肖生苓, 荊勇,, 馮晶, 申瑞霞*, 趙立欣, 王全亮, 張迎

(1.東北林業(yè)大學工程技術學院，哈爾濱 150036；2.農業(yè)農村部規(guī)劃設計研究院農村能源與環(huán)保研究所，農業(yè)農村部農業(yè)廢棄物能源化利用重點實驗室，北京 100125)

厭氧發(fā)酵可產生可再生能源沼氣，發(fā)酵剩余物(沼渣、沼液)經(jīng)過有效處理可作肥料還田，不僅解決了環(huán)境污染問題，而且實現(xiàn)了有機廢物的高效利用[1]，是當前處理農林廢棄物、畜禽糞便等不同類型有機廢物的重要技術。然而，厭氧發(fā)酵技術仍面臨很大的挑戰(zhàn)，如厭氧發(fā)酵底物的理化性質與微生物的生理和代謝需求不匹配[2-3]，中間代謝產物(氨氮、有機酸等)累積影響微生物活性[3-4]，導致底物降解緩慢、沼氣生產效率低，發(fā)酵穩(wěn)定性不足等問題。

生物炭作為一種新興炭材料，是農林廢棄物熱解炭化或水熱炭化的產物，具有比表面積大、孔隙結構復雜、灰分、堿土金屬元素及表面活性基團豐富、導電性強等特性[5-6]。近年來，許多生物炭類型被用于厭氧發(fā)酵研究，例如，活性污泥生物炭[7-8]、各種糞便生物炭[9-11]、各種農副產物制備的生物炭[11-13]、木屑生物炭[14-18]等。生物炭的添加能提高厭氧發(fā)酵過程的穩(wěn)定性，并使微生物得到富集[16]，提高厭氧發(fā)酵過程中有機廢棄物的水解速率，縮短延滯期，促進產氣[14-15]。除生物炭類型外，生物炭灰分對厭氧發(fā)酵也有顯著影響，灰分中豐富的堿土金屬元素及各種有機鹽有助于提升厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的緩沖能力和穩(wěn)定性[1,5,19-20]，促進微生物生長，適當調節(jié)灰分含量有利于厭氧發(fā)酵的進行。

由于木質生物炭原料來源廣泛，木質素含量高，熱解形成的生物炭碳含量高、空隙復雜、結構穩(wěn)定[20-21]，較秸稈生物炭更利于維持厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的穩(wěn)定和甲烷的產生[15]。當前，關于木質生物炭強化厭氧發(fā)酵的研究甚少，且生物炭灰分對厭氧發(fā)酵的產甲烷特性、緩沖作用等影響的研究也較為欠缺。另外，對厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的分析與評價較少。因此，本研究以木質生物炭作為添加劑進行厭氧發(fā)酵試驗，利用AMPTS全自動甲烷潛力測試系統(tǒng)作為批式厭氧發(fā)酵平臺，以玉米秸稈、牛糞為底物，通過改變木質生物炭的種類、粒徑、生物炭灰分含量等因素，研究木質生物炭對厭氧發(fā)酵的影響規(guī)律，同時利用First-Order水解模型、修正的 Gompertz 模型作進一步的分析與評價，以期為生物炭強化厭氧發(fā)酵的工藝及機理研究提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本研究采用3種木質生物炭：灌木生物炭、混合木屑生物炭、楊木生物炭。灌木生物炭購于河南環(huán)盛炭業(yè)有限公司；混合木屑生物炭、楊木生物炭為實驗室自制(采用生物質連續(xù)炭化內加熱熱解裝置，在熱解溫度700 ℃、停留時間40 min條件下，制得混合木屑生物炭、楊木生物炭。楊木生物炭灰分在馬弗爐中經(jīng)550 ℃、保持180 min制得)。楊木、混合木屑(加工剩余物)均取自東北林業(yè)大學實驗林場。根據(jù)試驗需要，生物炭按粒徑尺寸分別篩分為<0.5、0.5～1和1～2 mm 3種，且均在105 ℃條件下烘干24 h備用。厭氧發(fā)酵底物為玉米秸稈和牛糞。其中，玉米秸稈取自河北省張家口市崇禮縣某農場，粉碎至粒徑<1 mm備用；牛糞取自河北省三河市某農場。沼液作為接種物，取自農業(yè)農村部農業(yè)廢棄物能源化利用重點實驗室。

