岑進 高國平 王月

(沈陽農(nóng)業(yè)大學，沈陽，110866)

天柱山位于沈陽城郊，是世界物質(zhì)文化遺產(chǎn)清福陵(俗稱東陵)的主要附屬森林區(qū)，有著重要的生態(tài)價值和文化旅游價值，對該區(qū)域內(nèi)大型真菌資源進行系統(tǒng)全面的調(diào)查研究有著重要意義。小脆柄菇屬(Psathyrella(Fr.)Quél.)是大型真菌中的一個大屬，隸屬于擔子菌門(Basidiomycota)、蘑菇綱(Agaricomycetes)、蘑菇目(Agaricales)、小脆柄菇科(Psathyrellaceae)，是小脆柄菇科的模式屬[1]。據(jù)資料記載該屬真菌物種豐富，分布廣泛，全球約有500種[2]。該屬真菌在夏秋季節(jié)常生于腐殖質(zhì)含量較高的枯枝落葉層中，在沼澤地、農(nóng)田、草原，甚至水下都能見到小脆柄菇屬真菌的生長。目前國外對該屬真菌的研究主要集中在資源調(diào)查方面，1972年Simth[2]撰寫了該屬的第1本專著，此后外國專家學者在對該屬真菌種類多樣性研究方面取得了一系列成果。我國對小脆柄菇屬真菌的研究也主要集中在資源調(diào)查和物種多樣性方面。該屬真菌在全國多數(shù)省份均有分布，其中主要報道省份有廣東、吉林、四川、河南等。2014年圖力古爾與王月對全國小脆柄菇屬名錄進行了全面的整理，認為我國有該屬真菌名稱51個，發(fā)現(xiàn)中國新紀錄種7個[3]，該研究成果對我國小脆柄菇屬真菌資源的后續(xù)研究有極大的幫助。此前對天柱山林區(qū)小脆柄菇屬真菌的研究未見報道。筆者對天柱山林區(qū)內(nèi)的小脆柄菇屬真菌資源進行了2年的調(diào)查研究，并對天柱山林區(qū)的小脆柄菇屬真菌分布情況進行了初次報道，以期為世界文化遺產(chǎn)清福陵的保護與開發(fā)提供參考，并為遼寧省小脆柄菇屬真菌的研究提供基礎(chǔ)資料。

1 研究地自然概況

天柱山地處中國沈陽市東部，占地566.67 hm2，地理坐標為41°11′～43°2′N、122°25′～123°48′E，海拔較低，平均50.0 m。地處歐亞大陸東部，位于長白山余脈與遼河沖積平原的過渡地帶[4]，是長白山、蒙古、華北3大植物區(qū)系交匯區(qū)[5]，屬于溫帶半濕潤大陸性氣候，據(jù)長期以來的歷史氣象資料分析所知，該區(qū)域年均氣溫為8.1 ℃，年平均降水量為722 mm，無霜期為153 d，年日照總時間2 587.6 h，太陽輻射量540.93 J·cm-2·a-1。區(qū)域內(nèi)森林枯落物的常年累積使林區(qū)內(nèi)土壤腐殖質(zhì)含量較高，受區(qū)域小環(huán)境的影響，土層較厚，土壤中水分含量較高。該區(qū)為暖溫帶落葉闊葉林區(qū)，由于長期以來人類活動頻繁，原始的自然植被已消失殆盡，現(xiàn)階段該區(qū)域內(nèi)生長的次生自然植被主要為針闊混交林，其主要針葉喬木為油松(Pinustabuliformis)，闊葉喬木為蒙古櫟(Quercusmongolica)，灌木為衛(wèi)矛(Euonymusalatus)。天柱山植物群落類型豐富，主要有以油松、蒙古櫟為優(yōu)勢樹種組成的針闊混交林，糠椴(Tiliamandshurica)、蒙古櫟為優(yōu)勢樹種組成的常落闊葉混交林，長白落葉松(Larixolgensisvar.changpaiensis)純林等10種植物群落類型[6]，喬、灌、草植物500種以上。

2 研究方法

2.1 調(diào)查時間與調(diào)查路線

為了盡可能地在小脆柄菇屬真菌發(fā)生的季節(jié)對其進行全面地調(diào)查，于2018年5月到2019年10月對天柱山區(qū)域內(nèi)不同植物群落類型下的小脆柄菇屬真菌進行調(diào)查采集。子實體的采集采取隨機踏查的方式，以林區(qū)內(nèi)的防火道為中軸線先左側(cè)后右側(cè)呈“S”形路線前進踏查；調(diào)查每周1次，每月至少4次，在雨水集中的6—9月份，適度增加采集次數(shù)。

