左 佳

（河北省邢臺(tái)市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北 邢臺(tái) 054001）

金黃色葡萄球菌是自然界中普遍存在的病原菌，若是含水量及含淀粉量較多的食品被此球菌污染，在適宜溫度下只需8～10h便會(huì)產(chǎn)生大量腸毒素，從而引發(fā)食物中毒。其中，金葡菌腸毒素所導(dǎo)致的食物中毒占比高達(dá)33%~45%左右。因此，需重點(diǎn)對(duì)此病菌進(jìn)行檢測與預(yù)防。

1 金葡菌腸毒素（SE）分析

1.1 SE的化學(xué)組成與理化特性

金葡菌腸毒素屬于胞外蛋白質(zhì)的一種，不同型之間的分子量較為相似，存在較為集中的谷氨酸、賴氨酸等氨期基酸。SE具有水溶性與鹽溶性特點(diǎn)，對(duì)蛋白酶的抵御能力較強(qiáng)，耐熱性極佳，沸水中30min內(nèi)活性不會(huì)喪失。失活溫度為218~248℃，且需30min才可完全消除其毒性。因其對(duì)蛋白酶分解抵抗能力強(qiáng)，因而易侵害胃粘膜。

1.2 SE的生物活性與致病作用

針對(duì)T細(xì)胞而言，SE的有絲分裂原作用較為顯著，可將多克隆T細(xì)胞進(jìn)行非特異性激活，且不必事先進(jìn)行致敏，也不具備種屬特異性。SE會(huì)與輔佐細(xì)胞MHC-Ⅱ類分子相結(jié)合，針對(duì)T細(xì)胞受體協(xié)同發(fā)揮作用。在有絲分裂原作用下，T細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用會(huì)被激活，會(huì)通過抑制或誘導(dǎo)作用而使T細(xì)胞釋放干擾素，或IL-2，并對(duì)后者進(jìn)行表達(dá)，從而于體內(nèi)或體外對(duì)體液及細(xì)胞免疫產(chǎn)生抑制效果。SE的不同種類的血清型均會(huì)導(dǎo)致食物中毒，使之食用者出現(xiàn)嘔吐、腹瀉現(xiàn)象，并出現(xiàn)體溫升高或血小板下降現(xiàn)象，且存在心率加快等多種癥狀。

2 常用的金葡菌腸毒素的檢測方法分析

2.1 生物學(xué)檢測技術(shù)

此種動(dòng)物敏感實(shí)驗(yàn)是對(duì)患者的嘔吐物或感染病的食物進(jìn)行采集，或?qū)A菌株培養(yǎng)液進(jìn)行分離，將其注射于試驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)觀察病態(tài)反應(yīng)，從而對(duì)待測物中是否含有金葡萄腸毒素進(jìn)行判定的方法。但此方法靈敏度不佳且流程復(fù)雜，必須使用猴或豚鼠作為試驗(yàn)動(dòng)物，推廣應(yīng)用相對(duì)困難。相關(guān)專家研制出了利用兔血T-細(xì)胞的體外檢測方法，無需使用動(dòng)物進(jìn)行檢測，靈敏度可提升至1pg/mL，實(shí)現(xiàn)了可定量且高靈敏度的檢測，且可節(jié)約檢測成本。

2.2 免疫血清學(xué)檢測技術(shù)

可實(shí)現(xiàn)定量檢測的方法需在免疫學(xué)技術(shù)基礎(chǔ)上而實(shí)現(xiàn)的，免疫方法有多個(gè)類別，如電化學(xué)免疫法、化學(xué)發(fā)光免疫法，熒光免疫法等，這些方法均需利用特異性抗體進(jìn)行抗原的捕獲，再將其轉(zhuǎn)化成光學(xué)或電信號(hào)，從而測定腸毒素含量，此方法的優(yōu)點(diǎn)是靈敏度較高且檢測耗時(shí)短，可實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)檢測。但檢測成本高是其主要應(yīng)用弊端。目前已研制出了商業(yè)化試劑盒檢測方法，但并不是所有試劑盒均能測定腸毒素的類別。同時(shí)，利用部分免疫學(xué)方法檢測食品中的腸毒素時(shí)診斷結(jié)果并不精準(zhǔn)。針對(duì)新型腸毒素檢測方面，目前的免疫學(xué)方法效果不佳，迫切需要進(jìn)一步開發(fā)新的檢測方法。

2.3 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測技術(shù)

此方法是指利用敏感性較高且具有特異特征的聚合酶鏈反應(yīng)而進(jìn)行金葡萄基因表達(dá)腸毒量檢測的方法。PCR技術(shù)的特異性強(qiáng)，具有高敏感性，良好的可重復(fù)性，可在短時(shí)間內(nèi)精準(zhǔn)診斷出病原，無法實(shí)現(xiàn)定量分析是其弊端所在。由于部分菌株有產(chǎn)毒基因，但由于此基因未被激活因而不能表達(dá)毒素，所以此方法的檢測結(jié)果并不能將反應(yīng)體內(nèi)的生物學(xué)效應(yīng)完全反應(yīng)出來。因而此方法在食品檢測中應(yīng)用并不廣泛。

2.4 生物傳感器檢測技術(shù)

食品毒素測方面的生物傳感器有三種，一是電化學(xué)免疫傳感器，此技術(shù)融合了電化學(xué)與生物技術(shù)，可對(duì)酶電極進(jìn)行化學(xué)放大，也可識(shí)別出抗原抗體。二是光學(xué)生物傳感器，此方法無需參比電極，電磁場對(duì)其信號(hào)干擾較小，且具有較高的靈敏性。三是壓電晶體免疫傳感器，此方法融合了壓電質(zhì)量傳感器及特異性免疫反應(yīng)，可對(duì)液相中的SEB進(jìn)行直接檢測，所應(yīng)用儀器并不復(fù)雜，但靈敏度較低。

3 結(jié)語

食源性金黃葡萄球菌腸毒素檢測方法中，主要技術(shù)是血清學(xué)方法，且如聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的應(yīng)用率也較高。未來需進(jìn)一步縮小生物傳感器的體積，提升其靈敏度與實(shí)用性，從而提高其利用率，有利于食源性金黃葡萄球菌腸毒素檢測質(zhì)效與精準(zhǔn)度的提升。