張?zhí)咸?, 陳勝昌 , 張華琦 , 陸小蘿 , 盧盛勇 , 李景上 , 李海霞
(1.貴州大學動物科學學院,貴州貴陽 550025;2.銅仁市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,飼草飼料工作站,貴州銅仁 554300;3.銅仁職業(yè)技術學院;畜禽健康養(yǎng)殖中心,貴州銅仁 554300)
仔豬斷奶時因各組織器官還需進一步發(fā)育,機能尚需進一步完善,再加上心理、環(huán)境、飼料等因素的改變易引起應激反應(Bomba 等,2014),導致仔豬消化吸收能力差、免疫力低下、腹瀉,并最終導致存活率降低。 目前生產(chǎn)中往往選擇抗生素來預防和治療仔豬疾病, 來達到減緩應激和促進生長的目的。Bax 等(2000)研究表明,大部分細菌對抗生素都有抗藥性,導致畜禽的免疫機能降低,患病率增加, 同時抗生素的殘留會影響畜禽產(chǎn)品的安全。 微生態(tài)制劑能夠有效調(diào)節(jié)畜禽腸道菌群結(jié)構(gòu)的平衡, 促進有益菌群增殖, 抑制有害菌生長, 預防畜禽疾病的發(fā)生。 酸菜湯作為酸菜發(fā)酵的副產(chǎn)物, 不僅含有豐富的營養(yǎng)成分以及微生物區(qū)系,還具有來源廣泛、安全無害等特點,對預防人體消化道疾病、 改善腸道菌群結(jié)構(gòu)以及提高機體免疫力有著不可忽視的作用(石敏等,2014)。目前, 有關酸菜湯作為微生態(tài)制劑在養(yǎng)豬業(yè)中的應用鮮見報道。
1.1 試驗材料 試驗酸湯來源于貴州省德江縣發(fā)酵成熟的酸菜湯, 所測酸湯pH 為4.0 左右,對本試驗所使用的酸湯采用高通量測序研究發(fā)現(xiàn),酸湯中細菌種類較為豐富, 其中隸屬于厚壁菌門的乳桿菌屬為優(yōu)勢屬, 其相對豐度可達90%以上。 試驗所用的復合益生菌(旺長素)購于六畜康飼料獸藥,主要成分為嗜酸乳桿菌、釀酒酵母菌以及枯草芽孢桿菌。
1.2 試驗動物與試驗設計 試驗選用斷奶日齡31 d,體重(5.34±0.86)kg 的健康斷奶仔豬 54 頭,隨機分為6 組,每組3 個重復,每個重復3 頭豬,進行為期47 d 的飼養(yǎng)試驗,其中預試期7 d,正試期40 d。 飼養(yǎng)試驗結(jié)束時,每組選留3 頭豬進行為期5 d 的消化試驗。試驗Ⅰ組為對照組,飼喂基礎日糧(表1),試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組在基礎日糧中分別添加0.5%、1%、1.5%、2%的酸湯, 試驗Ⅵ組在基礎日糧中添加0.1%復合益生菌。
表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平
1.3 飼養(yǎng)管理 試驗仔豬在同一豬圈中,分欄飼喂,每組三欄,每欄三頭豬,每個重復為一欄。仔豬自由飲水和采食,按常規(guī)程序進行驅(qū)蟲、免疫和消毒。每天準時喂料3 次,每次喂量以仔豬吃飽后料槽內(nèi)略有余料為宜。
1.4 樣品數(shù)據(jù)采集與檢測指標
1.4.1 生長性能及腹瀉率 正試期開始和結(jié)束時每組試驗豬早晨空腹稱重, 記錄每頭豬的初始重和末重, 并記錄每個重復每天飼料的投喂量和剩余量。計算試驗期平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)(即飼料轉(zhuǎn)化率)。 正試期每天觀察試驗豬的腹瀉情況,計算腹瀉率。
1.4.2 養(yǎng)分消化率 于試驗結(jié)束前5 d, 每天下午隨排隨撿新鮮糞便100 g 并加入10%的鹽酸10 mL 固氮,置于-20 ℃冰箱保存,收糞期間每日晨飼前采集日糧樣品,試驗結(jié)束后混勻,烘干后待測養(yǎng)分含量,試驗結(jié)束后,每天糞樣混合、烘干、粉碎,測定粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、粗纖維(CF)、粗灰分(Ash),計算養(yǎng)分表觀消化率。 采用內(nèi)源指示劑法(AIA 法)測定養(yǎng)分消化率。
1.4.3 血清生化指標 于試驗結(jié)束的早上, 每個重復選2 頭接近平均體重的斷奶仔豬, 空腹進行前腔靜脈采血 5 mL,3000 r/min 離心 15 min,分離血清, 分裝于Eppendorf 管中-20 ℃條件保存,用于血清生化指標的測定。 所用試劑盒均購買于南京建成物技術有限公司, 操作方法嚴格按照試劑盒說明書的步驟進行。
1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 本試驗全部數(shù)據(jù)都采用Excel 2013 進行初步整理分析, 應用SAS 9.3 軟件中 Proc GLM 過程進行統(tǒng)計分析。 平均值的多重比較采用Duncan’s 法進行,差異顯著性水平為P <0.05。 試驗數(shù)據(jù)以“平均值±標準差”表示。
