趙 帥 湖南省長(zhǎng)沙市第三醫(yī)院 410000

結(jié)直腸癌是一種常見(jiàn)的消化道腫瘤，且該病發(fā)病率較高，在胃腸道腫瘤中占第二位[1-2]。且醫(yī)療界對(duì)結(jié)直腸癌的形成、發(fā)病機(jī)制與預(yù)后尚未完全清楚，故深入了解結(jié)直腸癌形成、病情發(fā)展、尋找預(yù)測(cè)結(jié)腸癌的影響標(biāo)志物成為一大研究熱點(diǎn)[3]。其中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-13是腫瘤細(xì)胞主要蛋白水解酶之一，能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移；MMP-14能夠通過(guò)調(diào)整血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)血管生成，促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移；組織蛋白酶-D(Cathepsin D)是一種嗜酸性溶酶體蛋白水解酶，在腫瘤細(xì)胞中易出現(xiàn)異常表達(dá)[4]。鑒于此，選取結(jié)直腸癌患者和健康人群各124例，測(cè)試結(jié)直腸MMP-13和14、Cathepsin D的表達(dá)水平，并分析與預(yù)后相關(guān)性?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 抽取2017年11月—2018年11月收治的124例結(jié)直腸癌患者組織標(biāo)本，定為研究組。對(duì)照組選擇在我院正常體檢的健康人群124例的正常結(jié)直腸組織標(biāo)本。研究組入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)均經(jīng)活檢和病理檢查學(xué)確診；(2)未接受過(guò)相關(guān)治療；(3)知情并自愿參加本次研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在聽(tīng)力、視力或精神障礙者；(2)1周內(nèi)有特殊用藥史者；(3)癌癥轉(zhuǎn)移者。我院倫理委員會(huì)已認(rèn)證本次研究。研究組患者124例，男71例，女53例；年齡25～73歲，平均年齡(49.56±22.47)歲；病理類型: 黏液細(xì)胞癌24例，乳頭狀腺癌49例，管狀腺癌51例；分化程度：低分化42例，中分化69例，高分化13例；腫瘤部位：結(jié)腸66例，直腸58例。對(duì)照組健康人群124例，男68例，女56例；年齡24～75歲，平均年齡(49.52±22.63)歲。兩組性別、年齡比較差異不顯著(P>0.05)。

1.2 方法 結(jié)直腸癌患者組織標(biāo)本和正常結(jié)直腸組織標(biāo)本首先用10%甲醛固定，并用石蠟包埋后，切出厚度為4μm的薄片。然后用免疫組織化學(xué)SP染色。陰性對(duì)照選擇磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗；陽(yáng)性對(duì)照選擇已知標(biāo)志物的陽(yáng)性組織切片，嚴(yán)格依據(jù)試劑盒的操作說(shuō)明進(jìn)行[5]。本文MMP-13和14、Cathepsin D均購(gòu)于北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司，試劑盒均購(gòu)于北京天根生化科技有限公司。

2.1 甲、乙型流感臨床資料和血常規(guī)參數(shù) 患者組和健康對(duì)照組的年齡、男女比例構(gòu)成情況比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。血常規(guī)參數(shù)LMR的患者組比健康對(duì)照組均值小，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而NLR和PLR患者組都比健康對(duì)照組均值大，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

1.3 觀察指標(biāo) (1)MMP-13和14、Cathepsin D表達(dá)情況：MMP-13和14表達(dá)的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)<5%記0分，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)≥5%且<25%記1分，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)≥25%且<50%記2分，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)≥50%且<75%記3分，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)≥75%記4分；染色強(qiáng)度為淡黃色記1分，為黃或深黃色記2分，為褐或棕褐色記3分，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)評(píng)分與染色強(qiáng)度的評(píng)分乘積>1分判定為陽(yáng)性。Cathepsin D表達(dá)的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒，在100倍鏡下尋找代表性區(qū)域，在400倍鏡下觀察陽(yáng)性細(xì)胞<10%判定為陰性，≥10%判定為陽(yáng)性。(2)研究組生存情況：術(shù)后隨訪12個(gè)月后，統(tǒng)計(jì)結(jié)腸癌患者的生存率。

胼胝體梗死往往累及高級(jí)神經(jīng)功能，而導(dǎo)致高級(jí)神經(jīng)功能損害。胼胝體梗死會(huì)損害連接雙側(cè)大腦半球的完整性聯(lián)絡(luò)纖維，進(jìn)一步會(huì)出現(xiàn)雙側(cè)大腦半球失聯(lián)系現(xiàn)象進(jìn)而導(dǎo)致一系列臨床癥狀[19]。Giroud等[6]研究了282例缺血性腦卒中患者并報(bào)道了胼胝體梗死后2個(gè)經(jīng)典的臨床癥狀：(1)胼胝體離斷癥狀，包括失用、失寫(xiě)、左手觸覺(jué)性命名不能和異己手綜合癥(alien hand syndrome，AHS)。(2)額葉性共濟(jì)失調(diào)，包括因胼胝體前部小梗死灶導(dǎo)致的走路基步寬、小碎步以及手臂失去擺動(dòng)等癥狀。