2.2 野外調(diào)查與標本采集

在野外沿著調(diào)查路線仔細搜尋林地內(nèi)地表、枯死立木、倒伏枯朽木上的真菌子實體，發(fā)現(xiàn)后首先記錄編號、采集時間、采集地信息(具體地點、海拔高度、坡向、坡位、林地類型等)。再觀察描述其子實體大小(Bas方案[7])、顏色、形狀、氣味、著生方式等。記錄描述后，借助數(shù)碼相機(尼康D90或尼康D810等)拍攝其生態(tài)照、正面照、側(cè)面照及被面(菌褶)照。拍照完畢后進行標本采集，選取發(fā)育成熟的小脆柄菇屬真菌子實體2～5株，用移植鏟輕輕挖掘撥開周圍腐質(zhì)層，確保大型真菌完整；將采集到的標本放入大小合適、透氣性較好的收集帶中(信封等)，接著將收集袋封口后放入保鮮箱作野外暫時保存處理；采集完成后，在實驗室用電熱恒溫鼓風干燥箱(LDO-9246A，上海)進行集中干燥處理保存；初次在80 ℃下干燥30 min，進行子實體內(nèi)部殺蟲，第2次將溫度調(diào)整為40 ℃干燥4 h；最后將標本取出平攤在試驗臺上一周進行自然通風干燥處理，待標本完全干燥后放入標本柜統(tǒng)一保存?zhèn)溆?，標本按編號現(xiàn)存放于沈陽農(nóng)業(yè)大學林學院真菌標本室(HMFCSAU)。

2.3 微觀形態(tài)結(jié)構(gòu)特征觀察

對于野外采集到的子實體，回到實驗室內(nèi)立刻做微觀鏡檢，主要觀察擔子、孢子、囊狀體和菌絲等微觀形態(tài)特征。具體步驟：首先選取小脆柄菇屬真菌子實體不同部位材料，采用徒手切片法，以蒸餾水為浮載劑制作臨時玻片標本，在光學顯微鏡Motic(BA210)下40～1 000倍范圍內(nèi)調(diào)整觀察孢子等其他結(jié)構(gòu)微觀特征，并隨機選取20個成熟的孢子測量大小，同時繪出孢子、擔子、菌絲等顯微結(jié)構(gòu)線條圖。

2.4 菌種鑒定

采用傳統(tǒng)形態(tài)學分類方法，依據(jù)采集到的小脆柄菇屬真菌標本信息，將其形態(tài)特征與國內(nèi)外工具書[8-28]和相關(guān)文獻資料[29-37]進行比對，并在Index fungorum、Mcobank等專業(yè)網(wǎng)站查詢小脆柄菇屬真菌物種記錄資料，鑒定小脆柄菇屬真菌物種，最后查閱國內(nèi)資料以確認小脆柄菇屬真菌中國新紀錄種以及遼寧省新紀錄種。

3 結(jié)果與分析

3.1 沈陽天柱山小脆柄菇屬真菌資源名錄

通過2年調(diào)查研究，在天柱山區(qū)域內(nèi)共計采集到小脆柄菇屬真菌標本25份，形態(tài)鑒定結(jié)果顯示：共有小脆柄菇屬真菌13種，含中國新紀錄種2種，遼寧新紀錄種6種；其中5種可食用，2種不可食用，食藥用不明6種；生于闊葉林8種，針葉林1種，針闊混交林5種，林緣裸地2種，草地1種，腐朽木上1種。各種生境具體分布情況見表1。

表1 沈陽天柱山小脆柄菇屬真菌名錄

3.2 中國新紀錄種描述

3.2.1畢夫朗小脆柄菇(Psathyrellabifrons(Berk.) A. H. Sm.)

形態(tài)特征：子實體很小，菌蓋直徑為2.0～3.0 cm，赭棕色或淺赭色，濕時菌蓋赭褐色，菌蓋中央顏色稍深，干時奶油色，圓錐形或鐘形；隨著子實體的生長，菌蓋增大，變?yōu)槠交?，水浸狀；生長初期具放射狀條紋，菌蓋邊緣具絲狀殘余物，略向上反卷；菌肉白色，薄；菌褶貼生；由幼齡時的奶油色逐漸變?yōu)楹稚?，成熟后變?yōu)樽虾稚?；菌柄灰白色近白色；菌柄長4.0～6.0 cm，直徑為0.1～0.3 cm，菌柄基部具白色纖毛，無菌環(huán)，菌柄脆，菌肉白色，纖維細長，實心逐漸變?yōu)榭招?圖1)。無特殊氣味；無特殊化學反應(yīng)(憑證標本：HMFCSAU98；采集人：高國平，岑進；采集時間：2018年7月11日)。

