柳東陽(yáng)， 周正富， 吳政卿， 李文旭， 晁岳恩， 徐福新， 雷振生，

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，河南 鄭州 450002； 2.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院小麥研究所，河南 鄭州 450002)

小麥子粒蛋白主要由清蛋白、球蛋白和面筋蛋白組成，面筋蛋白作為種子儲(chǔ)藏蛋白，約占小麥子粒蛋白的80%。面筋蛋白決定著面粉的加工品質(zhì)，可分為麥谷蛋白和醇溶蛋白，前者賦予面團(tuán)彈性，后者賦予面團(tuán)黏性和延展性[1]。酸性聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)是分離醇溶蛋白最常用的方法，根據(jù)電泳遷移率的不同，可將其分為3類：α/β-，γ-和ω-醇溶蛋白，分別占其總量的55%，30%和15%[2-3]。其中ω-醇溶蛋白主要由大量谷氨酰胺、脯氨酸和苯丙氨酸組成，占氨基酸殘基總數(shù)的80%；ω-醇溶蛋白缺少甲硫氨酸和半胱氨酸，故又將其稱作貧硫醇溶蛋白[4-6]。有研究表明，所有ω-醇溶蛋白基因由位于第1部分同源染色體的短臂上的Gli-1位點(diǎn)編碼[4,7-8]。普通小麥中ω-醇溶蛋白基因有15～18個(gè)拷貝，但大多數(shù)被認(rèn)定為是假基因[9-10]。ω-醇溶蛋白的基本結(jié)構(gòu)可分為4個(gè)區(qū)域：19個(gè)氨基酸殘基組成的信號(hào)肽、10～11個(gè)氨基酸殘基組成的非重復(fù)性N-末端、90%～96%的氨基酸組成的重復(fù)區(qū)域和10～11個(gè)氨基酸殘基組成的C-末端[11-13]。根據(jù)翻譯后N端序列的不同，可分為ARQ/E-，KEL-，SRL-和TRQ-4種類型[9]。已有研究表明，前2種類型的ω-醇溶蛋白基因(ARQ/E，KEL型)位于小麥1A，1D染色體上，所編碼的蛋白分別屬于ω-1和ω-2醇溶蛋白；SRL-型基因位于1B染色體上，編碼的蛋白屬于ω-5醇溶蛋白[14]。研究表明，ω-醇溶蛋白基因等位變異對(duì)面團(tuán)特性的作用，是因?yàn)槭艿脚cGli-1位點(diǎn)緊密連鎖的Glu-3位點(diǎn)的影響[15]。不同Gli-B1位點(diǎn)對(duì)小麥品質(zhì)的作用不同，其中Gli-B1k小麥面團(tuán)強(qiáng)度起顯著負(fù)向作用，而Gli-B1b位點(diǎn)小麥面團(tuán)強(qiáng)度起正向作用[16]。BRANLARD等[17]研究證明，Gli-D1位點(diǎn)對(duì)小麥加工品質(zhì)的影響是正向效應(yīng)。WANG等[18]利用高效毛細(xì)管電泳和反相高效液相色譜技術(shù)，對(duì)113個(gè)小麥品種的醇溶蛋白進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，Gli-D1 位點(diǎn)與面團(tuán)強(qiáng)度和面包體積密切相關(guān)。有研究表明，ω-醇溶蛋白譜帶ω11，ω13.5，ω16，ω20，ω30，ω32，ω37與小麥面筋彈性、黏性、延展性及膨脹性呈正相關(guān)，ω2，ω4，ω14，ω19與小麥面筋強(qiáng)度呈顯著正相關(guān)[19-20]。但有研究表明，ω-醇溶蛋白因不能形成分子間二硫鍵，對(duì)小麥加工品質(zhì)的影響相對(duì)較小，3種醇溶蛋白均能顯著增加面包體積，ω-醇溶蛋白對(duì)面包體積的增加卻最小，而對(duì)面筋強(qiáng)度的降低作用最強(qiáng)[21-23]。此外，ω-醇溶蛋白是一種可以誘發(fā)由T-細(xì)胞介導(dǎo)慢性遺傳性疾病——乳糜瀉(celiac disease，CD)的主要外在刺激蛋白。ENSARI等[24-25]研究表明，乳糜瀉患者服用純化的ω-醇溶蛋白后，體內(nèi)黏膜淋巴細(xì)胞會(huì)明顯增多，表明ω-醇溶蛋白可以誘發(fā)免疫反應(yīng)進(jìn)而損害小腸上皮細(xì)胞，并確定了3種可誘發(fā)CD發(fā)生的T-細(xì)胞免疫肽段，即Gli-ωt：PQQPFPQQ，Gli-ω1：PFPQPQQPF，Gli-ω2：PQPQQPFPW。本研究以黃淮麥區(qū)主推小麥品種鄭麥369為材料，利用簡(jiǎn)并引物和PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)其ω-醇溶蛋白基因進(jìn)行克隆和序列分析，以期明確其基因組內(nèi)ω-醇溶蛋白基因的數(shù)量和特征，為ω-醇溶蛋白功能研究和小麥品質(zhì)改良提供遺傳基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本研究所用材料是小麥品種鄭麥369。該品種為半冬性小麥品種，2017年完成國(guó)家黃淮冬麥區(qū)南片冬水組試驗(yàn)程序，2018年通國(guó)家農(nóng)作物品種審定委員會(huì)審定。由河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院小麥研究所豐優(yōu)育種室提供。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 基因組DNA提取及PCR擴(kuò)增 鄭麥369種子在室溫、黑暗條件下萌發(fā)15 d后，用Ezup柱式植物基因組DNA抽提試劑盒(生工生物工程有限公司)提取幼苗的基因組DNA?；蚪MDNA經(jīng)過(guò)RNase處理后，將質(zhì)量濃度調(diào)整到50 mg·L-1，備用。根據(jù)GenBank中已發(fā)表ω-醇溶蛋白基因序列的保守性，設(shè)計(jì)7對(duì)簡(jiǎn)并引物(表1)，引物由上海生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。選用高保真聚合酶phusion.HS.Ⅱ.pdymerase進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?8 ℃預(yù)變性30 s；98 ℃變性10 s，65 ℃退火20 s，72 ℃延伸30 s，35個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸10 min。為了確保擴(kuò)增的忠實(shí)性，本試驗(yàn)在PCR反應(yīng)體系中選用的是高保真聚合酶phusion.HS.Ⅱ.pdymerase，以及較高的退火溫度。

