寇培培 任雪雯 王玉天 古文倩 肖飛

摘要 目的：探討小兒化毒散治療上呼吸道感染的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)機(jī)制。方法：從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）篩選小兒化毒散中的主要化學(xué)成分并收集潛在作用靶點(diǎn);從GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)及TTD數(shù)據(jù)庫(kù)篩選人的上呼吸道感染疾病靶點(diǎn);利用在線程序繪制韋恩圖并獲得小兒化毒散與上呼吸道感染的共同靶點(diǎn)，應(yīng)用Cytoscape軟件構(gòu)建“中藥-重要活性成分-疾病靶點(diǎn)”作用網(wǎng)絡(luò)圖;運(yùn)用STRING平臺(tái)構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò);使用DAVID平臺(tái)進(jìn)行基因本體（GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書(shū)（KEGG）通路分析;應(yīng)用分子對(duì)接將化合物-靶點(diǎn)可視化處理。結(jié)果：小兒化毒散共篩選出131個(gè)有效化合物和相應(yīng)靶點(diǎn)107個(gè)，上呼吸道感染篩選出7 339個(gè)相關(guān)疾病靶點(diǎn)，并得到92個(gè)共同作用靶點(diǎn)，富集分析篩選后得到30個(gè)GO條目和46條KEGG信號(hào)通路，分子對(duì)接得到3個(gè)關(guān)鍵化合物和1個(gè)靶點(diǎn)。結(jié)論：小兒化毒散治療上呼吸道感染可能通過(guò)其關(guān)鍵成分槲皮素、黃芩素和異鼠李素作用于IL6、HIF1A等13個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、控制缺氧機(jī)制進(jìn)而發(fā)揮治療上呼吸道感染的治療效果。

關(guān)鍵詞 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);小兒化毒散;上呼吸道感染;分子對(duì)接

Network Pharmacology and Molecular Docking Study on UpperRespiratory Tract Infection Treated by Xiaoer Huadu Powder

KOU Peipei1，REN Xuewen2，WANG Yutian2，GU Wenqian3，XIAO Fei3

（1 Shijiazhuang Xinxing Pharmacy Chain Co.，Ltd.，Shijiazhuang 050000，China; 2 Dongfang Hospital，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100078，China; 3 Jianmin Group Children′s Drug Research Institute，Wuhan 430052，China）

Abstract Objective：To explore the network pharmacology mechanism of Xiaoer Huadu Powder in the treatment of upper respiratory tract infection.Methods：We screened the main chemical components of Xiaoer Huadu Powder from TCMSP database and collect potential targets; screened human upper respiratory tract infection disease targets from GeneCards database，OMIM database and TTD database; used online programs to drawy Venny diagrams and obtain pediatrics.The common target of Xiaoer Huadu Powder and upper respiratory tract infection，Cytoscape software were used to construct a network diagram of “Chinese medicine-important active ingredients-disease targets”; the STRING platform was used to construct the protein-protein interaction（PPI） network diagram display; the DAVID platform was used for GO function enrichment.We set analysis and KEGG pathway analysis; application of molecular docking to visualize compound-target.Results：A total of 131 effective compounds and 107 corresponding targets were screened out from Xiaoer Huadu Powder，7 339 related disease targets were screened out from upper respiratory tract infection，and 92 common targets were obtained.30 go entries and 46 KEGG signaling pathways were obtained after enrichment analysis.A total of 3 key compounds and one target were obtained by molecular docking.Conclusion：Xiaoer Huadu Powder in the treatment of upper respiratory tract infection may exert its therapeutic effect on upper respiratory tract infection through its key components quercetin，baicalein and isorhamnetin acting on IL6、HIF1A target proteins，regulating inflammatory response，control hypoxia mechanism.