1.2 試驗裝置及儀器設備

AMPTS全自動甲烷潛力測試系統(tǒng)主要由樣品消化單元(包括恒溫水浴鍋、攪拌裝置和玻璃發(fā)酵瓶)、CO2固定單元和氣體體積測定裝置組成。其中，發(fā)酵瓶體積為600 mL。生物炭元素采用CHNS/O元素分析儀[EA 2400 Ⅱ，珀金埃爾默企業(yè)管理(上海)有限公司]進行分析；總固含量(total solid，TS)、固體揮發(fā)性物質(volatile solid，VS)、灰分及揮發(fā)分含量采用節(jié)能箱式電爐(SX-G16102，天津市中環(huán)實驗電爐有限公司)進行測定；比表面積采用比表面及孔徑分析儀(JW-BK112，北京精微高博科學技術有限公司)進行測定；甲烷產量采用AMPTS全自動甲烷潛力測試系統(tǒng)(bioprocess control Sweden AB)計量；pH采用便攜式 pH 計(SX-610，上海三信)測定。

1.3 試驗設計

保持厭氧發(fā)酵溫度(38±1)℃、轉速36 r·min-1，底物配比秸稈：牛糞為9∶1(基于TS)，底物與接種物配比為1∶1(基于TS)。在厭氧發(fā)酵底物TS為6%的條件下，研究3種生物炭(灌木生物炭、楊木生物炭和混合木屑生物炭)對厭氧發(fā)酵產甲烷性能的影響。再基于上述試驗優(yōu)化結果，研究3種不同粒徑(<0.5、0.5～1和1～2 mm)楊木生物炭對厭氧發(fā)酵產甲烷性能的影響?；诓煌锾糠N類、粒徑試驗結果，將不同灰分含量(0、1.3、2.6、3.9 g·L-1)的楊木生物炭添加于發(fā)酵瓶，在厭氧發(fā)酵底物TS為8%、底物配比為1∶1的條件下，研究楊木生物炭灰分含量對厭氧發(fā)酵產氣及系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響。同時設置反應器中不添加任何生物炭的處理作為對照，每組3次重復，運行周期約為24 d。

1.4 計算方法

厭氧發(fā)酵過程水解速率常數(shù)利用First-Order水解模型擬合[22-23]，預測水解速率，計算公式如下。

(1)

式中，Kh為水解速率常數(shù)；Ht為t時刻的甲烷累積產量；A為產甲烷潛力。

利用修正的 Gompertz 模型對厭氧發(fā)酵產甲烷過程進行擬合，預測體系甲烷最大產量、最大甲烷日產率和延滯期，計算公式如下[11,24]。

(2)

式中，A為產甲烷潛力；μmax為最大甲烷日產率；λ為延滯期。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Office 2016、Origin 9.0等軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析和軟件作圖(甲烷產量、產率均基于VS)。