表1 ω-醇溶蛋白基因克隆的保守引物Table 1 Conserved primers for ω-gliadin gene cloning

1.2.2 PCR產(chǎn)物純化及克隆測(cè)序 擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1.0 %瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，然后用SanPrep柱式DNA膠回收試劑盒(生工生物工程有限公司)對(duì)目的片段進(jìn)行回收及純化。隨后將回收的PCR產(chǎn)物連接到pEASY-Blunt3 Cloning Vector(北京全式金生物技術(shù)有限公司)載體上，并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌Trans1-T1感受態(tài)細(xì)胞中，隨機(jī)挑選一定數(shù)量的單菌落，通過(guò)菌液PCR鑒定陽(yáng)性克隆，酶切驗(yàn)證后送上海生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司測(cè)序。

1.2.3 序列分析、CD毒性肽識(shí)別和系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)構(gòu)建 序列檢測(cè)結(jié)果用DNA STAR Lasergene7進(jìn)行序列拼接分析。應(yīng)用FGENESH在線軟件進(jìn)行基因結(jié)構(gòu)分析和氨基酸序列預(yù)測(cè)。利用NCBI提供的在線BLAST(http：//www．ncbi．nlm．nih．Gov/BLAST)工具對(duì)測(cè)序得到的序列進(jìn)行同源序列搜索；利用Bioedit 7.0軟件進(jìn)行核苷酸與推導(dǎo)氨基酸的多序列比對(duì)；根據(jù)CICCOCIOPPO等[26]和VACCINO等[27]的方法識(shí)別克隆基因所編碼的3種T細(xì)胞免疫肽。

從NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中分別下載烏拉爾圖小麥(Triticumurartu,AA)、擬斯卑爾脫山羊草(Aegilopsspeltoides,BB)和粗山羊草(Aegilopstauschii,DD)的ω-醇溶蛋白基因序列，采用MEGA 6.0軟件，應(yīng)用N-J法構(gòu)建本研究克隆得到的ω-醇溶蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，Bootstrap 值設(shè)為1 000。

2 結(jié)果與分析

2.1 鄭麥369 ω-醇溶蛋白基因的克隆及核苷酸序列分析

以鄭麥369基因組DNA為模板，利用7對(duì)引物通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得 6條核苷酸片段(圖1)。將PCR產(chǎn)物通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳分離后回收純化，純化產(chǎn)物連接到pEASY-Blunt3 Cloning Vector載體后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌Trans1-T1感受態(tài)細(xì)胞中。經(jīng)PCR擴(kuò)增和限制性內(nèi)切酶鑒定后，挑取出200多個(gè)克隆進(jìn)行全長(zhǎng)測(cè)序。測(cè)序結(jié)果表明，共得到15條非重復(fù)序列(分別命名為ZM369-1～ZM369-15)，序列長(zhǎng)度變化范圍為603～1 221 bp(表2)，其中ZM369-2序列長(zhǎng)度最短；ZM369-15序列長(zhǎng)度最長(zhǎng)；ZM369-4～ZM369-8序列長(zhǎng)度相同,均為1 080 bp；ZM369-10～ZM369-14序列長(zhǎng)度相同,均為1 116 bp。BLAST分析表明，克隆獲得的15條序列與GenBank中已知的ω-醇溶蛋白基因序列的相似度變化范圍為82%～99%(表2)。

圖1 鄭麥369 ω-醇溶蛋白基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.1 PCR amplification of ω-gliadin genes in Zhengmai 369

2.2 鄭麥369 ω-醇溶蛋白氨基酸序列及CD毒性肽分析

由FGENESH在線軟件預(yù)測(cè)(表2)，在克隆獲得的15條核苷酸序列中，ZM369-1和ZM369-15具有完整的開(kāi)放閱讀框，且不存在內(nèi)含子，分別可編碼318，407個(gè)氨基酸殘基，推測(cè)其可編碼ω-醇溶蛋白；ZM369-2～ZM369-14均因序列內(nèi)部提前出現(xiàn)1個(gè)或多個(gè)終止密碼子，推測(cè)其為假基因。

與已知ω-醇溶蛋白的核苷酸序列進(jìn)行比對(duì)發(fā)現(xiàn)(圖2)，本研究獲得的15個(gè)ω-醇溶蛋白基因所推導(dǎo)的氨基酸序列均具有ω-醇溶蛋白典型的分子結(jié)構(gòu)特征，即由19個(gè)氨基酸組成的信號(hào)肽、由11個(gè)氨基酸組成的N-末端區(qū)、由90%～96%的氨基酸組成的可變重復(fù)區(qū)和由11個(gè)氨基酸組成的C-末端區(qū)。與已報(bào)道的多數(shù)ω-醇溶蛋白基因類似，15條序列在中央重復(fù)區(qū)富含脯氨酸(Proline，P)、谷氨酰胺(Glutamine，Q)和苯丙氨酸(Phenylalanine，F(xiàn))，并且n(Q)∶n(P)∶n(F)為4∶3∶1(表2)，同時(shí)明顯缺乏含硫氨基酸，即缺乏半胱氨酸(Cysteine，C)和甲硫氨酸(Methionine，M)，僅ZM369-15在重復(fù)區(qū)含有1個(gè)半胱氨酸。

表2 克隆得到的15個(gè)ω-醇溶蛋白基因的比較分析Table 2 Comparative analysis of the 15 ω-gliadin genes recovered in this study

