李云松

(昆明市?？诹謭?，云南 昆明 650114)

1 引言

松材線蟲病是一種傳染性強、蔓延速度快、危害后果嚴重的森林病害。在松材線蟲病爆發(fā)嚴重的年份，會帶來嚴重的經(jīng)濟損失、生態(tài)損失。在上級領導重視與支持下，昆明市?？诹謭鲇?018年開始全面啟動松材線蟲病的調(diào)查工作，并在每年的春、秋兩季，分別進行一次調(diào)查，通過掌握松褐天牛寄生線蟲的比例和線蟲的類型，總結(jié)松材線蟲病的發(fā)生規(guī)律等，為開展該病的防控工作提供了必要的支持。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

本次試驗所用材料，均從昆明市?？诹謭鲋蝎@取。

2.2 試驗方法

2.2.1 室內(nèi)松褐天牛不同羽化期攜帶線蟲數(shù)的測定試驗

于2019年的9、10月份，從?？诹謭鰞?nèi)隨機選取死亡或枯萎的木材，共計50根。為了方便試驗，將其鋸成高度為150 cm，直徑在10～12 cm的木段。另外設置規(guī)格為120 cm×120 cm×120 cm的養(yǎng)蟲籠[1]。從2020年成蟲羽化開始直到結(jié)束。在整個試驗周期內(nèi)，每天記錄一次羽化成蟲的數(shù)量，并分別統(tǒng)計雌性與雄性成蟲數(shù)量。此外，采用隨機抽樣的方法，測定羽化成蟲攜帶線蟲的數(shù)量。測量方法為：將隨機抽選到的羽化松褐天牛，用剪刀剪成3～5個小塊，然后放于盛有10 mL去離子水的安瓿瓶中。輕輕晃動，然后靜置約12 h。用移液槍抽取上層液體0.2 mL，均勻滴在2個載玻片上，移動至低倍顯微鏡下進行觀察。記錄觀察到的線蟲數(shù)量，然后將數(shù)量擴大50倍，近似為10 mL去離子水中松材線蟲的總數(shù)[2]。

2.2.2 林內(nèi)松褐天牛不同羽化期攜帶線蟲數(shù)量的測定試驗

在2020年5、6月份，于?？诹謭鰞?nèi)隨機防止昆蟲誘捕器，一段時間后取回誘捕器，并將內(nèi)部的松褐天牛取出。根據(jù)羽化期的不同，分成3部分，5月上、中旬為初期，5月下旬及6月上旬為中期，6月中旬、下旬為后期[3]。在測定方法上與上文一致。

2.2.3 誘木中線蟲數(shù)量的測定試驗

在2020年4、5月份，隨機挑選出10段誘木，在每段上設置3～4個樣本點。保證取樣點均位于樹干，且木段木絲為自然狀態(tài)的含水量，每個樣本點上各選擇2 g木絲。將選取的樣品，用貝爾曼漏斗分離法進行分離、鏡檢，可以測得每個木段中線蟲的數(shù)量[4]。在試驗過程中，如果發(fā)現(xiàn)線蟲密度過大，無法準確的統(tǒng)計數(shù)量，則可以采用稀釋法，稀釋一定倍數(shù)后，統(tǒng)計線蟲數(shù)，然后再乘以稀釋倍數(shù)，可以得到近似數(shù)值[5]。

3 結(jié)果

3.1 室內(nèi)松褐天牛不同羽化期攜帶線蟲數(shù)量

本次試驗中的松褐天牛，從2020年的5月份開始羽化，至7月末結(jié)束。統(tǒng)計結(jié)果顯示，養(yǎng)蟲籠內(nèi)共有松褐天牛134只。其中，有37只攜帶線蟲，占比為27.6%。37只松褐天牛中，共統(tǒng)計到各類線蟲18907條，平均每只松褐天牛攜帶511只線蟲。通過初步分類，這些線蟲中擬松材線蟲數(shù)量為7662條，其他線蟲數(shù)量為11245條。每只松褐天牛最少攜帶數(shù)為86只，最多攜帶數(shù)為2115只。具體情況如表1所示。