2 結果與分析

2.1 木質生物炭種類對厭氧發(fā)酵產甲烷性能的影響

圖1顯示了不同生物炭下甲烷累積產量和甲烷日產率。結果表明，添加灌木生物炭、楊木生物炭和混合木屑生物炭的厭氧發(fā)酵系統(tǒng)甲烷累積產量分別為 134.4、134.3和132.9 mL·g-1，均高于對照組(128.1 mL·g-1)。各系統(tǒng)甲烷日產率均在第2 d達最大值，其中楊木生物炭系統(tǒng)最大甲烷日產率最高(17.5 mL·g-1·d-1)，其次是混合木屑生物炭(16.7 mL·g-1·d-1)和灌木生物炭(15.6 mL·g-1·d-1)，均高于對照組(14.7 mL·g-1·d-1)。此外，對照組甲烷日產率在第7 d達到二次峰值11.1 mL·g-1·d-1，添加生物炭系統(tǒng)甲烷日產率均在第6 d達到二次峰值，其中楊木生物炭系統(tǒng)性能仍最佳，峰值可達 12.8 mL·g-1·d-1，較對照組高15.0%。添加生物炭不僅提高了甲烷累積產量4.90%，提高了底物有機質的利用效率，而且使甲烷日產率峰值提前1 d，縮短了厭氧發(fā)酵時間。由于厭氧發(fā)酵前期接種物活性相對較低，生物炭中含有豐富的堿土金屬元素，能有效提升厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的緩沖特性[4,12,25]，楊木生物炭碳含量(75.20%)與混合木屑生物炭(76.34%)差異不大，而楊木生物炭比表面積及Ca、Mg、Na、K等元素含量均高于混合木屑生物炭(表1)，所以促進厭氧發(fā)酵效果較混合木屑生物炭效果好。楊木生物炭C、Ca、Mg、Na等元素含量及比表面積均高于灌木生物炭，其中碳含量遠高于灌木生物炭，盡管灰分含量遠低于灌木生物炭，但對厭氧發(fā)酵的影響效果更強。因此，楊木生物炭對厭氧發(fā)酵具有更好的促進作用，更利于維持系統(tǒng)的穩(wěn)定、強化產氣和縮短發(fā)酵周期。

表1 不同生物炭理化特性Table 1 Physical and chemical properties of different biochar

2.2 楊木生物炭粒徑對厭氧發(fā)酵產甲烷性能的影響

圖2顯示了楊木生物炭不同粒徑下甲烷累積產量和甲烷日產率。結果表明，添加1～2、0.5～1和<0.5 mm 3種粒徑生物炭的厭氧發(fā)酵系統(tǒng)甲烷累積產量分別為 128.1、129.5和132.7 mL·g-1。這表明，甲烷累積產量與生物炭粒徑大小呈負相關，粒徑越小，甲烷累積產量越高。各厭氧發(fā)酵系統(tǒng)甲烷日產率均出現(xiàn)兩次峰值，分別于厭氧發(fā)酵的第2 d和第6 d。其中，粒徑<0.5 mm的生物炭系統(tǒng)甲烷日產率均最大(17.3、12.2 mL·g-1·d-1)，其次是粒徑為0.5 ～1 mm的生物炭系統(tǒng)(16.7、11.2 mL·g-1·d-1)和1～2 mm的生物炭系統(tǒng)(16.2、11.1 mL·g-1·d-1)。厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的甲烷累積產量、底物有機質的利用效率、厭氧發(fā)酵時間等均與生物炭粒徑呈負相關，粒徑越小，甲烷累積產量及最大甲烷日產率越高，發(fā)酵時間越短。

