和劍凌，姜 波，邵天波

（1.云南圣約翰醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650228 ；2. 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650032）

無(wú)乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae，GBS）又叫B群鏈球菌，是一種β- 溶血性鏈球菌。GBS 是一種寄生于健康人胃腸道和陰道的機(jī)會(huì)致病菌，它是引起圍生期母嬰感染的主要病原菌之一。孕產(chǎn)婦在感染GBS 后可出現(xiàn)早產(chǎn)、胎膜早破和產(chǎn)褥期感染等并發(fā)癥。GBS 的傳播途徑主要是垂直傳播。發(fā)生GBS 感染是引起新生兒敗血癥、新生兒腦膜炎和新生兒重癥肺炎等新生兒感染性疾病的主要原因。本文主要是分析我院1196 株無(wú)乳鏈球菌的分布情況及對(duì)4種常用抗菌藥物的敏感性。

1 資料與方法

1.1 基線(xiàn)資料

本文的研究對(duì)象是2018 年1 月至2019 年12 月期間在我院1196 例門(mén)診及住院患者體內(nèi)分離出的1196 株GBS。在這1196 例患者中，有女性患者1167 例，男性患者29 例；其年齡為22 ～56 歲，平均年齡為（30.47±4.14）歲。按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中的相關(guān)規(guī)定對(duì)這些患者的陰道分泌物標(biāo)本、尿液標(biāo)本、血液標(biāo)本等標(biāo)本進(jìn)行接種、培養(yǎng)及病原菌分離[1]。

1.2 儀器與試劑

VITEK2-compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀及配套試劑（由法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)），GP67 藥敏卡（由英國(guó)OXOID公司生產(chǎn)），BACT/AL 全自動(dòng)血培養(yǎng)儀及配套的培養(yǎng)瓶（由法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)），CO2培養(yǎng)箱（由賽默飛世爾科技有限公司生產(chǎn)），GBS 專(zhuān)用顯色平板（由鄭州安圖生物有限公司生產(chǎn)），哥倫比亞血瓊脂平板（由鄭州安圖生物有限公司生產(chǎn)），MH 瓊脂平板（由鄭州安圖生物有限公司生產(chǎn)）。以上所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 質(zhì)控菌株

采用衛(wèi)生部生物制品檢定所提供的金黃色葡萄球菌ATCC25923 和ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC29212、腐生葡萄球菌ATCCBAA750 作為質(zhì)控菌株。

1.4 GBS 的培養(yǎng)、分離方法及藥敏試驗(yàn)方法

對(duì)GBS 進(jìn)行培養(yǎng)和分離的方法是：將患者的陰道分泌物標(biāo)本接種于GBS 專(zhuān)用的顯色平板上，置于35℃的CO2培養(yǎng)箱（CO2的濃度為5%）中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)18 ～48 h 后，挑選出平板上淡紅色至深紅色的菌落，作為初篩菌落。對(duì)初篩菌落進(jìn)行環(huán)磷酸腺苷（CAMP）試驗(yàn)和分純培養(yǎng)，分離出GBS。將患者的尿液標(biāo)本、血液標(biāo)本等非陰道分泌物標(biāo)本接種于血瓊脂平板上，置于35℃的CO2培養(yǎng)箱（CO2的濃度為5%）中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)18 ～48 h 后，挑選出中等大小、灰白色、圓形、表面濕潤(rùn)、周?chē)姓ˇ?溶血環(huán)（有11% 的菌落可無(wú)溶血環(huán)）[2]的可疑菌落。用濃度為3% 的H2O2對(duì)可疑菌落進(jìn)行觸酶試驗(yàn)。對(duì)試驗(yàn)結(jié)果呈陰性的菌落進(jìn)行CAMP 試驗(yàn)和分純培養(yǎng)，分離出GBS。對(duì)GBS 進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的方法是：采用VITEK2-compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀及配套試劑對(duì)分離出的GBS 進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，嚴(yán)格按照試劑的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行各項(xiàng)操作。采用“M100 抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)（2019）”[3]對(duì)試驗(yàn)結(jié)果相近判讀，具體的判讀標(biāo)準(zhǔn)詳見(jiàn)表1。

1.5 觀(guān)察指標(biāo)

觀(guān)察這1196 株GBS 的標(biāo)本來(lái)源、科室分布情況及其對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、紅霉素和克林霉素的敏感性。

表1 藥敏試驗(yàn)的判讀標(biāo)準(zhǔn)