2.1 酸湯添加劑對斷奶仔豬生長性能與腹瀉率的影響 由表2 可知,試驗Ⅴ、Ⅵ組的ADFI 均顯著高于試驗Ⅰ組, 分別提高了20.75%與27.86%(P <0.05),試驗Ⅵ組的 ADFI 相較于試驗Ⅱ組顯著提高了 20.35%(P < 0.05)。 試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組ADG 分別較試驗Ⅰ組顯著提高了8.70%、13.04%、17.39%、21.74%、30.43%(P < 0.05),其中試驗Ⅵ組的ADG 最高, 顯著高于其他組 (P <0.05),試驗Ⅴ組的ADG 顯著高于試驗Ⅱ、Ⅲ組,分別提高 12%和 7.69%(P < 0.05)。各組的 F/G 差異不顯著(P >0.05)。 試驗Ⅴ組的腹瀉率最低,相比于試驗Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅳ組分別降低了 36.78%、38.90%、30.17%(P < 0.05)。
表2 酸湯添加劑對斷奶仔豬生長性能與腹瀉率的影響
2.2 酸湯添加劑對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表3 結(jié)果可知,各組的灰分差異不顯著(P >0.05)。 試驗Ⅵ組的粗脂肪顯著高于試驗Ⅰ、Ⅱ組,分別提高了 9.18%、15.55%(P < 0.05)。相比于試驗Ⅱ、 Ⅲ組, 試驗Ⅴ組的粗蛋白質(zhì)分別顯著提高了5.73%、7.41%(P < 0.05), 試驗Ⅵ組的粗蛋白質(zhì)分別顯著提高 7.66%、9.37%(P < 0.05)。 試驗Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、 Ⅵ組粗纖維顯著高于試驗Ⅰ組, 分別提高了14.63%、23.59%、16.62%、19.64%(P < 0.05)。
表3 酸湯添加劑對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響 %
2.3 酸湯添加劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響 由表4 可知,試驗Ⅴ、Ⅵ組的血清總蛋白顯著高于試驗Ⅰ組, 分別提高了13.83%、16.29%(P <0.05)。 各試驗組的白蛋白差異不顯著(P > 0.05)。對尿素氮,試驗Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ 組相比于試驗Ⅰ組分 別 顯 著 降 低 了 15.16% 、16.70% 、27.91% 、25.05%(P < 0.05)。 對甘油三酯,試驗Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ組相比于試驗Ⅰ組分別顯著降低了21.74%、24.64%、30.43%(P < 0.05)。試驗 V 組的葡萄糖比試驗Ⅰ組顯著提高13.24%(P <0.05)。
表4 酸湯添加劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響
3.1 酸湯添加劑對斷奶仔豬生長性能與腹瀉率的影響 研究表明, 酸湯中含有豐富的有機酸與礦物質(zhì),其中有機酸不僅可以增進動物食欲,提高其胃排空速率以及消化率, 還可以促進礦物質(zhì)吸收,有效提高動物生長性能,而礦物質(zhì)作為構(gòu)成動物體組織與維持正常生理功能的重要營養(yǎng)素之一,對維持細胞內(nèi)外水平平衡,保持動物健康狀態(tài)以及協(xié)助多種營養(yǎng)素發(fā)揮作用具有重要功效 (鄒大維,2015;曹山川等,2015)。 且酸湯中的某些有益菌群在動物體內(nèi)代謝旺盛, 能夠有效加強動物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,提高其飼料轉(zhuǎn)化率(史兆國等,2000)。 本試驗中,在仔豬日糧中添加酸湯以及復合益生菌均能提高仔豬的ADFI、ADG 以及整體降低仔豬的F/G 與腹瀉率, 說明酸湯與復合益生菌對提高斷奶仔豬生長性能具有一定功效,這與王娜等(2014)、祝永才等(2018)研究結(jié)果相似。酸湯能提高仔豬的生長性能, 這與其豐富的微生物區(qū)系以及營養(yǎng)成分密切相關,試驗結(jié)果表明,酸湯作為微生態(tài)制劑能夠達到與復合益生菌相似的效果,具有良好的替抗前景。其中對ADFI、ADG 以及腹瀉率,試驗Ⅴ組顯著高于對照組(P <0.05),且優(yōu)于其他酸湯組,表明試驗Ⅴ組為酸湯最優(yōu)組。 這可能是因為試驗Ⅴ組相對于其他酸湯組的添加量最大, 添加在飼料中能夠較好調(diào)節(jié)仔豬各方面生理機能。 而酸湯添加量較少,如有機酸、益生菌等很可能在胃中就被消化吸收,無法作用于腸道,導致作用效果不明顯(歐長波等,2016)。 本試驗中試驗Ⅵ組與試驗Ⅴ組仔豬生長性能結(jié)果相似, 說明酸湯作為微生態(tài)制劑能夠達到與成熟的復合益生菌相似的效果,且酸湯來源廣泛、成本更低。
