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        牛病毒性腹瀉診斷方法及綜合防治

        2021-03-05 17:50:11
        畜牧獸醫(yī)雜志 2021年5期
        關(guān)鍵詞:檢測

        (武威市畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究院,甘肅 武威 733000)

        牛病毒性腹瀉病毒(簡稱BVDV)是一種與胃腸道、呼吸系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)相關(guān)的重要病原體,具有較高的傳染性,在全世界內(nèi)廣泛流行。動物感染此類病毒后,會導(dǎo)致動物生產(chǎn)機能下降、產(chǎn)畸形胎或死胎、產(chǎn)奶量下降、食欲減退、呼吸困難等癥狀,給養(yǎng)殖農(nóng)戶帶來巨大的經(jīng)濟損失。在妊娠早期,病毒有通過胎盤的能力,導(dǎo)致胎兒免疫耐受,生產(chǎn)出持續(xù)感染的(PI)小牛犢。該病毒在牛犢內(nèi)長期存在,以各種方式終身排出病毒,并形成傳染源,造成病毒在畜群中難以被徹底消滅。持續(xù)感染的動物通常比短暫或急性感染的動物更有效地傳播BVDV,因為它們能夠在一生中排出大量的病毒,被認為是主要的BVDV庫。在我國牛群中,BVDV持續(xù)感染率高達2.4 %,遠遠超過很多歐美國家。因此必須要采取有效的防控措施,來阻止病毒的傳播。由于病毒感染的性質(zhì),到目前為止,還沒有完全治愈該病的方法。

        1 病原學(xué)特征

        BVDV屬于黃病毒科瘟病毒屬的成員,為單股正鏈 RNA 病毒,基因組大小約12.5 kb,病毒粒子在電鏡下觀察成球形,直徑大約為40~60 nm。按照基因序列的差異,BVDV可分為BVD-1和BVD-2兩種基因型。根據(jù)病毒感染細胞后,是否產(chǎn)生細胞病變(CPE)。將 BVDV分成兩種不同的生物型,致細胞病變型(CP)和非致細胞病變型(NCP)。感染病毒后,兩種生物型引起的癥狀不同,主要表現(xiàn)在疾病的發(fā)生和嚴(yán)重程度上不同,這兩種生物型在牛群中都會引起疾病。實驗表明,牛感染的90 %以上的病毒以及所有PI動物均由NCP引起。據(jù)報道,CP型與已經(jīng)分離的黏膜病的暴發(fā)有關(guān)系。NCP型在自然界和PI動物中最常見,它對淋巴細胞、白細胞、呼吸道有很強的青睞性。CP型的BVDV起源于NCP的突變菌株。NCP與90 %以上的BVDV感染有關(guān)系,可引起輕度感染TI和重度感染PI動物產(chǎn)生。兩種生物型引起的癥狀不同,主要表現(xiàn)在病毒感染后,疾病的發(fā)生和嚴(yán)重程度上不同。

        2 流行特點

        由于氣候多變,管理不善,畜體抵抗力下降等因素,造成牛病毒性腹瀉病在我國冬春季較為高發(fā)。BVDV可通過直接接觸病畜傳播,也可通過間接吸入受病毒污染的物質(zhì)傳播。經(jīng)懷孕母畜胎盤傳播時,會導(dǎo)致出生的小牛發(fā)展為持續(xù)性感染(PI)牛,終生帶毒、排毒,成為重要的傳播來源。該病的傳染源多為患病牛,患病牛的糞便、分泌物、部分臟器排出病毒。水平傳播主要發(fā)生在通過接觸病毒脫落的動物,常見的傳輸介質(zhì)包括:飼料、水、設(shè)備等鼻鉗、奶瓶奶嘴和針頭、觸診、分泌物和排泄物(尿液、糞便、粘液、牛奶),馬蠅、馬蠅、頭蠅也有已證明能傳播BVDV。垂直傳播介質(zhì)包括:受污染的精液、胚胎移植和改良活疫苗。持續(xù)感染的動物持續(xù)脫落大量BVDV,存在于全身分泌物中,包括鼻涕、唾液、精液、糞便等。這些動物作為一個主要的病毒庫來傳播病毒。迄今為止,該病毒已從40多個物種和血清學(xué)證據(jù)中分離發(fā)現(xiàn),這表明大多數(shù)野生反芻動物也會感染BVDV。

        3 癥狀表現(xiàn)

