段樹鵬 侯麗娟 王宏偉 宋新文

河南省新鄉(xiāng)市新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院感染科 (河南 新鄉(xiāng)， 453000)

自身免疫性肝炎(AIH)是在遺傳易感性的基礎(chǔ)上由免疫炎性反應(yīng)等因素介導(dǎo)的慢性免疫性炎性疾病[1]，免疫細胞及炎性因子可導(dǎo)致肝臟內(nèi)實質(zhì)細胞的破壞及炎性損傷，組織病理學(xué)也以界面性肝炎和無病毒性肝炎為顯著特征[2]。AIH起病較為隱匿，可不表現(xiàn)為任何臨床癥狀，部分患者僅僅在血清中檢測出抗SSA抗體、抗SSB抗體、ANA陽性及免疫球蛋白G(IgG)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)、ALT、AST等指標(biāo)異常升高[3，4]，然而，部分AIH患者也可以急性肝衰竭為首要臨床表現(xiàn)[5]。本課題組前期研究結(jié)果顯示[4]，AIH患者血清中白細胞介素(IL)-17、TNF-α等炎癥因子水平顯著升高，且在一定程度上反映肝臟損傷程度。IL-33是近年來發(fā)現(xiàn)屬于IL-1家族中的一種新型炎癥因子，參與了多種免疫性炎性疾病，如原發(fā)性膽汁性肝硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等制[6，7]。目前國內(nèi)關(guān)于IL-33和AIH相關(guān)性研究報道較少，本課題組在前期研究的基礎(chǔ)上，進一步探討AIH患者血清中IL-33表達水平及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2017年1月至2019年6月于新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院感染科住院的85例初次診斷為AIH患者(AIH組)作為研究對象，另40例健康體檢人群作為對照組，AIH組和對照組基本資料見表1。所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①AIH診斷符合2008年IAIHGAA提出的AIH簡化診斷積分系統(tǒng)，積分≥7分[8]；②臨床資料完整；排除標(biāo)準(zhǔn)：①病毒性、酒精性肝炎、遺傳代謝性肝病、肝臟腫瘤患者；②合并嚴重心腦血管病、惡性腫瘤、免疫性疾病、結(jié)締組織病者；③孕婦及哺乳期婦女；④合并其他疾病，近3月內(nèi)有采用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑治療者。

1.3 觀察指標(biāo)及方法 所有研究對象均空腹抽取外周靜脈血5 ml，離心并獲取上層血清備用。檢測指標(biāo)：①生化指標(biāo)ALT、AST、總膽紅素(TBil)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-GT由我院檢驗科采用全自動生化檢測儀進行統(tǒng)一檢測，免疫球蛋白A(IgA)、IgG和IgM由我院檢驗科采用散射比濁法檢測，相關(guān)指標(biāo)在AIH患者獲得臨床緩解后同時復(fù)測。②血清IL-33水平采用ELISA試劑盒檢測，試劑盒購買自泉州市睿信生物科技有限公司(中國)。當(dāng)AIH患者經(jīng)過治療獲得臨床緩解[9]，再次檢測AIH患者血清IL-33水平。③41例AIH患者均獲得肝臟組織學(xué)標(biāo)本。經(jīng)B超引導(dǎo)下行肝臟穿刺活檢，肝臟組織HE染色后進行組織炎癥活動指數(shù)評分(HAI)，HAI分數(shù)越高，說明肝臟組織炎癥越明顯[10]。

2 結(jié)果

2.1 兩組人群一般資料比較 見表1。

表1 兩組人群一般資料比較

2.2 兩組人群血清IL-33表達水平的比較 見表2。

表2 兩組人群血清IL-33表達 (pg/ml)

2.3 AIH組患者血清IL-33和生化免疫指標(biāo)的相關(guān)性分析 AIH組患者活動期血清IL-33水平與ALT、AST、TBil、γ-GT均呈顯著正相關(guān)性，而與ALP、IgA、IgG和IgM無明顯相關(guān)性；AIH組患者緩解期血清IL-33水平與ALT、AST、TBil、ALP、γ-GT、IgA、IgG和IgM均無明顯相關(guān)性，見表3。

表3 AIH組患者血清IL-33水平與生化及免疫指標(biāo)的相關(guān)性

2.4 AIH組患者活動期血清IL-33與HAI的相關(guān)性 41例AIH患者行肝臟穿刺，肝臟組織HAI評分為16.14±2.05，其血清IL-33水平為(125.45±20.59)pg/ml，結(jié)果顯示，AIH患者血清IL-33水平與HAI評分呈顯著正相關(guān)性(r=0.843，P<0.05)。

