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        健康人群尿液生化項目性別間差異及日內(nèi)變異分析*

        2021-03-05 13:38:50張凱鄒雨桐尹逸叢國秀芝孫丹丹李洪雷邱玲
        臨床檢驗雜志 2021年1期
        關(guān)鍵詞:差異檢測

        張凱,鄒雨桐,尹逸叢,國秀芝,孫丹丹,李洪雷,邱玲

        (中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗科,北京100730)

        尿液生化分析常用的標(biāo)本類型主要是隨機尿和24 h尿。24 h尿收集繁瑣,無法判斷是否收集完整,易影響檢測結(jié)果[1]。目前臨床醫(yī)生通常選擇用隨機尿替代24 h尿來快速篩查和評估相關(guān)疾病[2-5],也有研究者用隨機尿推算24 h尿的排泄量[6-7]。隨機尿受濃縮和稀釋的影響,各生化項目濃度的日內(nèi)變異比較大,為了減小變異度,提高檢驗結(jié)果的可靠性,多采用尿肌酐(Cr)校準(zhǔn)[8],但很少有文獻報道經(jīng)尿Cr校準(zhǔn)后各項目變異度的減小程度。本研究通過收集健康人1日內(nèi)所有隨機尿和24 h尿,分析經(jīng)尿Cr校準(zhǔn)后隨機尿各項目日內(nèi)變異的減小程度及其晝夜分布的特點,分析不同性別間24 h尿生化項目的差異,為臨床醫(yī)生對解讀尿生化結(jié)果及選擇尿液標(biāo)本的類型提供參考。

        1 材料與方法

        1.1研究對象 2018年4月至5月在北京地區(qū)招募表觀健康志愿者43名,排除劇烈運動和泌尿系統(tǒng)感染各1名,最終納入志愿者41名,其中男性18名。入選標(biāo)準(zhǔn):漢族,在北京地區(qū)居住滿1年,留尿前3天清淡飲食,肝腎功能、血脂指標(biāo)均在參考區(qū)間內(nèi)。排除標(biāo)準(zhǔn):近1月內(nèi)有確診疾病,服藥,作息不規(guī)律或有熬夜、值夜班等情況,女性月經(jīng)期,留尿期間有劇烈運動和情緒激動發(fā)生,血清<1.5 mL,有脂血、溶血和黃疸現(xiàn)象。本研究通過北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)(倫理審查編號:ZS-1608),研究對象均簽署知情同意書。

        1.2主要儀器與試劑 AU2700生化分析儀和AU5800生化分析儀(美國貝克曼庫爾特公司),尿液收集容器(魔桶MOTOM1,北京金寓潤澤公司),Cr試劑盒(酶法,四川邁克公司),總蛋白(Pro)試劑盒(免疫比濁法,英國朗道公司),微量清蛋白(mAlb)試劑盒(免疫比濁法,北京利德曼公司),鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)(間接離子選擇電極法)、鈣(Ca)試劑盒(偶氮Ⅲ砷法)、磷(P)試劑盒(鉬酸鹽法)、尿素(Urea)試劑盒(酶法)、尿酸(UA)試劑盒(酶法)均購自美國貝克曼庫爾特公司,以上檢測項目均采用各自配套校準(zhǔn)品校準(zhǔn)。所有樣本測定前后室內(nèi)質(zhì)控均在控,所有項目定期參加國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心室間質(zhì)評,結(jié)果良好。

        1.3方法

        1.3.1尿液樣本留取及項目檢測 為志愿者提供統(tǒng)一的量筒(精確到1 mL),統(tǒng)一講解留尿要求,所有尿液不添加防腐劑,置陰涼處保存,要求志愿者將24 h內(nèi)所有的隨機尿分別收集,標(biāo)明時間和尿量,每次隨機尿取2~3 mL用于檢測,其余并入容器中計算24 h尿。所有標(biāo)本分裝凍存,于同一時間段內(nèi)完成檢測。在檢測前尿液標(biāo)本需平衡至室溫,2 500×g離心10 min后經(jīng)AU2700生化分析儀完成檢測,隨機尿和24 h尿檢測項目為UA、Cr、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K、Na和Cl。

        1.3.2血清留取及項目檢測 留完24 h尿當(dāng)日清晨空腹采集靜脈血,經(jīng)2 500×g離心10 min后分離血清,經(jīng)AU5800生化分析儀完成肝腎功能和血脂等項目的測定。

