唐艷梅，蔡 葦，李 冰，趙紫偉，段姚俊

（1.云南經(jīng)濟(jì)管理學(xué)院醫(yī)學(xué)院，云南昆明 650100；2.云南同創(chuàng)檢測技術(shù)股份有限公司，云南昆明 650100；3.云南省中醫(yī)院，云南昆明 650010）

中藥重金屬含量超標(biāo)已成為國內(nèi)外用藥安全和人體健康的焦點(diǎn)問題，也是制約中藥走向現(xiàn)代化和國際化的瓶頸［1］，目前采用的評價方式均是測定藥材中重金屬含量，但水煎劑是中醫(yī)傳統(tǒng)劑型［2］，藥材中重金屬需經(jīng)過煎煮后才能進(jìn)入人體，因此研究復(fù)方湯劑中其含量更有實(shí)際意義。電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）具有靈敏度好、精密度高、線性范圍寬、速度快等優(yōu)點(diǎn)，是微量、痕量元素測定的較佳選擇［3-4］，故本實(shí)驗(yàn)采用該方法測定中藥方劑藥材及其煎煮液中5 種重金屬（Pb、Cd、Cu、Cr、Hg）及As 的含量，并對煎煮液中其溶出特性進(jìn)行考察，以期為探討中藥安全性提供更客觀的評價方式。

1 材料

1.1 藥材 麻黃10 g、杏仁10 g、石膏20 g、玄參10 g、麥冬10 g、紫蘇梗10 g、粉葛15 g、蟬蛻10 g、僵蠶10 g、蒲公英15 g、陳皮10 g、法半夏10 g、炒枳殼10 g、桔梗10 g、茯苓10 g、木香10 g、太子參20 g、甘草10 g，總重210 g，購于云南白藥集團(tuán)飲片分公司、云南省藥材公司、昆明道地中藥飲片廠、昆明市藥材公司、成都康美藥業(yè)有限公司等，由云南省中醫(yī)院老干科副主任李冰醫(yī)師開具藥方，在云南省中醫(yī)院藥劑科藥房抓取二副，藥材均經(jīng)其鑒定為正品，符合相關(guān)要求。

1.2 儀器 NexION? 350 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（美國PE 公司）；Multiwave3000 微波消解儀［奧地利安東帕（中國）公司］；QA10 超純水儀（美國Millipore 公司）；RE-201D 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州寶晶電子科技有限公司）。

1.3 試劑 銅、鉛、鎘、砷、鉻、汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 μg／mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心）；ICP-MS 調(diào)諧液及內(nèi)標(biāo)液（美國PE 公司）。硝酸（體積分?jǐn)?shù)≥69.0%，Trace SELECT?，美國Sigma Fluka 公司）；過氧化氫（質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為30%，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；水為GB／T 6682 規(guī)定的一級水。

2 方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備 在線加入內(nèi)標(biāo)溶液，分別吸取標(biāo)準(zhǔn)空白溶液和不同質(zhì)量濃度鉻、銅、砷、鎘、汞、鉛標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，注入ICP-MS 儀器中。在選定的儀器參數(shù)下，以待測元素、對應(yīng)內(nèi)標(biāo)元素含量的比值為橫坐標(biāo)（X），待測元素、對應(yīng)內(nèi)標(biāo)元素質(zhì)荷比強(qiáng)度的比值為縱坐標(biāo)（Y），得到系列標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

2.2 樣品制備 將1 副藥方中藥材用粉碎機(jī)粉碎后過100 目篩，裝入干凈的棕色玻璃瓶中；另1 副遵照醫(yī)囑煎煮3 次，合并藥液，共得1 000 mL，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至100 mL。

準(zhǔn)確稱取粉碎的樣品0.5 g，并精密移取10 mL 濃縮湯液，加入3 mL 硝酸，預(yù)消解后蒸發(fā)濃縮至約2 mL，再加入5 mL 硝酸進(jìn)行微波消解，冷卻后將消解液轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻，作為供試品溶液。同法制備空白對照溶液。

2.3 儀器參數(shù) 按照操作規(guī)程調(diào)整ICP-MS 儀器至最佳工作狀態(tài)，采用在線加入內(nèi)標(biāo)校正定量分析方法進(jìn)行測定，分別選擇72Ge、103Rh、185Re 作為輕、中、重質(zhì)量元素的內(nèi)標(biāo)液，具體見表1。