ω-醇溶蛋白的前3個(gè)氨基酸決定著它的類型。本研究得到的15條氨基酸序列有ARP，ARE和ARQ3種類型(圖2)：ZM369-1～ZM369-2，ZM369-4～ZM369-14屬于ARQ型，ZM369-3屬于ARE型，ZM369-15屬于ARP型，其中ARP型在前人的研究報(bào)告中未曾報(bào)道過(guò)。序列N端和C端的氨基酸變異都是由堿基突變?cè)斐傻?，在N端，編碼第3個(gè)氨基酸的三聯(lián)核苷酸的的第2個(gè)核苷酸A突變成C就會(huì)導(dǎo)致Q被P取代；多條序列在N端第7個(gè)氨基酸處發(fā)生變異，編碼此氨基酸的第2個(gè)核苷酸G突變成A就會(huì)導(dǎo)致絲氨酸(L-Serine，S)被天冬酰胺(Asparagine，A)取代。相對(duì)于其他序列，ARP類ω-醇溶蛋白ZM369-15在N端變異的位點(diǎn)較多。已知的ω-醇溶蛋白氨基酸序列在氨基酸序列在C端差異較大，不同的基因序列都有自己專屬的C端。本研究克隆的序列也有同樣的表現(xiàn)。

由于重復(fù)單元的存在，所以重復(fù)區(qū)是決定ω-醇溶蛋白基因多態(tài)性的重要區(qū)域，序列之間在重復(fù)區(qū)的差異既有片段的插入或缺失，又有氨基酸的替換。如圖2所示，在15條氨基酸序列中，ZM369-1在93 bp處存在1個(gè)44 bp的片段缺失；ZM369-2在213 bp處存在1個(gè)210 bp的長(zhǎng)片段缺失；ZM369-3在215 bp處存在1個(gè)93 bp的片段的缺失；ZM369-9在296 bp處存在1個(gè)含有終止密碼子的5 bp片段插入；ZM369-15在58，74，114，168，202，246 bp處分別存在1個(gè)2，6，3，3，7，4 bp的片段插入，其中在246 bp處所插入的片段中含有1個(gè)半胱氨酸。ZM369-4～ZM369-14存在高度的相似性，只存在少數(shù)幾個(gè)位點(diǎn)氨基酸的差別。ZM369-1，ZM369-2，ZM369-3和ZM369-15與其他氨基酸序列差別較大，在多個(gè)位點(diǎn)既存在片段的插入和缺失，又存在氨基酸的替換。

ZM369-1和ZM369-15均具有ω-醇溶蛋白典型結(jié)構(gòu)特征，在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中沒(méi)有找到與它們相似度高的ω-醇溶蛋白氨基酸序列。其中與ZM369-1相似性最高的是AGZ20258，片段覆蓋率僅有9%；與ZM369-15相似性最高的是AKA88518，片段覆蓋率僅有5%。由此推測(cè)，ZM369-1和ZM369-15為新ω-醇溶蛋白基因。

CD毒性肽的識(shí)別分析表明(圖2)，免疫肽段Gli-ω1(PFPQPQQPF)在真基因ZM369-1和ZM369-15中未見(jiàn)分布，但在假基因中均有分布，位于同一位點(diǎn)且只有1個(gè)拷貝；免疫肽段Gli-ω2(PQPQQPFPW)在15條序列中均未見(jiàn)分布；免疫肽段Gli-ωt(PQQPFPQQ)在克隆的15條序列中均有分布，其中ZM369-1，ZM369-15分別存在4，5個(gè)拷貝，13個(gè)假基因中存在1～5個(gè)數(shù)目不等的拷貝。

注：紅、黃、綠顏色框分別表示T細(xì)胞免疫肽Gli-ω1,Gli-ω2,Gli-ωt分布位置；黑顏色框表示額外的半胱氨酸殘基分布位置。

Note：The red, yellow and green color frames indicate the distribution of t cell immunopeptide gli-ω1, gli-ω2, gli-ωt, respectively; the black color box indicates the additional distribution of cysteine residues.