Keywords Network pharmacology; Xiaoer Huadu Powder; Upper respiratory tract infection; Molecular docking

中圖分類(lèi)號(hào)：R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.23.016

上呼吸道感染是由各種病毒和/（或）細(xì)菌感染而導(dǎo)致的主要侵犯鼻、咽或喉部急性炎癥的總稱(chēng)。常見(jiàn)病原體為病毒，僅少量由細(xì)菌引起。全年皆可發(fā)病，冬春季節(jié)多見(jiàn)，可通過(guò)直接接觸或者飛沫等傳播。主要臨床癥狀表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱、食欲不振、盜汗[1-2]。臨床上僅小兒的發(fā)病率為10%～20%[3]，該病不僅發(fā)病率較高，發(fā)病急驟，還易反復(fù)發(fā)作，纏綿難愈。若治療不當(dāng)或不及時(shí)，極易引發(fā)心肌炎、風(fēng)濕病等，甚至威脅患者的生命安全[4]。中醫(yī)認(rèn)為，上呼吸道感染屬于“上感”“感冒”等范疇，先天不足或后天臟腑虛弱，衛(wèi)外不固，每逢季節(jié)交替易受外邪侵襲。外邪入體從口鼻、皮毛入體，導(dǎo)致肺氣宣發(fā)肅降失調(diào)，痰濁內(nèi)生，主要表現(xiàn)為鼻塞、流涕、咳嗽、發(fā)熱等臨床癥狀[5]。

臨床上，西藥常以抗病毒抗炎治療為主，雖然能夠有效控制患者臨床癥狀，但是隨著病原菌變異及耐藥菌株的出現(xiàn)，長(zhǎng)期反復(fù)應(yīng)用抗病毒、抗生素藥物的成人用藥后效果不明顯，且對(duì)小兒的生長(zhǎng)發(fā)育及身心健康直接造成不良影響。因小兒體質(zhì)特殊，臟腑嬌嫩，免疫系統(tǒng)發(fā)育不夠完全，應(yīng)用西藥抗病毒抗生素治療，恐其藥效峻猛，傷及本源，故臨床可采用功效相似但較為和緩的小兒化毒散治療。小兒化毒散取自明·翁仲仁撰的《痘疹金鏡錄》其中的“賽金化毒散”，現(xiàn)已收錄于《中華人民共和國(guó)藥典》（2010版）[6]。本方共人工牛黃、珍珠、雄黃、大黃、黃連、冰片、天花粉、川貝母、乳香（制）、沒(méi)藥（制）、赤芍、甘草12味藥[7]。具有清熱解毒，活血消腫的療效。本用于治療熱毒內(nèi)蘊(yùn)、毒邪未盡所致的瘡瘍潰爛、口瘡腫痛、大便秘結(jié)等[6-10]。現(xiàn)臨床將其廣泛應(yīng)用于小兒呼吸道疾病和皮膚病，如上呼吸道感染[11]、黃水瘡（天皰瘡、滴膿瘡）[12]，水痘[13]、新生兒臍炎[14]、化膿性扁桃體炎[15-17]、皰疹性咽峽炎[18]、流行性腮腺炎[19]等治療。但其作用機(jī)制尚未有詳細(xì)報(bào)道，本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究小兒化毒散治療上呼吸道感染的作用機(jī)制，以期為后續(xù)試驗(yàn)研究提供理論基礎(chǔ)，現(xiàn)將結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 小兒化毒散活性成分的篩選

從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）（http：//tcmspw.com/tcmsp.php）[20]中藥數(shù)據(jù)庫(kù)、SymMap（http：//www.symmap.org/）數(shù)據(jù)庫(kù)、ETCM（http：//www.tcmip.cn/ETCM/index.php/Home/Index/）數(shù)據(jù)庫(kù)檢索出小兒化毒散的中藥主要化學(xué)成分。藥物在體內(nèi)需要經(jīng)過(guò)吸收、分布、代謝及排泄過(guò)程到達(dá)靶器官發(fā)揮藥效，因此，以口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）[21]類(lèi)藥性（Drug Likeness，DL）[22]作為篩選條件對(duì)各中藥化學(xué)成分進(jìn)行篩選，將其設(shè)定為OB≥30%，DL≥0.18，篩選出小兒化毒散的主要活性成分。

1.2 活性成分潛在靶點(diǎn)收集與篩選

通過(guò)TCMSP收集主要活性成分的潛在蛋白靶點(diǎn)，將篩選得到的靶蛋白英文名輸入到UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)中（http：//www.uniprot.org/），篩選出物種為“Homo Sapiens”的靶點(diǎn)，得到成分靶點(diǎn)基因，并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化命名。

1.3 上呼吸道感染相關(guān)靶點(diǎn)的獲取及篩選

以“Upper Respiratory Tract Infection”為檢索關(guān)鍵詞在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genecards.org/）、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//omim.org/）、TTD數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//db.idrblab.net/ttd/）、DisGeNET數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.disgenet.org/）以及CTD數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//ctdbase.org/）收集與上呼吸道感染相關(guān)的靶點(diǎn)，去重后得到疾病候選靶點(diǎn)基因。

