驗室，造成工作人員缺乏思考和實驗能力。在蘭炯采等[2]提出的“疑難血型3步分析法”中，其中第2步為復習臨床信息，從而設計針對性試驗(第3步)，作為掌握第一手臨床資料的輸血科或血庫，亦可以根據(jù)實驗室異常檢驗結果，分析標本本身的特殊性，進而解釋正、反定型不一致的原因，并正確鑒定血型。

本文中3例患者的正、反定型不一致標本均為正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集為AB型Rh(D)陽性，反定型A1細胞、B細胞全凝集為O型，查閱臨床相關實驗結果，3例標本影響因素各不相同，采用不同的試驗方法處理后，血型結果也完全不同。

患者1因“雙下肢水腫原因待查”入院，DAT抗-IgG強陽性，不規(guī)則抗體陽性，乳酸脫氫酶(LDH)和間接膽紅素(IBIL)水平升高，查閱自身抗體檢測結果：免疫熒光法均質(zhì)型滴度1∶1 000，抗干燥綜合征A抗體(抗SSA)，抗核糖體P蛋白抗體(抗RPP)陽性等，自身抗體陽性伴DAT陽性的疾病多見于自身免疫性疾病[3-4]，其中DAT是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要依據(jù)[5]；正定型全凝集，反定型O細胞不凝集，考慮為自身抗體被吸附在自身紅細胞上干擾正定型，需通過放散試驗來處理紅細胞[6]。56 ℃熱放散處理10 min后，正、反定型一致，鏡下無凝集，血型鑒定為O型Rh(D)陽性?；颊?因“上腹部脹痛”入院，DAT和不規(guī)則抗體都為陰性，反定型A1細胞、B細胞和O細胞都有凝集，鏡下觀察可見紅細胞緡錢狀排列，查閱生化結果可見GLO明顯增高，A/G比例倒置，考慮該病例血型正、反定型不符應該是患者血清中球蛋白水平異常增高，引起反定型紅細胞在鹽水介質(zhì)中相互粘連而呈現(xiàn)緡錢狀凝集，使用鹽水稀釋法處理反定型后[7-8]，正、反定型一致，血型鑒定為AB型Rh(D)陽性。第3例患者惡性淋巴瘤確診2年余，血常規(guī)原始結果可見MCHC異常增高，紅細胞計數(shù)、Hb、平均紅細胞血紅蛋白含量和MCHC明顯矛盾[9]，觀察血液標本試管壁呈細沙狀，首先考慮到的是冷凝集素的影響，冷凝集素是一種冷反應型抗紅細胞抗體，多為IgM 抗體，健康人血清中水平和效價均低，在某些病理情況下如淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤、病毒感染、支原體肺炎和傳染性單核細胞增多癥等[10]，患者體內(nèi)的冷凝集素效價會增高；低效價冷凝集放置37 ℃可排除干擾，高效價冷凝集正定型用溫鹽水反復洗滌自身細胞，反定型用O型紅細胞反復吸收自身抗體，以消除干擾[11-12]。本病例(患者3)中標本37 ℃水浴5 min后立即鑒定，正、反定型一致，鏡下無凝集，血型為B型Rh(D)陽性。

ABO血型鑒定是輸血科(血庫)最基本也是最重要的一項工作，遇到疑難血型時，工作人員不應盲目的依賴于血型參比實驗室，應充分利用臨床資料和檢驗結果的線索作用，分析干擾因素，設計試驗方法。只有通過平時工作中的不斷學習積累，疑難血型鑒定和輸血就不會成為困擾輸血科(血庫)的難題。