表1 室內(nèi)松褐天牛不同羽化期攜帶線蟲的數(shù)量 只

3.2 林內(nèi)誘捕松褐天牛不同羽化期攜帶線蟲數(shù)量

在誘捕器內(nèi)共捕獲松褐天牛114頭，其中有25只攜帶線蟲，占比為21.9%。統(tǒng)計攜帶各類線蟲總數(shù)為10725只，平均每只松褐天牛攜帶429只松材線蟲。通過初步分類，這些線蟲中擬松材線蟲數(shù)量為3628條，其他線蟲數(shù)量為7097條。最少攜帶數(shù)為61條，最大攜帶數(shù)為1884條。按照上述方法，將松褐天牛按照羽化期分成3個階段，5月上、中旬為初期，5月下、6月上旬為中期，6月中、下旬為后期。不同羽化期的松褐天牛攜帶線蟲數(shù)量如表2所示。

表2 林內(nèi)誘捕松褐天牛不同羽化期攜帶線蟲數(shù)量 只

4 討論

4.1 松褐天牛攜帶線蟲數(shù)量方面

通過對比可以發(fā)現(xiàn)，室內(nèi)剛羽化的松褐天牛，每只攜帶的線蟲平均數(shù)為511條，而林內(nèi)誘捕的松褐天牛，每只攜帶的線蟲平均數(shù)為429條，兩者之間的差距較為明顯。究其原因，可能與松褐天牛的獲取方式有關。在林內(nèi)誘捕試驗中，為了吸引松褐天牛進入到誘捕器內(nèi)，試驗人員會事先在誘捕器內(nèi)放置一定量的食物[6]。進入到誘捕器的松褐天牛，可以獲得較為豐富的食物。部分線蟲已從天牛取食的松樹嫩梢傷痕進入寄主，松褐天牛成蟲體上分離的僅是滯留的部分線蟲；而從罹病木截獲的剛羽化的松褐天牛成蟲未經(jīng)補充營養(yǎng)，攜帶的線蟲未進入寄主樹體[7]。

4.2 不同羽化期松褐天牛攜帶線蟲數(shù)量方面

在室內(nèi)獲取的松褐天牛中，羽化后期成蟲攜帶線蟲的數(shù)量，相比于前期有了一定幅度的下降[8]。以雄性松褐天牛為例，后期羽化成蟲的線蟲平均攜帶數(shù)量為513條/只，而前期這一數(shù)據(jù)為538條/只。相比之下，林內(nèi)捕獲的松褐天牛中，羽化后期成蟲攜帶線蟲的數(shù)量，則比前期有了較為明顯的提升。還是以雄性松褐天牛為例，前期數(shù)值為459條/只，后期該數(shù)值則達到了569條/只。分析其原因，可能與羽化后期，室內(nèi)枯死木段線蟲賴以生存的濕度與溫度以及營養(yǎng)條件與外界相差太大，線蟲存活量大大減少有關[9]。

5 結(jié)語

昆明市從2018年開始，加強了對松材線蟲病的調(diào)查、研究，通過研究判斷掌握了各類線蟲的發(fā)生規(guī)律、活動特點?，F(xiàn)有的實驗數(shù)據(jù)表明，?？诹謭鰞?nèi)有一定數(shù)量的擬松材線蟲和其他線蟲，但是未發(fā)現(xiàn)有松褐天牛攜帶松材線蟲，說明現(xiàn)階段?？诹謭鲞€未有松材線蟲病發(fā)生，但是仍然需要引起警惕。下一步還要繼續(xù)進行更加深入和廣泛的調(diào)查研究，通過擴大樣本數(shù)量、降低數(shù)據(jù)誤差，提高分析的精度，從而指導?？诹謭鏊刹木€蟲病防控工作的更好開展。