圖2 鄭麥369 ω-醇溶蛋白與2個(gè)已知的典型ω-醇溶蛋白氨基酸序列的多重比對(duì)
Fig.2 Multiple alignment of the deduced amino acid sequences of l5 novel genes cloned in this work and 2 typica ω-gliadin genes in the public database

2.3 鄭麥369 ω-醇溶蛋白基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析

為明確克隆得到的鄭麥369的ω-醇溶蛋白基因與普通小麥祖先二倍體小麥親緣關(guān)系，在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中下載烏拉爾圖小麥、擬斯卑爾脫山羊草和粗山羊草ω-醇溶蛋白基因。用這些基因推導(dǎo)的氨基酸序列，應(yīng)用MEGA6.0軟件,采用N-J法構(gòu)建它們與本研究克隆得到的15條ω-醇溶蛋白氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)(圖3)。圖3顯示，所有的ω-醇溶蛋白基因可成了為2 類：GroupⅠ和GroupⅡ。

Group Ⅰ包含1個(gè)烏拉爾圖小麥的ω-醇溶蛋白基因、2個(gè)來(lái)自粗山羊草的ω-醇溶蛋白基因和本研究獲得的15個(gè)ω-醇溶蛋白基因。根據(jù)相似度高低，Group Ⅰ可以進(jìn)一步分為3個(gè)亞組Sub 1-1，Sub 1-2和Sub 1-3，其中Sub 1-1亞組包含ARQ類型的ZM369-2，ZM369-4～ZM369-14；Sub 1-2亞組分為2個(gè)小分支，1支包含ARE類型的ZM369-3和1個(gè)來(lái)自粗山羊草的ω-醇溶蛋白基因，另一分支包含ARQ類型的ZM369-1、1個(gè)來(lái)自粗山羊草的ω-醇溶蛋白基因和1個(gè)來(lái)自烏拉爾圖的ω-醇溶蛋白基因；Sub1-3亞組包含類型為ARP的ZM369-15和1個(gè)來(lái)自烏拉爾圖的ARH類型ω-醇溶蛋白基因。結(jié)果表明，N端第1個(gè)氨基酸為丙氨酸(Ala)的ω-醇溶蛋白基因均聚在了Group Ⅰ中，包括ARQ，ARE，ARH和ARP4種類型。

Group Ⅱ包含10個(gè)來(lái)自粗山羊草和2個(gè)來(lái)自擬斯卑爾脫山羊草的ω-醇溶蛋白基因。根據(jù)相似度高低，Group Ⅱ可以進(jìn)一步分為2個(gè)亞組Sub 2-1和Sub 2-2。其中Sub 2-1亞組包含TRQ類型的擬斯卑爾脫山羊草ω-醇溶蛋白基因，Sub 2-2亞組中包含分別聚集在2條小分支上的SRQ和TRQ類型的粗山羊草ω-醇溶蛋白基因。同一類型但不同基因組來(lái)源的ω-醇溶蛋白基因分別聚集在不同亞組，說(shuō)明其具有一定的基因組特異性。

在Group Ⅰ和Group Ⅱ中均含有粗山羊草ω-醇溶蛋白基因，表明其在進(jìn)化過(guò)程中存在著廣泛的變異，但其又分別與相同類型ω-醇溶蛋白基因聚集在同一分支上，由此推測(cè)ω-醇溶蛋白基因類型可能與進(jìn)化有關(guān)。

研究表明，ARQ/E，KEL類型的ω-醇溶蛋白基因位于小麥1A,1D染色體上，所編碼的蛋白分別屬于ω-1和ω-2醇溶蛋白；SRL-型基因位于1B染色體上，編碼的蛋白屬于ω-5醇溶蛋白[15]。ZM369-1～14均屬于ARQ/E類型醇溶蛋白基因，與烏拉爾圖和粗山羊草的ω-醇溶蛋白基因具有相對(duì)較近的進(jìn)化關(guān)系，表明其來(lái)源于A，D基因組，與POENA等[15]的報(bào)道一致。新類型ARPω-醇溶蛋白基因ZM369-15與烏拉爾圖ARH類型ω-醇溶蛋白基因具有相對(duì)較近的進(jìn)化關(guān)系，推測(cè)其可能也是來(lái)源于A基因組。

圖3 鄭麥369ω-醇溶蛋白基因與二倍體小麥ω-醇溶蛋白基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析Fig.3 Phylogenetic tree analysis of the ω-gliadin genes of Zhengmai 369 and the ω-gliadin gene of diploid wheat