1.4 小兒化毒散主要活性成分與上呼吸道感染共同靶點(diǎn)的獲取

利用Venny 2.1在線程序（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html）將小兒化毒散中的活性成分潛在靶點(diǎn)與上呼吸道感染相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行匹配，繪制韋恩圖并獲得小兒化毒散與上呼吸道感染的共同作用靶點(diǎn)，并利用Cytoscape 3.7.2軟件（http：//www.cytoscape.org/）構(gòu)建“中藥-重要活性成分-疾病靶點(diǎn)”作用網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 核心靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將共同靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//string-db.org/）[23]，設(shè)定物種為“Homo Sapiens”，設(shè)定最低要求互動(dòng)分?jǐn)?shù)為中度信度0.400，其他參數(shù)保持默認(rèn)值，得到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（Protein-Protein Interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)圖以及相關(guān)信息，將其中條目Node1，Node2和Combined Score數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件，借助“Network Analyzer”功能對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?，獲取相關(guān)拓?fù)鋮?shù)，以大于節(jié)點(diǎn)連接度（Degree）的2倍中位數(shù)作為篩選依據(jù)獲得關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.6 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析

將關(guān)鍵靶點(diǎn)導(dǎo)入至DAVID平臺(tái)（https：//david.ncifcrf.gov/）進(jìn)行基因本體（GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書(shū)（KEGG）通路富集分析，其中設(shè)置閾值P<0.1，最小計(jì)數(shù)為1，富集因子>1.0，并對(duì)P值取負(fù)對(duì)數(shù)，-logP值越大表明富集程度越大。GO富集生物學(xué)過(guò)程（Biological Process，BP）、細(xì)胞組分（Cellular Component，CC）及分子功能（Molecular Function，MF）。并將最后的結(jié)果進(jìn)行可視化展示。

1.7 分子對(duì)接驗(yàn)證

在PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)中下載5個(gè)主要化合物的2D結(jié)構(gòu)，利用Chem3D進(jìn)行優(yōu)化。并在PDB數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索并下載3個(gè)互作靶點(diǎn)蛋白3D圖，利用PyMOL 2.4.0軟件對(duì)靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行除水、去除原配體。最后運(yùn)用AutoDock的可視化軟件進(jìn)行分子對(duì)接。

2 結(jié)果

2.1 小兒化毒散的主要化學(xué)成分及作用靶點(diǎn)

本研究共檢索出小兒化毒散中中藥活性成分，其中雄黃及珍珠主要成分為微量元素砷、鈣、鋅、鐵等，故不在此討論。其余10味中藥，根據(jù)口服生物利用度及類(lèi)藥性共篩選出229種候選藥效成分，其中人工牛黃5種，大黃16種，黃連14種，冰片5種，天花粉2種，川貝母13種，乳香8種，沒(méi)藥45種，赤芍29種，甘草92種。去重后共得131項(xiàng)候選成分，這里僅羅列部分成分。見(jiàn)表1。

2.2 小兒化毒散藥效成分靶點(diǎn)預(yù)測(cè)及篩選

在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中篩查藥效成分靶蛋白，將篩選得到的靶蛋白英文名輸入到UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)中，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化命名，最終得到藥效成分靶點(diǎn)基因973個(gè)，篩去重復(fù)最后共得藥效成分靶點(diǎn)基因107個(gè)。

2.3 上呼吸道感染的疾病靶點(diǎn)的收集

分別在GeneCards、OMIM、TTD、DisGeNET以及CTD數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索獲得上呼吸道感染基因靶點(diǎn)，其中從GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)共獲得7 208個(gè)上呼吸道感染的基因靶點(diǎn)，TTD數(shù)據(jù)庫(kù)共獲得6個(gè)基因靶點(diǎn)，OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)共獲得181個(gè)基因靶點(diǎn)，余數(shù)據(jù)庫(kù)未見(jiàn)相應(yīng)疾病靶點(diǎn)，最后進(jìn)行去重，共得到7 339個(gè)上呼吸道感染相關(guān)疾病靶點(diǎn)。