2.5 IL-33診斷AIH的臨床效能 將所有研究對象血清IL-33數(shù)值作為檢驗變量，AIH組患者活動期血清IL-33水平作為狀態(tài)變量，繪制ROC曲線圖發(fā)現(xiàn)，血清IL-33診斷AIH的曲線下面積為0.879(95%CI0.802～0.923)，當(dāng)截斷值為135.12 pg/ml時，敏感度和特異度分別為84.16%和92.35%，結(jié)果見圖1。

圖1 血清IL-33診斷AIH的ROC曲線圖

3 討論

AIH為難治性肝炎，臨床上以女性患者多見，具體發(fā)病機制尚不清楚，但近年來研究多認為AIH屬于一種自身免疫性疾病，針對肝細胞發(fā)生的免疫炎性反應(yīng)介導(dǎo)肝臟實質(zhì)性炎癥，但也有報道發(fā)現(xiàn)部分藥物如米諾環(huán)素、降脂藥物等也有誘發(fā)AIH的可能[11]，因此遺傳易感性也與AIH發(fā)病機制有關(guān)[12]。IL-33屬于IL-1家族中的一種促炎因子，通過與受體相互作用后活化MyD88[13]和NF-κB[14]等信號通路而參與多種免疫性炎癥疾病的發(fā)病機制[6，7]。原發(fā)性膽汁性肝硬化和AIH類似，均屬于自身免疫性肝病，研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血清中IL-33表達水平顯著升高，且與ALP和Child-Pugh評分均呈顯著正相關(guān)性[6]。但目前關(guān)于國內(nèi)AIH患者血清IL-33表達水平研究報道較少，本研究檢測了AIH患者血清中IL-33表達水平及其肝臟生化免疫指標(biāo)，尤其是肝內(nèi)炎癥活動HAI評分的相關(guān)性，進一步分析IL-33是否能作為AIH的血清學(xué)標(biāo)志物。

本研究結(jié)果顯示，AIH患者活動期血清中IL-33水平顯著高于緩解期及對照組，同時AIH患者緩解期血清IL-33水平也顯著高于對照組，提示血清IL-33水平對判斷AIH病情活動性具有重要意義。Abe等[15]不僅證實AIH患者血清中IL-33水平顯著升高，且免疫組化結(jié)果顯示肝臟組織中IL-33表達水平在活動期顯著升高，當(dāng)經(jīng)過治療后在緩解期顯著下降，這與我們的結(jié)果基本一致。通過進一步分析血清IL-33水平與肝臟生化免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性后發(fā)現(xiàn)，AIH患者血清IL-33水平升高與患者的肝臟損傷的嚴重程度密切相關(guān)。對其中41例AIH患者的肝臟組織切片進行HAI評分后發(fā)現(xiàn)，血清IL-33水平與HAI評分也呈顯著正相關(guān)性(r=0.843)，提示血清IL-33水平也能反映AIH患者肝臟炎癥損傷的嚴重程度。目前關(guān)于IL-33如何參與AIH的發(fā)病機制的相關(guān)報道較少，僅僅Liang等[16]在AIH小鼠模型中證實，IL-33能通過促進IL-17促炎因子大量釋放而增加肝臟的炎癥損傷，在采用抗IL-33抗體預(yù)處理后能逆轉(zhuǎn)AIH小鼠模型肝臟的損傷情況。此外，我們課題組前期研究也證實IL-17在AIH的發(fā)病機制中的重要作用[4]。

由于部分AIH患者起病較為隱匿，因此，在臨床上亟需尋找一種敏感度和特異度均較高的血清學(xué)標(biāo)志物，我們研究發(fā)現(xiàn)AIH患者血清中IL-33表達水平顯著升高，而高水平的IL-33是其成為AIH血清學(xué)標(biāo)志物的基礎(chǔ)，我們采用ROC曲線分析后發(fā)現(xiàn)，血清IL-33診斷AIH的曲線下面積為0.879，敏感度和特異度分別為84.16%和92.35%，說明血清IL-33可作為診斷AIH的一項血清標(biāo)志物。日后也需要大樣本量的臨床研究來證實我們的結(jié)果，也需要開展前瞻性隊列研究進一步探討血清IL-33高表達與AIH患者預(yù)后的關(guān)系。