表1 儀器參數(shù)

3 結(jié)果

3.1 線性關(guān)系 分別S／N ＝3、S／N ＝10 為檢出限、定量限，結(jié)果見表2。

表2 各元素線性關(guān)系

3.2 精密度、加樣回收率試驗(yàn) 取藥材粉末適量，平行測定6 次，測得Cr、As、Cu、Cd、Pb、Hg 峰面積RSD 分別為2.25%、3.74%、3.53%、2.81%、8.23%、0.92%；取藥液適量，平行測定6 次，測得其峰面積RSD 分別為2.29%、6.14%、7.70%、4.76%、5.34%、2.59%，可知各元素精密度良好，滿足檢測要求。另取藥材、煎煮液適量，加入低、中、高質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.2”項(xiàng)下方法處理，平行測定6 次，結(jié)果見表3～4。

表3 藥材中各元素加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

表4 煎煮液中各元素加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

3.3 樣品含量、浸出率測定 同時測定藥材及其煎煮液中各元素的含量，平行2 次，并計(jì)算浸出率，結(jié)果見表5。

表5 各種元素含量、浸出率測定結(jié)果

4 討論

ICP-MS 能快速、準(zhǔn)確地檢測無機(jī)元素，即使是納米級別，而且在形態(tài)檢測方面有無可比擬的檢測優(yōu)勢［5-6］。因此，本實(shí)驗(yàn)采用該方法測定中藥方劑藥材及其煎煮液中5 種重金屬（Pb、Cd、Cu、Cr、Hg）及As 的含量。

藥材中Cr 含量高于加拿大草藥材限值（≤0.2 μg／g），而傳統(tǒng)中藥以水為溶劑，其浸出率很低，僅為2.44%。Cr有Cr（Ⅲ）、Cr（Ⅵ）2 種價態(tài)，前者是生物體必需的營養(yǎng)元素，而后者為一級致癌物，故價態(tài)分析是以后的重點(diǎn)研究內(nèi)容［7］。

As 在藥材中的含量較高，浸出率達(dá)到37.64%，雖然未超過標(biāo)準(zhǔn)限值2.0 mg／kg，但每天攝取一副藥時，該元素就攝取了0.035 8 mg。根據(jù)WHO 建議的安全因子1×10-2mg，以及美國環(huán)境保護(hù)局建議的1×10-3mg［8-9］，可知藥材中As 具有致癌風(fēng)險，故對其風(fēng)險評價要加以重視。砷價態(tài)不同，其毒性差異也巨大，故為了科學(xué)地判斷中藥材安全性，有必要對毒性較大的無機(jī)砷含量進(jìn)行檢測［10］。

根據(jù)WHO 及美國環(huán)境保護(hù)局對Pb、As、Cu、Cd、Hg的耐受限量值規(guī)定［11］可知，藥材中Pb、Cd、As 超過每日攝入標(biāo)準(zhǔn)，但由于中藥湯劑不是每日必需品，僅限于生病時才服用，故不會對身體造成危害。另據(jù)《中醫(yī)藥-中藥材重金屬限量》 國際標(biāo)準(zhǔn)與2015 年版《中國藥典》 規(guī)定，中藥材中各元素限度分別為Pb≤5.0 μg／g、As≤2.0 μg／g、Cd≤0.3 μg／g、Cu≤2.0 μg／g、Hg≤0.2 μg／g，本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)中藥方劑藥材中Cu 超標(biāo)，其余元素均符合要求，經(jīng)過常規(guī)煎煮后超過60%的有害元素并未進(jìn)入湯劑，后者中重金屬含量遠(yuǎn)低于2015 年版《中國藥典》 規(guī)定［12］。因此，將中藥進(jìn)行煎煮后服用可有效地降低Pb、Cd、As、Cu、Hg等有害元素進(jìn)入患者身體的風(fēng)險，從而提高其安全性。

4 結(jié)論

要客觀地評價中藥中有害元素含量，需綜合考慮中藥制作方法和服用方式。有害金屬元素浸出率測定是一種較為科學(xué)合理的指標(biāo)，當(dāng)其合理超過人體攝入限量時，應(yīng)綜合評估在中藥方劑中的浸出率，這樣才能作出科學(xué)判斷，為相關(guān)評價提供更客觀的方式。