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用WHONET 5.6 軟件對(duì)這1196 株GBS 的標(biāo)本來(lái)源、科室分布情況及藥敏試驗(yàn)結(jié)果等數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。

2 結(jié)果

2.1 這1196 株GBS 的標(biāo)本來(lái)源及科室分布情況

在這1196 株GBS 中，分離自孕產(chǎn)婦陰道分泌物、尿液、血液、膿液、痰液、精液、前列腺液及其他標(biāo)本的GBS 分別有1010 株、169 株、8 株、4 株、2 株、1 株、1 株和1 株。其中，分離自孕產(chǎn)婦陰道分泌物的GBS 最多，占84.4%。在這1196 株GBS 中，來(lái)自婦產(chǎn)科、泌尿科、內(nèi)科、感療科、內(nèi)分泌科、移植科、男性科、消化科、皮膚科和其他科室的GBS 分別有1134 株、20 株、7 株、7 株、5 株、4 株、3株、2 株、2 株和12 株。其中，來(lái)自婦產(chǎn)科的GBS 最多，占94.8%。詳見(jiàn)表2。

表2 這1196 株GBS 的標(biāo)本來(lái)源及科室分布情況

2.2 這1196 株GBS 對(duì)4 種常用抗菌藥物的敏感性

這1196 株GBS 對(duì)青霉素和萬(wàn)古霉素的敏感率均為100%，其對(duì)紅霉素和克拉霉素的耐藥率分別為73.2% 和64%。詳見(jiàn)表3。

表3 這1196 株GBS 對(duì)4 種常用抗菌藥物的敏感性[n（%）]

3 討論

GBS 屬于革蘭陽(yáng)性菌，其通常呈短鏈狀排列，多存在于人體的胃腸內(nèi)（女性陰道內(nèi)的GBS 也來(lái)源于胃腸道內(nèi)的GBS）。育齡女性的陰道內(nèi)多攜帶有GBS。本研究的結(jié)果顯示，在這1196 株GBS 中，分離自孕產(chǎn)婦陰道分泌物的GBS最多，有1010 株，占84.4%。其中，來(lái)自婦產(chǎn)科的GBS 最多，有1134 株，占94.8%。這與國(guó)內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果基本相符。發(fā)生GBS 感染是引起產(chǎn)婦產(chǎn)褥期膿毒血癥和新生兒腦膜炎的重要原因。因此，臨床上應(yīng)對(duì)妊娠女性進(jìn)行GBS 檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的女性進(jìn)行有效的干預(yù)，以改善其妊娠結(jié)局，降低母嬰不良事件的發(fā)生率。本研究的結(jié)果顯示，這1196 株GBS 對(duì)青霉素和萬(wàn)古霉素的敏感率均為100%。這與湯紅梅、李小南、鐘匯等[3-5]報(bào)道的研究結(jié)果基本一致。美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推薦用青霉素或氨芐青霉素來(lái)預(yù)防或治療妊娠期GBS 感染。青霉素具有抗菌譜窄、副作用小、不會(huì)導(dǎo)致胎兒畸形等優(yōu)點(diǎn)，可作為臨床上預(yù)防和治療妊娠期GBS 感染的首選抗菌藥物[6]。萬(wàn)古霉素具有肝腎毒性，氟喹諾酮類(lèi)抗菌藥物會(huì)影響新生兒關(guān)節(jié)軟骨的發(fā)育，二者均不適用于孕產(chǎn)婦和新生兒。本研究的結(jié)果顯示，GBS 對(duì)紅霉素和克拉霉素的耐藥率分別為73.2%和64%。這與符宏建等[7]的研究結(jié)果基本一致。對(duì)于對(duì)青霉素輕度過(guò)敏的孕產(chǎn)婦來(lái)說(shuō)，可選用一代或二代頭孢菌素類(lèi)抗生素對(duì)其進(jìn)行治療。若孕產(chǎn)婦對(duì)青霉素重度過(guò)敏，可選用紅霉素或克林霉素對(duì)其進(jìn)行治療[5]。

綜上所述，這1196 株GBS 主要來(lái)自我院的婦產(chǎn)科。GBS對(duì)青霉素和萬(wàn)古霉素較為敏感，對(duì)紅霉素和克拉霉素的耐藥性較高。臨床上應(yīng)對(duì)孕產(chǎn)婦進(jìn)行產(chǎn)前篩查，若發(fā)現(xiàn)其存在GBS 感染應(yīng)使用青霉素和萬(wàn)古霉素等抗菌藥物對(duì)其進(jìn)行治療。