2.3 楊木生物炭灰分含量對厭氧發(fā)酵產甲烷性能的影響

圖3結果表明，楊木生物炭灰分含量處理中，灰分含量為2.6 g·L-1時，甲烷累積產量最高(107.4 mL·g-1)；其次是灰分含量為3.9 g·L-1(106.9 mL·g-1)；灰分含量為1.3 g·L-1時，甲烷累積產量最低(104.7 mL·g-1)。這表明，僅添加生物炭或灰分均能有效提升甲烷累積產量，灰分含量為2.6 g·L-1時最佳。各系統(tǒng)甲烷日產率均出現(xiàn)兩次峰值，其中灰分含量為2.6、3.9 g·L-1的系統(tǒng)均于厭氧發(fā)酵的第6 d達二次峰值，灰分含量為1.3 g·L-1系統(tǒng)和對照組均于厭氧發(fā)酵的第7 d達二次峰值，各系統(tǒng)兩次峰值對應的甲烷日產率均高于對照組。厭氧發(fā)酵初期僅添加灰分的系統(tǒng)產氣效果最好，最大日產氣率為15.2 mL·g-1·d-1。厭氧發(fā)酵前期接種物活性相對較低，灰分含有豐富的Ca、Mg等堿土金屬元素，且多以氧化物的形式存在，能有效提高含生物炭溶液的pH和堿度[15]，灰分中的碳、氮化合物和無機鹽等為微生物生長提供一定的營養(yǎng)物質，促進了甲烷的產生。從第4 d起，灰分含量為2.6 g·L-1的系統(tǒng)產甲烷能力逐漸超越其他系統(tǒng)，在二次峰值時甲烷日產率最高(10.3 mL·g-1·d-1)，較灰分含量為1.3、3.9 g·L-1系統(tǒng)和對照組分別高10.4%、7.9%和16.1%，且達二次峰值時間較灰分含量為1.3 g·L-1系統(tǒng)和對照組提前1 d。研究表明，除生物炭灰分為厭氧發(fā)酵系統(tǒng)提供一定的營養(yǎng)物質、提升系統(tǒng)的緩沖能力外，生物炭極高的碳含量和復雜的孔隙結構等對厭氧發(fā)酵起到了更好的促進作用，即楊木生物炭在灰分含量為2.6 g·L-1時，更利于厭氧發(fā)酵系統(tǒng)甲烷的產生。

2.4 木質生物炭對厭氧發(fā)酵產甲烷系統(tǒng)性能影響的分析

采用一級動力學First-Order水解模型與Gompertz 模型預測分析木屑生物炭強化批式濕法厭氧發(fā)酵的水解及甲烷產生過程。根據(jù)表2中各參數(shù)可知，方程的相關系數(shù)R2均在 0.990 1～0.998 7之間，說明動力學模型擬合效果較好，與試驗數(shù)據(jù)具有極高的一致性[4,22]。

根據(jù)表2中水解速率常數(shù)對應線性回歸曲線的斜率可知，受生物炭種類、粒徑、灰分含量的影響，楊木生物炭對水解速率影響最大，提高了15.6%，其次是混合木屑生物炭(10.7%)和灌木生物炭(2.6%)。水解速率也受生物炭粒徑的限制，且與生物體粒徑成負相關，粒徑越小，水解速率提升越大。當生物炭粒徑<0.5 mm時，對應的水解速率最大，較對照組提升約14.4%。生物炭和生物炭灰分對厭氧發(fā)酵水解速率也有比較大的影響，通過不同含量灰分的添加，提升水解速率7.2%～15.5%。其中，生物炭灰分含量為2.6 g·L-1時，底物降解最快，水解速率最高。根據(jù)修正的 Gompertz擬合參數(shù)可知，生物炭種類、粒徑及灰分對厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的產甲烷能力有一定的影響。添加生物炭各系統(tǒng)產甲烷潛力均高于對照組，其中添加楊木生物炭系統(tǒng)產氣潛力盡管略低于灌木生物炭系統(tǒng)，但有效提升了厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的甲烷產率，且最大甲烷日產率最高(13.42±0.53 L·kg-1·d-1)。厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的產甲烷潛力及最大甲烷日產率均與楊木生物炭粒徑成負相關，粒徑越小，對應的產甲烷潛力及最大甲烷日產率越高，而延滯期與楊木生物炭粒徑成正相關，粒徑越小，延滯期越短。不同灰分含量的添加，有效提升了產甲烷潛力及最大甲烷日產率。其中，灰分含量為2.6 g·L-1的系統(tǒng)效果最好，對應的產甲烷潛力(103.84±0.83 L·kg-1)及最大甲烷日產率(9.92±0.37 L·kg-1·d-1)最高，最大甲烷日產率較對照組提升了14.4%，對應的延滯期最低，較對照組縮短了11.8%。同時發(fā)現(xiàn)，擬合中最大甲烷日產率與厭氧發(fā)酵系統(tǒng)中二次峰值相對應。

