李莎莎，楊 丹，姚 瑤

寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院醫(yī)學實驗中心，寧夏銀川 750004

布魯菌是一類重要的人畜共患病病原菌，它對人和多種動物致病[1]。布魯菌病是一種嚴重威脅公共衛(wèi)生和人類健康的人畜共患傳染病，是由布魯菌引起的急、慢性自然疫源性傳染病。該病在我國很多省份都有報道，主要以農(nóng)牧業(yè)發(fā)達的地區(qū)為主，如：新疆維吾爾自治區(qū)、青海省、寧夏回族自治區(qū)、西藏自治區(qū)以及內(nèi)蒙古自治區(qū)等[2]，是我國二類動物疫病，乙類法定人畜共患傳染病[3]。布魯菌病不僅感染途徑多樣且發(fā)病機制復雜，可通過消化道、呼吸道、皮膚黏膜等侵入人體，并引起一系列的免疫反應，最常見的癥狀是高熱、肌肉酸痛、關(guān)節(jié)痛[4]。如病情遷延可導致敗血癥，嚴重者可導致多個器官系統(tǒng)功能受損。目前實驗室檢測方法有細菌學檢查、血清學檢查等。本研究分析了本院2016-2018年收治的布魯菌病患者不同的檢測方法，探討不同檢測方法在布魯菌病中的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年8月至2018年6月本院收治的布魯菌感染的120例患者作為研究對象，其中男91例，女29例，年齡1個月至79歲。納入標準：納入研究病例均符合WS 269-2007《布魯菌病診斷標準》。排除標準：患有其他血液性疾病者；有感冒癥狀者；其他感染性疾病者。剔除重復病例及復查病例。

1.2儀器與試劑 細菌學方法：Bact/ALERT 3D全自動血培養(yǎng)儀，Bact/ALERT系統(tǒng)提供專用封閉式培養(yǎng)瓶(包括含樹脂需氧培養(yǎng)瓶、含樹脂厭氧培養(yǎng)瓶及含樹脂新生兒專用培養(yǎng)瓶)，哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基，VITEK 2 COMPACT全自動微生物分析儀，革蘭陰性菌鑒定卡(GN卡)，均為法國梅里埃公司產(chǎn)品。血清學方法：虎紅平板凝集法(RBPT法)，試劑盒由寧夏回族自治區(qū)疾病控制與預防中心贈予；膠體金法采用人布魯菌IgG抗體檢測試劑盒，試劑盒來自北京中檢安泰。

1.3方法

1.3.1細菌學檢查 無菌采集患者靜脈血。成人采血量為8～10毫升/瓶,每次同時采集1個需氧瓶和1個厭氧瓶送檢；兒童采集單個兒童需氧瓶,采血量為1～5 mL,注入兒童血培養(yǎng)瓶內(nèi)混勻立即送檢。血培養(yǎng)瓶放入Bact/ALERT 3D全自動血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。全自動血培養(yǎng)儀培養(yǎng)5 d未報警,且轉(zhuǎn)種培養(yǎng)皿經(jīng)觀察無細菌生長者視為陰性；血培養(yǎng)儀顯示陽性時,將陽性標本進行轉(zhuǎn)種，并對生長的菌落進行細菌鑒定。檢驗過程嚴格按照標準操作規(guī)程進行。

1.3.2血清學檢查 (1)RBPT法：將采集的患者靜脈血分離出血清，取被檢血清30 μL與虎紅平板凝集抗原30 μL用攪拌棒以畫圓方式擴散推開，均勻搖動平板，在4 min內(nèi)觀察結(jié)果。每次試驗應設(shè)陰、陽性血清對照。若出現(xiàn)肉眼可見的凝集則為陽性，呈均勻粉紅色無凝集現(xiàn)象為陰性。(2)膠體金法：取10 μL血清加入加樣孔，再加入100 μL標本稀釋液。15～20 min內(nèi)判讀結(jié)果，20 min后檢驗結(jié)果無效。只在質(zhì)控線(C)位置出現(xiàn)1條紅色條帶為陰性，質(zhì)控線(C)和檢測線(T)位置出現(xiàn)兩條紅色條帶為陽性，質(zhì)控線(C)位置沒有出現(xiàn)紅色條帶時結(jié)果無效。

1.4統(tǒng)計學處理 采用SPSS25.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行處理。計數(shù)資料以頻數(shù)、率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

120例患者中，細菌學方法檢測布魯菌陽性89例，陽性率為74.17%；血清學檢驗中，RBPT法檢測布魯菌116例，陽性率為96.67%，膠體金法檢測陽性112例，陽性率為93.33%。3種檢測方法結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=33.650，P<0.001)；以細菌學方法檢測結(jié)果為標準，其檢測結(jié)果分別與RBPT法、膠體金法檢測結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=24.385、16.196，P<0.001)。而2種血清學方法(RBPT法和膠體金法)檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.404，P>0.05)。見表1。

表1 不同檢測方法布魯菌檢出結(jié)果比較[n(%)]

3 討 論

目前，臨床對于布魯菌感染的診斷，多采用細菌學和血清學檢驗[5]。本研究采用細菌學方法、RBPT法和膠體金法對所選取的120例患者進行檢測，結(jié)果顯示，細菌學方法檢測陽性率為74.17%，RBPT法為96.67%，膠體金法為93.33%。RBPT法、膠體金法檢測布魯菌的陽性率分別與細菌學方法檢測的陽性率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。在布魯菌感染的檢測中，血清學方法的檢出率比細菌學方法更高，更具應用價值。血清學方法檢測的是IgG類抗體，操作簡單，可在短時間內(nèi)對布魯菌感染情況進行檢測，特別適用于對布魯菌病進行大范圍的篩查，但在檢測過程可能會受到非特異性抗體的干擾而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因此，在對布魯菌病進行診斷時，不能單純以血清學方法檢測結(jié)果為標準，血清學方法檢測結(jié)果為陰性時，細菌學方法也可能分離出布魯菌[6]。本研究結(jié)果顯示，血清學方法的檢出率相較于細菌學方法更高，更具應用價值，但細菌學檢驗通過留取標本，經(jīng)培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)種，通過菌落對檢測結(jié)果進行判定，可作為檢測的“金標準”。在檢測過程中，如發(fā)現(xiàn)血清學方法檢驗結(jié)果為陰性的患者臨床癥狀出現(xiàn)異常，可聯(lián)合細菌學檢測進行判斷，進一步減少漏診，從而提高檢出率[7]。RBPT法和膠體金法2種血清學方法檢測結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，2種血清學方法均操作簡單快速，都適用于大規(guī)模篩查，實驗室工作人員可根據(jù)情況靈活選用。

布魯菌感染對人類身體健康損害嚴重，接觸牛、羊及其污染的環(huán)境或和乳制品是其主要感染途徑[8]。采用不同方法對布魯菌進行檢測，對提高該病診斷效率，及時進行有效的診斷、治療，控制病情傳染，以及提高患者生活質(zhì)量具有積極的臨床意義[9]。

綜上所述，對于疑似布魯菌感染的患者，臨床上可積極展開血清學檢驗，并根據(jù)情況靈活選用RBPT法、膠體金法，使患者能夠盡早確診。血清學方法檢測對布魯菌有較高的診斷價值，但有假陽性結(jié)果，故臨床應用中可采用血清學與細菌學聯(lián)合檢測的方法，以提高布魯菌的陽性檢出率。