        病牛初期精神沉郁、食欲減退或廢絕、體溫升高至39~41 ℃、白細胞數(shù)量減少、發(fā)燒、腹瀉、脫水、消化道粘液病變、淋巴組織壞死、蹄部炎癥、鼻腔有漿液性到粘液性。一般來說,腸系膜淋巴結(jié)腫大,水腫,腫脹出血性。在流產(chǎn)的胎兒中,主要病變包括結(jié)膜炎、肺炎,胸腺發(fā)育不全和非特異性心肌炎。胎盤病變主要包括血管炎,水腫,充血和出血伴有一些變性和壞死。組織病理學(xué)顯示病變較為嚴(yán)重,外周血淋巴細胞減少和出血,全身淋巴結(jié)和淋巴濾泡。

        4 診斷方法

        4.1 血清學(xué)診斷

        除了患病動物所表現(xiàn)的臨床癥狀,如腹瀉、糞便稀薄、體溫升高、眼鼻部出現(xiàn)漿液等典型癥狀外,血清學(xué)診斷也是BVDV最常用的檢測方法。通過采集血清,檢測血清中BVDV特異抗體來間接診斷。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、試管凝集試驗、瓊脂擴散試驗等。ELISA檢測具有簡便、高效、特異性強、高通量等優(yōu)點,技術(shù)較為成熟,且對相關(guān)實驗人員要求比較低,適合對樣本的快速檢測。

        4.2 分子生物學(xué)診斷

        主要包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)、實時定量 PCR(RT-PCR)、核酸探針(Nucleic Acid Probe)、環(huán)介導(dǎo)等溫擴增(LAMP)等技術(shù),對BVDV進行快速診斷。這些方法各有優(yōu)點和不足。其中,常規(guī)PCR比較簡便易行,多用于不同種屬的鑒別檢測,但容易出現(xiàn)假陽性;熒光定量PCR具有高靈敏度、高通量等優(yōu)勢,但對引物和探針的設(shè)計要求比較高;LAMP技術(shù)可對乳制品、組織等樣本進行檢測,具有操作簡便、可視性強、特異性高和試驗條件要求低等優(yōu)點,但對引物設(shè)計要求很高。

        5 防治措施

        5.1 提高飼養(yǎng)管理水平

        定期對飼養(yǎng)環(huán)境進行消毒處理,保持圈舍的清潔通風(fēng),冬春季主要防寒保暖,為牛提供一個舒適的生產(chǎn)環(huán)境,減少疾病的發(fā)生。此外,要合理搭配飼料比例,滿足牛的生長發(fā)育需求,增強牛的抵抗力、增強體質(zhì),預(yù)防疾病的發(fā)生。

        5.2 積極做好免疫接種

        通過疫苗接種,讓動物體內(nèi)產(chǎn)生大量的抗體來預(yù)防BVDV,降低發(fā)病率。目前,國內(nèi)已經(jīng)研發(fā)了很多疫苗,如牛粘膜病弱毒疫苗、滅活疫苗,都可以用于疾病的預(yù)防。

        5.3 嚴(yán)格做好檢疫工作

        對牛群定期進行檢查,發(fā)現(xiàn)患病動物或者可疑動物,及時進行隔離。做到“早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早治療”,對圈舍進行全面消毒,對健康動物進行緊急免疫,控制傳染源。對于嚴(yán)重的患病動物,不計得失,盡快淘汰。對引入的外來牛,要嚴(yán)格進行檢疫,確保完全健康方可進行混養(yǎng)。

        5.4 加強對PI動物的檢測

        目前世界上許多國家采用的防控方案,主要依靠對PI動物的檢測,消滅它們或阻止它們返回牧群。在早期階段,特別是出生后不久,檢測PI動物是非常有益的。執(zhí)行BVDV控制程序,可用的診斷試驗,如病毒分離(VI)、免疫組織化學(xué)(IHC),用抗原捕獲ELISA(ACE)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測PI牛。每種檢測BVDV的方法都有其優(yōu)點、缺點和適用于不同的診斷情況。根據(jù)動物年齡選擇合適的抽樣策略,優(yōu)化診斷試驗。

        6 結(jié)束語

        綜上所述,牛病毒性腹瀉的發(fā)病率較高,給養(yǎng)殖戶帶來巨大的經(jīng)濟損失,如果不及時進行治療,會導(dǎo)致極高的病死率。因此,在日常的養(yǎng)殖中,要加強飼養(yǎng)管理,增強動物的抗病能力,定期對牛群開展檢疫工作,定期進行相關(guān)檢查,為減少疾病的發(fā)生率提供科學(xué)支撐。

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