2.4 中藥-疾病共同靶點(diǎn)的篩選

將小兒化毒散活性成分潛在靶點(diǎn)與上呼吸道感染相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行匹配，獲得小兒化毒散與上呼吸道感染的共同靶點(diǎn)92個(gè)。見(jiàn)表2。并繪制韋恩圖。見(jiàn)圖1。利用Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建“中藥-重要活性成分-疾病靶點(diǎn)”作用網(wǎng)絡(luò)圖。見(jiàn)圖2。

2.5 核心靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及關(guān)鍵蛋白的篩選

將92個(gè)共同靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，得到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)圖。見(jiàn)圖3。PPI網(wǎng)絡(luò)包括92個(gè)節(jié)點(diǎn)、257條邊、平均節(jié)點(diǎn)度為18.2、平均局部聚類(lèi)系數(shù)為0.586。用Cytoscape 3.7.2軟件對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治觥Ｒ?jiàn)圖4。獲取相關(guān)拓?fù)鋮?shù)，以節(jié)點(diǎn)連接度（Degree）的2倍中位數(shù)作為依據(jù)對(duì)靶點(diǎn)和藥物成分進(jìn)行篩選，獲得關(guān)鍵靶點(diǎn)13個(gè)，分別為IL6、HIF1A、VEGFA、MYC、ESR1、CASP3、EGFR、PPARG、CCND1、FOS、ERBB2、CASP8、CYCS，并可視化處理。見(jiàn)圖5。關(guān)鍵藥效成分共15種，并按照Degree值排序。見(jiàn)表3。其中槲皮素、黃芩素、異鼠李素、β谷甾醇等成分較為突出。

2.6 GO富集分析及靶點(diǎn)通路分析

關(guān)鍵靶點(diǎn)主要分布于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核質(zhì)、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜等，通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、酶結(jié)合、相同的蛋白質(zhì)結(jié)合、蛋白質(zhì)異二聚體活性、序列特異性DNA結(jié)合、蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)合等方式，參與上皮細(xì)胞增殖的正調(diào)控、對(duì)雌二醇的反應(yīng)、對(duì)藥物有反應(yīng)、RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控、對(duì)寒冷的反應(yīng)等生物進(jìn)程。見(jiàn)圖6。KEGG通路富集分析發(fā)現(xiàn)，13個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)顯著富集在46條通路上。見(jiàn)圖7。除去癌癥通路，HIF-1、Legionellosis、Viral myocarditis、Herpes simplex infection和TNF信號(hào)通路等與上呼吸道感染關(guān)系密切。

2.7 分子對(duì)接

IL6，HIF1A，VEGFA的蛋白晶體結(jié)構(gòu)選擇的標(biāo)準(zhǔn)為最終選擇的晶體結(jié)構(gòu)分別為5FUC、3HQU和5T89。將槲皮素、黃芩素、異鼠李素、β-谷甾醇、豆甾醇5個(gè)藥物活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)HIF1A、IL6、VEGFA逐一進(jìn)行對(duì)接，通過(guò)aotodock進(jìn)行對(duì)接，結(jié)合自由能越低（顏色越深），預(yù)測(cè)結(jié)合模式越好[24]。見(jiàn)表4。本研究運(yùn)用PyMOL 2.4.0軟件和AutoDock的可視化軟件進(jìn)行對(duì)接并將其對(duì)接結(jié)果繪制為3D示意圖。見(jiàn)圖8。除結(jié)合能外，分子對(duì)接的氫鍵也是分子對(duì)接的柔性程度的重要指標(biāo)（黃色虛線）。綜上所述，小兒化毒散治療上呼吸道感染方面，槲皮素、黃芩素、異鼠李素可能為關(guān)鍵的活性成分，反向驗(yàn)證了HIF1A可能為其關(guān)鍵作用靶點(diǎn)。