圖1 畢夫朗小脆柄菇子實體

孢子深褐色，光滑，橢球形，具1個小油滴，具芽孔，擔孢子大小為(7.0～9.5)μm×(4.5～5.5)μm，擔子(19.0～22.0)μm×(4.0～6.0)μm，棒狀或網(wǎng)球拍狀，具4個小梗；擬擔子(23.0～29.0)μm×(5.0～6.5)μm，臘腸形；厚壁菌絲，具隔，菌褶菌絲直徑為2.8～3.3 μm，菌蓋菌絲直徑為3.3～5.5 μm，菌柄菌絲直徑為3.3～4.4 μm(圖2)。

a.孢子；b.擔子；c.擬擔子；d.菌褶菌絲；e.菌蓋菌絲；f.菌柄菌絲。

3.2.2菜豆孢小脆柄菇(Psathyrelladelineate(Pk.) Smith)

形態(tài)特征：子實體很小，菌蓋直徑1.5～3.0 cm，近平展，中部稍凸起，邊緣稍具絲狀物；深銹棕色；表面具皺紋，被暗黃色顆粒狀涂層；菌褶貼生，密；灰褐色，菌柄長5～7 cm，直徑為0.5～1.5 cm，白色，無菌環(huán)，纖維較長(圖3)。無特殊氣味(憑證標本：HMFCSAU61；采集人：高國平，岑進；采集時間：2018年7月9日)。

孢子瘦，菜豆狀，具1個小油滴，大小為(6.5～9.0)μm×(4.5～5.5)μm，深紫棕色，孢子表面具指尖狀凸起瘤；擔子(28.0～30.0)μm×(5.0～8.0)μm，長棒狀，無色，具4個小梗；擬擔子(23.0～29.0)μm×(5.0～7.0)μm，棒狀，頂端鈍圓，基部稍窄；無色；厚壁菌絲，具隔，菌褶菌絲直徑為3.0～5.0 μm，菌蓋菌絲直徑為2.0～5.0 μm，菌柄菌絲直徑為3.0～4.0 μm(圖4)。

圖3 菜豆孢小脆柄菇子實體

a.孢子；b.擔子；c.擬擔子；d.菌褶菌絲；e.菌蓋菌絲；f.菌柄菌絲。

4 結(jié)論與討論

筆者從采集到的25份沈陽天柱山小脆柄菇屬真菌標本中共鑒定出小脆柄菇屬真菌13種，其中中國新紀錄種2種，分別為：畢夫朗小脆柄菇(Psathyrellabifrons)、菜豆孢小脆柄菇(P.delineata)；遼寧新紀錄種有6種，分別為：草地小脆柄菇(P.campestris)、綿毛小脆柄菇(P.gossypina)、丸形小脆柄菇(P.piluliformis)、微小脆柄菇(P.pygmaea)、灰褐小脆柄菇(P.spadiceogrisea)、鱗小脆柄菇(P.squamosa)；明確了每種小脆柄菇的生境，豐富了天柱山區(qū)域的小脆柄菇屬真菌資源多樣性。

小脆柄菇屬真菌因生長環(huán)境的不同，同一物種往往在宏觀形態(tài)特征上表現(xiàn)出較大的差異。本研究采自中國遼寧的畢夫朗小脆柄菇菌柄直徑為0.2～0.3 cm，而Jordan[38]記錄畢夫朗小脆柄菇菌柄直徑為0.2～3.5 cm；國外學者在北美調(diào)查發(fā)現(xiàn)菜豆孢小脆柄菇的菌蓋直徑為3～10 cm，菌柄長6～10 cm[39]，而本研究結(jié)果表明采自中國遼寧的菜豆孢小脆柄菇的菌蓋直徑為1～3 cm，菌柄長5～7 cm，且二者子實體大小差異較大，這可能和降雨量有密切關(guān)系，一般夏季雨水少時子實體生長不充分，個體大小和外部特征會出現(xiàn)明顯差異。此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，沈陽天柱山區(qū)域內(nèi)的小脆柄菇屬真菌有13種，與趙東岳等[40]在沈陽地區(qū)對大型真菌的初步調(diào)查并未發(fā)現(xiàn)小脆柄菇屬真菌相比填補了沈陽地區(qū)小脆柄菇屬真菌資源調(diào)查這一空白，且此次調(diào)查成果進一步豐富了遼寧省大型真菌資源名錄。從國內(nèi)該屬真菌的報道情況看，加大對小脆柄菇屬真菌資源的調(diào)查依然是接下來的重點研究方向，此外，對該屬真菌產(chǎn)生的木質(zhì)素降解酶的研究也是未來造紙工業(yè)的研究熱點之一。