3 結(jié)論與討論

目前，除HSIA等[13]采用篩選基因組文庫(kù)法得到少量ω-醇溶蛋白基因外，利用PCR技術(shù)獲得的ω-醇溶蛋白基因很少，且大多為假基因[5,11,13,28-34]，因此，對(duì)于更多新的ω-醇溶白基因的克隆及分析顯得尤為重要。本研究根據(jù)Genebank中的已發(fā)表ω-醇溶蛋白基因以及序列的保守性，設(shè)計(jì)了7對(duì)簡(jiǎn)并引物，在擴(kuò)增過(guò)程中對(duì)擴(kuò)增條件進(jìn)行多次嘗試與優(yōu)化，最終選擇了試驗(yàn)方法中用到的引物及擴(kuò)增條件。以鄭麥369 DNA基因組為模板擴(kuò)增出15個(gè)具有典型分子結(jié)構(gòu)的ω-醇溶蛋白基因，包括2個(gè)真基因和13個(gè)假基因，這與已有研究的ω-醇溶蛋白基因有15～18個(gè)拷貝相符[9-10]。

對(duì)得到的15個(gè)ω-醇溶蛋白基因推導(dǎo)的氨基酸序列比對(duì)分析得出，15條序列在中央重復(fù)區(qū)富含脯氨酸、谷氨酰胺和苯丙氨酸，并且n(Q)∶n(P)∶n(F)為4∶3∶1，大部分ω-醇溶蛋白基因都不含硫氨基酸，即缺乏半胱氨酸和甲硫氨酸，與已有研究一致[4-6]。ZM369-15在重復(fù)區(qū)含有1個(gè)半胱氨酸。KASARDA[35]曾在研究中提出，含有奇數(shù)個(gè)半胱氨酸殘基的醇溶蛋白在形成分子內(nèi)的二硫鍵后，會(huì)剩下一個(gè)額外的半胱氨酸殘基，其會(huì)參與形成分子間二硫鍵。因此，推測(cè)ZM369-15這樣的變異可能會(huì)使其分子內(nèi)二硫鍵參與到分子聚合中，進(jìn)而對(duì)小麥品質(zhì)產(chǎn)生一定的作用。此外，以后可以利用ZM369-15設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增含硫氨基酸的ω-醇溶蛋白，在對(duì)更多的含硫ω-醇溶蛋白研究的同時(shí)，還可以將其轉(zhuǎn)入普通小麥替換貧硫ω-醇溶蛋白。

ZM369-1和ZM369-15均具有ω-醇溶蛋白典型的分子結(jié)構(gòu)特征，在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中沒(méi)有找到與它們相似度高的ω-醇溶蛋白氨基酸同源序列，其中ZM369-15屬于之前未曾報(bào)道過(guò)的ARP類型。由此推測(cè)，ZM369-1，ZM369-15為新的ω-醇溶蛋白基因。

DUPONT等[14]研究表明，ARQ/E，KEL類型的ω-醇溶蛋白基因位于小麥1A，1D染色體上，所編碼的蛋白分別屬于ω-1和ω-2醇溶蛋白；SRL-型基因位于1B染色體上，編碼的蛋白屬于ω-5醇溶蛋白。本研究獲得的基因ZM369-1～14均屬于ARQ/E類型，由進(jìn)化樹(shù)分析可知，與烏拉爾圖與粗山羊草的ω-醇溶蛋白基因具有相對(duì)較近的進(jìn)化關(guān)系，表明其來(lái)源于A，D基因組，與DUPONT等[14]的報(bào)道一致。新類型ARP基因ZM369-15與ARH類型烏拉爾圖具有相對(duì)較近的進(jìn)化關(guān)系，推測(cè)其可能也是來(lái)源于A基因組。

根據(jù)系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析還發(fā)現(xiàn)，相同類型的ω-醇溶蛋白基因可形成相對(duì)集中的分支，推測(cè)ω-醇溶蛋白基因型可能與進(jìn)化相關(guān)。相同基因組來(lái)源的ω-醇溶蛋白基因也大都可形成相對(duì)集中的分支，表明ω-醇溶蛋白基因具有一定的基因組特異性。