        2 結(jié)果

        2.1基線資料 基線資料如性別、年齡、估算腎小球濾過率(eGFR,根據(jù)2009年CKD-EPIcr 公式計算)、隨機尿量、24 h尿量等見表1。

        表1 健康志愿者的基線資料

        2.2尿生化項目經(jīng)Cr校正前后CV的比較 UA、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K、Na、Cl經(jīng)Cr校正前、后CV(%)分別為:47.66±13.9和31.20±13.02、54.45±19.63和29.10±17.30、58.39±21.59和40.38±22.44、41.26±17.48和23.42±9.38、56.10±17.79和44.41±16.13、61.58±22.21和35.81±17.59、51.75±18.28和40.45±18.42、41.94±14.80和41.03±13.46、40.02±14.68和39.87±18.40。Cr的CV(%)為53.09±18.48。UA、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K經(jīng)校正后,CV均降低(P均<0.01),而Na、Cl校正前、后CV差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。

        2.324 h尿各項目在性別之間的比較 見表2。男、女性Cr水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),其他項目差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。

        表2 24 h尿在不同性別間的比較

        2.4尿生化項目的晝夜差異 見表3和圖1。UA、Na、Cl、K有晝夜差異,白天均高于夜間(P均<0.01),P也有晝夜差異,但夜間高于白天(P<0.01),其他項目沒有明顯的晝夜差異(P均>0.05)。

        表3 尿生化項目的晝夜差異

        注:A~I分別為UA、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K、Na、Cl日內(nèi)節(jié)律。

        3 討論

        Cr是肌肉組織的代謝產(chǎn)物,肌肉質(zhì)量相對恒定,而Cr可自由通過腎小球屏障且?guī)缀醪槐荒I小管重吸收,所以Cr排泄也相對恒定[9]。尿Cr對降低尿mAlb變異度是一個很好的校正參數(shù)[10]。本研究顯示,經(jīng)Cr校正后多個項目的變異度均下降,但Cr校正前后Na、Cl的CV差異無統(tǒng)計學(xué)意義;可能原因是Na排出受攝入量的多少而增減,即多吃多排,少吃少排,不吃不排,而體內(nèi)Cl的變化基本與Na一致[11]。

        男女間Cr差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),所以用Cr校準(zhǔn)時要根據(jù)性別設(shè)置參考區(qū)間或醫(yī)學(xué)決定水平等。男性體質(zhì)指數(shù)(BMI)>女性,Urea/Cr與BMI具有相關(guān)性(r=0.790)[12];本研究中男女間Urea比較的P值為0.052,接近檢驗水準(zhǔn)0.05,所以存在差異的可能性較大,也應(yīng)該考慮到性別的差異。

        本研究顯示,Na、Cl、K、UA存在晝夜差異,白天排泄高于夜間,與文獻報道一致[13-16]。P也有晝夜差異,表現(xiàn)為晝低夜高,與Touitou等[12]的研究報道一致。若模仿日本靜岡縣大學(xué)實驗按照07:30—12:30(上午)、12:30—17:30(下午)、17:30—22:30(晚上)、22:30—07:30(夜間)分組,P/Cr(mmol/g)均值分別為12.47、13.27、15.08、15.16,則與該實驗的P排泄率(mg/h)的數(shù)據(jù)趨勢一致[17]。Ix等[18]研究也顯示,健康人P夜間排泄率高于白天。本研究顯示,Pro、mAlb、Urea、Ca沒有明顯的晝夜差異;但時間段劃分、人群選擇或計算方式可能影響結(jié)論[17]。若某些項目具有排泄節(jié)律,我們則要選擇能更好反映患者病情的特定時段來采集尿液,并提醒臨床醫(yī)生合理解讀檢驗結(jié)果。

        本研究存在的不足之處主要包括2點。(1)凌晨1:00—4:00志愿者大多處于睡眠狀態(tài),樣本量較少,分別只有2、5、2、2例;為減小抽樣誤差,將1:00—2:00和3:00—4:00樣本量分別合并,圖1E和圖1F中Ca、P在3:00—4:00與前后2個點差異較大,可能出現(xiàn)了較大的抽樣誤差,還需再次驗證。(2)本研究過程較復(fù)雜、耗時,自愿者不易招募,樣本量偏少,男女比例不均;激素波動對部分離子類隨機尿產(chǎn)物會產(chǎn)生影響,按晝夜分組可能掩蓋此類影響,所以還需增加樣本量,評估激素對特定項目日內(nèi)變異的影響。

        本研究只分析了健康人相關(guān)數(shù)據(jù),后期還會招募處于慢性腎病各期的患者,分析各期患者各項指標(biāo)的分布特點及與健康人之間的差異。

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