馬玉勤 馬振林

（1，臨夏州職業(yè)技術學校 731100；2，甘肅省廣河縣畜牧局 731300）

2019 年秋季，臨夏縣某奶牛養(yǎng)殖戶發(fā)生牛肝片吸蟲病，該病又稱片形吸蟲病，多發(fā)生于夏秋季，牛和羊均可發(fā)生。肝片吸蟲的成蟲在動物膽管內(nèi)排出大量蟲卵，卵隨膽汁進入腸道，隨糞便排出體外，在適宜條件下孵出毛蚴，毛蚴遇到中間宿主螺，經(jīng)過幾個階段發(fā)育為囊蚴，當牛吃了附著囊蚴的水草后，蟲體進入消化道，在十二指腸內(nèi)脫囊進入腹腔，經(jīng)肝包膜進入肝臟，在膽道內(nèi)發(fā)育為成蟲，成為傳染性的一種寄生蟲病。隨著養(yǎng)牛規(guī)模和養(yǎng)殖戶的增加，該病呈散發(fā)性或地方性流行。其臨床主要特征為體形消瘦，黏膜發(fā)黃，高度貧血，產(chǎn)奶量急劇下降癥狀。病牛反芻異常，食欲減退，一般無熱痛，繼而出現(xiàn)周期性瘤胃膨脹，拉稀，行動遲緩，后期出現(xiàn)下頜、胸下水腫，觸診有捏面團的感覺。

1 發(fā)病情況

2019 年10 月，臨夏縣養(yǎng)殖戶張某發(fā)現(xiàn)自家飼養(yǎng)的17 頭奶牛中有5 頭奶牛出現(xiàn)產(chǎn)奶量減少、所產(chǎn)牛奶稀薄，飲食量減退、反芻異常，其中一頭較為嚴重。張某懷疑是近期因天氣變化多端，氣溫驟降引起牛受風寒感冒，便灌服常用抗感冒藥物治療，用藥10d 后癥狀并未緩解，隨著時間的推移，其中患病較重的奶牛幾乎停止產(chǎn)奶，長時間俯臥地面，口腔流口水，不愿站立，張某為了降低經(jīng)濟損失，將其宰殺后出售肉品。

2 臨床癥狀

患病奶牛逐漸身體消瘦，背毛粗亂并易脫落，食欲減少，反芻異常，病牛表現(xiàn)剛開始為精神沉郁，流涕，食欲不振，反芻慢慢減少，繼而出現(xiàn)周期性瘤胃膨脹，拉稀，行動遲緩，產(chǎn)奶量下降，奶汁稀薄，不愿行走，后期出現(xiàn)眼結(jié)膜發(fā)黃，下頜、胸下水腫，觸診有捏面團的感覺。

3 病理變化

尸體消瘦，嚴重貧血，眼結(jié)膜和皮下發(fā)黃，腸壁和肝實質(zhì)損傷。肝腫大，肝包膜上有纖維素沉著，觸摸時有核桃大小不等的硬結(jié)，觸診堅硬。肝小葉間由結(jié)締組織增生，切開小葉后發(fā)現(xiàn)有暗紅色蟲道，在蟲道內(nèi)有凝固的血液和童蟲，膽道內(nèi)有大量童蟲和成蟲（圖1）及污濁稠厚的液體，膽管擴張、管壁增厚并有小出血點，膽汁停滯，其黏膜有出血點，脾臟腫大，腹內(nèi)多組織器官呈貧血狀，把肝小葉切開，在清水中放置一會水面浮起一層童蟲和成蟲。

4 蟲卵、幼蟲、成蟲檢查

對所飼養(yǎng)的17 頭奶牛進行編號，分別編為“1”“2”“3”……“17”，對糞便分別取樣進行蟲卵、幼蟲和成蟲的檢查，具體結(jié)果如附表（+：代表檢出，-：代表未檢出）。

4.1 直接涂片檢查

在載玻片上級滴上一滴甘油和一滴水，充分混合，按照對17 頭牛的編號順序，用牙簽挑取少量糞便加入其中，混勻，經(jīng)過處理，在玻片上留有一層均勻的糞液膜，蓋上蓋玻片，置顯微鏡下檢查。

4.2 反復沉淀法

按照編號，每個編號稱取糞便5g，加水攪勻，先通過60目的鐵篩過濾，濾下液收集于三角杯中，靜置30min，頃去上層液，保留沉渣，再加水混勻、沖洗，反復操作5 次，直到洗出液體清澈透明，吸取沉淀渣檢查。漏斗裝滿水后，將一塊邊長為9cm 的正方形薄紗平放入水中。