2 結(jié)果

2.2 研究組結(jié)直腸組織標(biāo)本MMP-13和14、Cathepsin D表達(dá)與預(yù)后相關(guān)性分析 124例結(jié)直腸癌患者術(shù)后隨訪率為100%，其死亡率為30.65%(38/124)，生存率為69.35%(86/124)。且隨著MMP-13、Cathepsin D陽(yáng)性表達(dá)率增加，患者死亡率增加，生存率降低，差異顯著(P<0.05)；而MMP-14陽(yáng)性表達(dá)率與患者死亡率相關(guān)性不大(P>0.05)。詳見(jiàn)表2。

表1 兩組結(jié)直腸組織標(biāo)本MMP-13和14、Cathepsin D表達(dá)情況比較 [n(%)]

2.1 兩組結(jié)直腸組織標(biāo)本MMP-13和14、Cathepsin D表達(dá)情況比較 相比于對(duì)照組，研究組結(jié)直腸癌患者組織標(biāo)本MMP-13和14、Cathepsin D陽(yáng)性表達(dá)率明顯較高，差異顯著(P<0.05)。詳見(jiàn)表1。

表2 研究組結(jié)直腸組織標(biāo)本MMP-13和14、Cathepsin D表達(dá)與預(yù)后相關(guān)性分析 [n(%)]

3 討論

隨著人們的飲食結(jié)構(gòu)的改變及生活水平的提高，結(jié)直腸癌的發(fā)病率逐漸增加，主要臨床表現(xiàn)為血便、腹瀉、局部腹痛，后期還可能伴隨貧血或體重減輕。并且該病發(fā)病過(guò)程較復(fù)雜，不易及早發(fā)現(xiàn)，到目前為止其發(fā)病原因、早期診斷標(biāo)志物、改善患者預(yù)后的標(biāo)志尚不清楚[6]。同時(shí)大量研究報(bào)道[7-8]，結(jié)直腸癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移及預(yù)后與多種生物指標(biāo)相關(guān)。

MMP-13和14、Cathepsin D均參與腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移過(guò)程。其中MMP-13是一種間質(zhì)膠原酶，能夠激活狀細(xì)胞癌中的MMP-9，增加腫瘤侵襲性；MMP-14屬于膜型基質(zhì)金屬蛋白酶，可體外激活MMP-13，并且能夠調(diào)整血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)血管生成，促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移；Cathepsin D是一種嗜酸性溶酶體蛋白水解酶，在腫瘤細(xì)胞中易出現(xiàn)異常表達(dá)，且與病理分級(jí)有關(guān)。同時(shí)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移與催化細(xì)胞外基質(zhì)降解有密切的關(guān)系，而MMP-13和14是催化細(xì)胞外基質(zhì)降解的主要酶類，故促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移；Cathepsin D能夠促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解，從而有效促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。故本次研究發(fā)現(xiàn)，相比于對(duì)照組，研究組結(jié)直腸癌患者組織標(biāo)本MMP-13和14、Cathepsin D陽(yáng)性表達(dá)率明顯較高。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 此實(shí)驗(yàn)采用SPSS18.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，用[n(%)]來(lái)表示計(jì)數(shù)資料，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)，差異顯著。

另外，對(duì)124例結(jié)直腸癌患者進(jìn)行隨訪1年，隨訪率為100%，其死亡率為30.65%，生存率為69.35%。且隨著MMP-13、Cathepsin D陽(yáng)性表達(dá)率增加，患者死亡率增加，生存率降低；而MMP-14陽(yáng)性表達(dá)率與患者死亡率相關(guān)性不大。提示說(shuō)明MMP-13、Cathepsin D陽(yáng)性增強(qiáng)與直腸癌的預(yù)后有較大的相關(guān)性，其可作為預(yù)測(cè)直腸癌預(yù)后的重要因素。

本文就以房地產(chǎn)企業(yè)的營(yíng)銷為例，探究房地產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷效果分析系統(tǒng)設(shè)計(jì)和實(shí)現(xiàn)的有效方案。這種企業(yè)和電子商務(wù)網(wǎng)絡(luò)存在一定的差異，因?yàn)殡娮由虅?wù)網(wǎng)站的營(yíng)銷一般只涉及網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷，而房地產(chǎn)營(yíng)銷是線上線下同時(shí)開(kāi)展的，構(gòu)建企業(yè)的網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷效果分析系統(tǒng)，對(duì)于房地產(chǎn)企業(yè)的長(zhǎng)效發(fā)展目標(biāo)實(shí)現(xiàn)具有重要意義。

綜上所述，MMP-13和14、Cathepsin D參與了結(jié)直腸癌的發(fā)病進(jìn)程，其中MMP-13、Cathepsin D陽(yáng)性表達(dá)與結(jié)腸癌患者術(shù)后生存率有密切的關(guān)系。