3.2 酸湯添加劑對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響 微生態(tài)制劑不僅可以改善腸道菌群結(jié)構(gòu),促進有益菌在動物體內(nèi)的定植, 還可以產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶與脂肪酶等多種消化酶,促進動物機體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收(竇茂鑫等,2013)。酸湯作為天然的微生態(tài)制劑, 其內(nèi)含有的豐富微生物與有機酸,不僅可以調(diào)節(jié)動物腸道微生態(tài)平衡,降低腸道pH,還可以提高體內(nèi)消化酶活性,促進動物生長,維持其健康(Gopinger 等,2019;張?zhí)鞯龋?012;Giang 等,2010)。 相關研究表明,醋酸桿菌、乳桿菌、啤酒酵母、產(chǎn)阮假絲酵母以及明串珠菌等共同組成了酸湯的微生物菌群, 并進行著乳酸等有機酸的發(fā)酵 (江萍等,1997)。 酵母菌有發(fā)酵功能,能夠助消化并有助于益生菌的生長,為動物機體提供豐富的蛋白質(zhì),且酵母菌易富集硒元素,能為動物機體補充硒元素,提高其免疫性能(華均超等,2011)。乳酸菌不僅能利用碳水化合物進行乳酸發(fā)酵,降低飼料以及動物腸道的pH,還能提高動物腸道消化酶的活性(李瑞等,2013)。 酸湯中復雜而豐富的微生物區(qū)系, 能夠產(chǎn)生優(yōu)勢互補疊加的作用,在動物體內(nèi)產(chǎn)生積極影響。本試驗中,酸湯與復合益生菌組的粗脂肪與粗纖維消化率較對照組明顯提高,以試驗V 組與試驗VI 組效果最好,而粗灰分與粗蛋白質(zhì)則無明顯影響。 整體而言,酸湯作為微生態(tài)制劑對斷奶仔豬的養(yǎng)分消化率有著積極影響。本試驗結(jié)果與多數(shù)微生態(tài)制劑在斷奶仔豬上的試驗結(jié)果相似。黃金華等(2014)在斷奶仔豬的基礎日糧中添加不同比例的復合益生菌發(fā)現(xiàn),復合益生菌組的粗纖維、粗脂肪、鈣、磷以及總能等消化率均顯著高于對照組(P < 0.05)。 楊紅萍等(2017)研究發(fā)現(xiàn),在斷奶仔豬的基礎日糧中添加不同比例的復合微生態(tài)制劑, 均能顯著提高仔豬的粗蛋白質(zhì)、總鈣、總磷的表觀消化率(P <0.05),而對于干物質(zhì)的消化率無明顯影響,且微生態(tài)制劑的添加比例越高,對養(yǎng)分消化率的效果越好。
3.3 酸湯添加劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響血清生化指標作為反映動物機體代謝狀況的重要指標之一,一定程度上可以反映機體的生長發(fā)育與健康狀況, 與動物的生長密切相關 (田軍權等,2017)。血清總蛋白主要包括白蛋白與球蛋白,總蛋白是反映動物體蛋白質(zhì)代謝和吸收狀況的基礎指標;白蛋白是動物機體蛋白質(zhì)的來源之一,由動物體肝臟合成,具有維持血清滲透壓與運輸營養(yǎng)物質(zhì)的作用; 血清尿素氮作為蛋白質(zhì)分解代謝的產(chǎn)物,是血液中除蛋白質(zhì)之外的一種含氮化合物,由腎小球濾過從而排出體外,尿素氮升高,常見于腎功能不全,是反映腎臟代謝的基礎指標;血清葡萄糖是反映動物機體對糖類消化吸收的重要指標;血清甘油三酯是脂質(zhì)的組成成分,一般情況在血液中保持著動態(tài)平衡, 其含量升高為心血管疾病的危險因素,是反映脂肪代謝的基礎指標(王清峰等,2018)。本試驗中,在仔豬日糧中添加酸湯與復合益生菌能不同程度提高仔豬血清總蛋白、血糖含量,以及降低血清中甘油三酯與尿素氮含量。其中酸湯組中試驗V 組的效果最好,在提高血清總蛋白、葡萄糖以及降低尿素氮含量上與對照組差異顯著 (P <0.05)。試驗II 組與試驗IV 組的甘油三酯含量相比于試驗 I 組(對照組)顯著降低(P < 0.05)。 說明酸湯作為微生態(tài)制劑應用在仔豬的養(yǎng)殖中具有良好的效果,能夠不同程度提高動物機體蛋白質(zhì)的合成代謝以及糖類的吸收利用,一定程度上有利于腎臟健康。 本試驗結(jié)果與楊興槐 (2016)、 金三俊等(2017) 將微生態(tài)制劑應用在仔豬養(yǎng)殖中以探求其對血液指標影響的研究結(jié)果相似。
日糧中添加適量的酸湯添加劑可與商品復合益生菌取得大致相同的抗仔豬斷奶應激效果,能夠不同程度提高其生長性能、養(yǎng)分消化率,改善血液生化指標,且預防腹瀉效果更好。