4.3 貝爾曼法（漏斗幼蟲分離法）

準備一個中等大小的漏斗，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一個小試管。按照編號，每個編號稱取糞便15g 放于漏斗中薄紗上，將薄紗的4 個角折到糞便上，加入40℃溫水到淹沒糞便為止，將漏斗靜置一夜，拔取底部小試管，取其沉渣，置于凹窩式反應板的凹窩內(nèi)直接檢查或顯微鏡下檢查，發(fā)現(xiàn)數(shù)量不等、大小不一的肝片吸蟲的幼蟲和成蟲。

4.4 被檢肝片吸蟲形態(tài)

蟲體大體呈葉片狀，被腹扁平，活體蟲體呈紅棕色，大小因患病牛的發(fā)育及營養(yǎng)狀況而異，成蟲大小約為20mm×8mm，前端頭錐呈三角形，肩部先寬后逐漸變窄。口吸盤位于頭錐前端，腹吸盤較大，位于口吸盤稍后處。生殖孔位于口吸盤與腹吸盤兩者之間。

4.5 被檢吸蟲的染色

用艾爾利希式（Ehrlich）蘇木精染色法進行染色封存。

艾爾利希式（Ehrlich）蘇木精染色液的配制：2g 蘇木精，100ml 無水乙醇，100ml 蒸餾水，10ml 冰醋酸，100ml 甘油和10g 鉀明礬，進行充分混合配制，配制液靜置6 周，染色前將1 份貯存液以3 份用45%醋酸進行稀釋，制成醋酸稀釋液備用。具體染色操作步驟如下。

（1）把制作好的標本用含1%鹽酸的醋酸稀釋液進行分化，每隔3min 觀察標本著色情況，染色持續(xù)10min。

（2）將著色的標本放在冰醋酸中脫水，脫水時間持續(xù)30min。

（3）將脫水后的標本分別置于冰醋酸和甲基水楊酸不同比例（3：1、1：1、1：3）的混合液中，使其充分滲透后，蟲體體表透明取出，用加拿大松脂密封固定。（臨夏現(xiàn)代職業(yè)學院畜牧獸醫(yī)系實驗室制，圖2）。

蟲卵檢出率：70.5%，幼蟲檢出率：76.4%，成蟲檢出率：29.4%。

根據(jù)上述發(fā)病情況、臨床癥狀、結(jié)合病理變化和糞便檢查發(fā)現(xiàn)蟲卵、幼蟲、成蟲，確診為牛肝片吸蟲病。

5 治療

（1）六氨乙烷，每千克體重0.2～0.4mg，一次內(nèi)服。

（2）硝氯酚，每千克體重0.5～1mg，深部肌肉注射。

（3）阿苯達唑，每千克體重15～25mg，口服，權效果也良好。

（4）雙乙酰胺苯氧醚，每千克體重120～150mg，一次內(nèi)服。

6 小結(jié)

（1）診療注意事項。部分家畜的急性病例，其體內(nèi)片形吸蟲蟲體由于發(fā)育尚未成熟，通過糞便檢查時不易發(fā)現(xiàn)蟲卵，此時需結(jié)合病畜（尸體）病理進行解剖檢查，觀察肝臟與膽管部位中是否存在童蟲。

（2）驅(qū)蟲。肝片吸蟲病的傳播主要是源于病畜和帶蟲者，驅(qū)蟲不僅是治療病畜，也是積極的預防措施。每年應有二次定期驅(qū)蟲，第一次應在秋末冬初，第二次應在冬末春初。

（3）對病牛糞便每天清除后進行堆肥，及時清除并堆積成1～1.5m3 的糞堆，用生物熱處理，可有效殺滅蟲卵，以免幼蟲污染環(huán)境。

（4）消滅中間宿主。由于發(fā)病牛被飼養(yǎng)在半農(nóng)半牧地帶，常年陰濕，容易滋生螺，給肝片吸蟲的傳染創(chuàng)造了條件，滅螺是預防片形吸蟲病的重要措施，因此，用氯硝柳胺藥物消滅中間宿主螺，每升水中加入40mg，充分混勻后噴灑在飼草上。

（5）加強飼養(yǎng)管理。盡可能的選擇地勢較高干燥的地區(qū)放牧。舍飼飼養(yǎng)的牛群用消滅過中間宿主的草料或晾曬后青草再飼喂，牛的飲水用自來水或井水，并保持水源清潔，以預防感染。

附表 張某養(yǎng)殖奶牛蟲卵、幼蟲、成蟲檢查統(tǒng)計表