表2 厭氧發(fā)酵的First-Order水解模型和修正的Gompertz模型Table 2 First-Order hydrolysis model and modified Gompertz model for anaerobic fermentation

研究結果表明，生物炭的添加促進了底物的降解，提高了系統(tǒng)的甲烷累積產量和日產率。其中，楊木生物炭對厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的影響最大，且粒徑越小，底物水解越快，甲烷累積產量和日產率越高[14]。此外，適當提升灰分含量能提高厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的緩沖能力和穩(wěn)定性[26]，促進甲烷的生成。

3 討論

木質生物炭對厭氧發(fā)酵有一定的促進作用，生物炭應用于厭氧發(fā)酵系統(tǒng)加快了厭氧發(fā)酵底物的水解，提升了甲烷累積產量、最大甲烷日產率，縮短了甲烷日產率二次峰值的到達周期，有效調節(jié)厭氧發(fā)酵過程中易揮發(fā)性有機酸的積累，并有效縮短厭氧發(fā)酵的延滯期[4,13]。其中，添加楊木生物炭對厭氧發(fā)酵系統(tǒng)影響最大，有效提升了厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的甲烷累積產量(4.9%)、最大甲烷日產率(15.0%)、水解速率(15.6%)，其次是混合木屑生物炭、灌木生物炭。因為楊木生物炭揮發(fā)分及C、Ca、Mg、Na等元素含量均較灌木生物炭和混合木屑生物炭高，擁有較高的pH，能有效提高厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的緩沖能力。有研究發(fā)現(xiàn),生物炭中Na、K、Mg、Ca 等堿土金屬元素常以氧化物或炭酸鹽形式存在，溶于水后呈微堿性，具有一定的酸堿緩沖特性[27]。生物炭具有一定的微生物載體作用，豐富的孔隙結構促進微生物的定殖，表層微量的營養(yǎng)元素能進一步加快水解、酸化和產甲烷階段微生物的增殖[17,28]。Shen等[1]在不同生物炭強化厭氧發(fā)酵和微生物群落特性的研究中也得出同類結果。生物炭對厭氧發(fā)酵緩沖能力以及生物炭對發(fā)酵過程中揮發(fā)性有機酸的變化、微生物群落演變等的影響，在即將開展的連續(xù)式厭氧發(fā)酵試驗中將會做進一步的探究。

楊木生物炭粒徑對厭氧發(fā)酵也具有比較大的影響，一般粒徑越小，甲烷累積產量越高，甲烷日產率峰值越大，其中粒徑<0.5 mm產氣效果最好，對應底物水解越快，延滯期越短。Luo等[14]的研究結果與此一致。因為生物炭粒徑越小，對應pH越大，孔隙結構越復雜，比表面積越大，表層營養(yǎng)元素、基團等與厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的接觸越廣泛[25]，更利于微生物的附著與生長[1,14]。從而加快底物水解，進一步提升甲烷產量和最大甲烷日產率。

楊木生物炭灰分含量對厭氧發(fā)酵的甲烷產量、產率及系統(tǒng)緩沖能力有一定影響。研究發(fā)現(xiàn)，生物炭灰分中含有豐富的堿土金屬元素，能有效提高厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的緩沖能力[12,27]。當灰分含量為2.6 g·L-1時，對厭氧發(fā)酵系統(tǒng)影響最強，提升厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的緩沖能力、最大甲烷日產率(14.4%)的同時，也縮短了延滯期(11.8%)?；曳趾窟^高(3.9 g·L-1)，反而不利于厭氧發(fā)酵產氣。另有研究顯示，生物炭的高導電性在一定程度上能增強互營菌與產甲烷菌之間的電子交換[29-31]，實現(xiàn)直接種間電子轉移的潛在增強[28]，從而提升甲烷的產量和生成速率?？赡苓^高的灰分使生物炭含量相對偏低或過高的堿土金屬元素對微生物代謝起到一定的負面影響，具體原因需要進一步探索。因此，適當?shù)纳锾考捌浠曳趾扛趶娀瘏捬醢l(fā)酵。