劉 淼，烏蘭娜，張曉曉，李瑞珍

(北京大學深圳醫(yī)院婦科，廣東深圳 518036)

宮頸癌作為女性發(fā)病率極高的一類惡性腫瘤，其導致的死亡患者數量較高，是臨床中研究較多的一類生殖系統(tǒng)腫瘤。宮頸癌早期正確有效的診治是預后改善的前提，因此找到對于宮頸癌診斷價值較高的指標，尤其是對于病理分型及組織分化等有較高反映意義的指標是臨床研究的熱點[1-2]。miRNA指標作為在惡性腫瘤中研究較多的內容，其在宮頸癌患者病灶組織中的表達多見，同時也是研究差異較大的方面，故認為更為全面的探究需求較高。miR-34a及miR-19a作為在宮頸癌患者中研究較多的miRNA指標，其與病理分型及組織分化的關系有待深入探究[3-5]。因此，本研究就組織miRNA指標在宮頸癌患者中的表達情況及其與病理分型、組織分化的相關性進行探究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年2月至2019年10月本院60例宮頸癌患者作為觀察組，選取同時期60例健康同齡女性作為對照組。納入標準：(1)年齡20歲及以上；(2)對研究知情同意；(3)臨床資料完整。排除標準：(1)合并其他生殖系統(tǒng)疾病者；(2)合并代謝性疾病者；(3)合并多系統(tǒng)器官功能不全者；(4)合并神經系統(tǒng)疾病或損傷者。觀察組年齡26～72歲，平均(43.9±6.0)歲，其中有生育史51例，無生育史9例；病理分型：鱗癌47例，腺癌13例；組織分化程度：高分化25例，中分化20例，低分化15例；國際婦產科聯(lián)合會(FIGO)分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期18例，Ⅲ期18例，Ⅳ期12例。對照組年齡27～73歲，平均(43.6±6.1)歲，其中有生育史53例，無生育史7例。兩組年齡與生育史比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫(yī)院倫理學委員會審批通過。

1.2 方法

取對照組健康宮頸組織及觀察組宮頸癌標本，對采集的標本進行檢測和RNA提取，使用TRIzol Reagent(Invitrogen)試劑，按照試劑說明書操作，采用逆轉錄(RT)-PCR法進行檢測，參照TakaRa SYBR PrimeScript miRNA RT-PCR Kit說明書，將提取的RNA逆轉錄，由羅氏480Ⅱ熒光定量PCR儀完成。U6作為內參，每個樣品設3個復孔，根據同一個標本的CT值(目標基因和內參基因)計算ΔCT值，miRNA相對表達水平采用2-ΔΔCT進行計算，統(tǒng)計及比較指標為組織miR-34a及miR-19a。上述檢測均由經驗豐富者進行操作檢測，然后統(tǒng)計及比較兩組miRNA指標(miR-34a及miR-19a)表達水平，同時比較觀察組不同病理分型、組織分化程度及FIGO分期的檢測結果。

1.3 統(tǒng)計學處理

2 結 果

2.1 兩組宮頸組織miRNA指標表達水平比較

觀察組miR-34a表達明顯低于對照組，miR-19a表達明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 兩組宮頸組織miRNA指標表達水平比較

2.2 觀察組不同病理分型的宮頸組織miRNA指標表達水平比較

與鱗癌比較，腺癌miR-34a表達水平更低，miR-19a表達水平更高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 觀察組不同病理分型的宮頸組織miRNA指標表達水平比較

2.3 觀察組不同組織分化程度的宮頸組織miRNA指標表達水平比較

與高分化比較，低分化miR-34a表達水平更低，miR-19a表達水平更高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 觀察組不同組織分化程度的宮頸組織miRNA指標表達水平比較

2.4 觀察組不同FIGO分期的宮頸組織miRNA指標表達水平比較

與FIGO低分期比較，FIGO高分期miR-34a表達水平更低，miR-19a表達水平更高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 觀察組不同FIGO分期的宮頸組織miRNA指標表達水平比較

2.5 組織miRNA指標與宮頸癌病理分型、組織分化程度及FIGO分期的相關性分析

Pseron相關性分析顯示，組織miR-34a及miR-19a均與病理分型明顯相關(P<0.05)；Spearman秩相關分析顯示，組織miR-34a與組織分化程度呈正相關，與FIGO分期呈負相關，組織miR-19a與組織分化程度呈負相關，與FIGO分期呈正相關(P<0.05)，見表5。

表5 組織miRNA指標與宮頸癌病理分型、組織分化程度及FIGO分期的相關性分析

3 討 論

宮頸癌作為婦科最為常見的惡性腫瘤，是臨床研究較多的一類疾病，早期正確診治是改善預后及降低病死率的重要前提。臨床中與惡性腫瘤相關的診治研究多見，其中miR相關指標是研究較多且較熱的一類指標[6-8]，較多相關指標在宮頸癌中的表達變化研究顯示，其對于疾病的分期等多方面具有較高的反映價值。經證實，miR-34a及miR-19a在宮頸癌患者中的表達波動相對較大，其中較多研究認為miR-34a在下調細胞周期基因中具有較強的作用[9]，對于使腫瘤細胞停留于G0/G1期，抑制相關蛋白的表達，其在宮頸癌患者中的表達研究可見，多呈現降低的趨勢[10-12]，但是其對于不同宮頸癌病理分型、組織分化程度及FIGO分期者中的具體表達變化研究不足，有待深入探究。miR-19a則對較多抑癌基因具有抑制作用，其可對胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)表達起到較大控制作用，因此其在腫瘤患者中多呈現高表達狀態(tài)，表現為腫瘤細胞抑制作用的減弱，腫瘤細胞增殖情況增加，同時其對于Bcl-2具有較強的影響作用，因此在腫瘤患者中的監(jiān)測意義較高[13-16]。另外，臨床中關于宮頸癌患者miR-34a及miR-19a的細致變化研究存在一定差異[17-18]，故對其表達的細致作用及對病理分型、組織分化程度及FIGO分期的反映價值研究均極為必要。

本研究就組織miRNA指標在宮頸癌患者中的表達及與病理分型及組織分化的相關性進行探究，結果顯示，宮頸癌患者的組織miR-34a表達明顯低于健康者，組織miR-19a表達則明顯高于健康者，說明其在宮頸癌患者中具有一定的價值。同時，研究顯示，不同病理分型、組織分化程度及FIGO分期者的組織miR-34a及miR-19a表達差異明顯，Pseron相關性分析顯示，組織miR-34a及miR-19a均與病理分型明顯相關(P<0.05)；Spearman秩相關分析顯示，組織miR-34a與組織分化程度呈正相關，與FIGO分期呈負相關，組織miR-19a與組織分化程度呈負相關，與FIGO分期呈正相關(P<0.05)，因此肯定了組織miR-34a及miR-19a與宮頸癌患者病理分型、組織分化程度及FIGO分期的相關性，進一步提升了上述miR指標在宮頸癌中的檢測意義。分析原因，miR-19a對于IGF2R抑癌活性發(fā)揮了減弱作用，因此腫瘤細胞活性增強，疾病進展加快，疾病狀態(tài)相對較差，控制效果也即較差。miR-34a表達降低則導致腫瘤抑制作用減弱，腫瘤細胞集落及侵襲能力增強，因此認為其與宮頸癌的上述方面密切相關[19-21]。

綜上所述，組織miRNA指標在宮頸癌患者中呈現異常表達的狀態(tài)，且與病理分型及組織分化有密切的相關性，其在宮頸癌患者中的應用價值較高。