3 討論

本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法構(gòu)建了小兒化毒散的“藥物-活性成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)。其中，在活性化合物中，按照大于等于Degree值2倍中位數(shù)篩選過(guò)后，有效成分中槲皮素、黃芩素、異鼠李素、β谷甾醇等成分作用較為突出。槲皮素是一種黃酮類(lèi)物質(zhì)，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，其具有明顯的抗氧化、抗炎、抗腫瘤和血管保護(hù)等多種藥理活性[25]。細(xì)胞半數(shù)毒性濃度試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，槲皮素能明顯抑制人巨細(xì)胞病毒感染引起的細(xì)胞病變效應(yīng)，且安全性較好[26]。黃芩素是中藥黃芩中含量最高的黃酮類(lèi)成分，也是黃芩發(fā)揮功效的主要活性成分，具有清除自由基、抗炎、抗腫瘤、保護(hù)心腦血管等作用[27]。王力彬[28]研究發(fā)現(xiàn)，黃芩素對(duì)小鼠急性肺炎具有明顯的抑制作用。且黃芩素可呈劑量依賴(lài)性抑制H1N1病毒mRNA中后期合成[29]。黃芩素和利巴韋林體外抗H1N1的細(xì)胞半數(shù)毒性濃度試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，黃芩素較利巴韋林具有更強(qiáng)的抗病毒作用[30]。異鼠李素是一種已知黃酮類(lèi)化合物，在抗炎、抗腫瘤和抗病毒等方面具有較好的作用[31-32]。研究發(fā)現(xiàn)，β-谷甾醇在抗氧化、抗高血脂、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等方面表現(xiàn)出良好的藥理作用[33]。應(yīng)用β-谷甾醇可抑制肺組織病理學(xué)中的氣道炎癥[34]。可見(jiàn)，小兒化毒散在治療上呼吸道感染時(shí)，不僅兼具抗病毒、抗炎作用，在安全性方面也有突出優(yōu)勢(shì)，在針對(duì)小兒反復(fù)上呼吸道感染疾病時(shí)，或可比利巴韋林、抗生素更安全，具備可持續(xù)發(fā)展前景。

本研究將小兒化毒散主要活性成分調(diào)控的靶點(diǎn)與上呼吸道感染疾病的靶點(diǎn)取交集，得到92個(gè)交集靶點(diǎn)，并通過(guò)拓?fù)浞治?，選取Degree值二倍中位數(shù)篩選得到關(guān)鍵作用靶點(diǎn)13個(gè)，其中白細(xì)胞介素6（Interleukin-6，IL-6）、缺氧誘導(dǎo)因子1α多肽（Hypoxia-Inducible Factor 1-Alpha，HIF1A）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A（Vascular Endothelial Growth Factor A，VEGFA）與該疾病關(guān)系較為密切。IL-6為重要的炎癥指標(biāo)和介質(zhì)，有研究表明，IL-6可對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及炎癥細(xì)胞產(chǎn)生直接的激活和毒性作用，可通過(guò)加速和放大炎癥反應(yīng)的速度和程度，對(duì)組織器官造成損害[35]。臨床上通過(guò)測(cè)定血清IL-6的水平，對(duì)于早期評(píng)價(jià)上呼吸道感染嚴(yán)重程度具有重要意義[36]。研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α對(duì)炎癥細(xì)胞的表達(dá)有重要影響[37-38]。在抑制HIF-1α表達(dá)后，IL-6及TNF-α的活性明顯減低，炎癥反應(yīng)明顯下降[39]。VEGFA作為一種細(xì)胞生長(zhǎng)因子，由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，通過(guò)特異性與血管上皮結(jié)合促使血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)血管生成、增加微血管通透性[40]，促使炎癥介質(zhì)滲出。因此結(jié)合以上分析，推測(cè)小兒化毒散或可通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)等途徑發(fā)揮治療上呼吸道感染作用。

對(duì)以上13個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能和KEGG通路富集分析，其中GO功能分析結(jié)果主要涉及參與上皮細(xì)胞增殖的正調(diào)控、對(duì)雌二醇的反應(yīng)、對(duì)藥物有反應(yīng)、RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控等生物進(jìn)程。KEGG富集分析結(jié)果顯示，HIF-1信號(hào)通路與上呼吸道感染疾病關(guān)系較為密切。HIF-1是缺氧機(jī)制的重要因子，可以調(diào)控葡萄糖代謝、細(xì)胞增殖和血管形成，在病毒感染中有重要作用[41]。在呼吸道疾病中，氣道重塑導(dǎo)致氣道結(jié)構(gòu)的進(jìn)行性改變，使患者對(duì)藥物敏感度下降，療效不佳。有研究表明，通過(guò)抑制HIF-1，可以減輕氣道重塑[42]，降低炎癥反應(yīng)，增加患者對(duì)藥物的敏感度，從而改善患者的癥狀和預(yù)后。因此，結(jié)合本研究中關(guān)鍵靶點(diǎn)以及重要活性成分，推測(cè)小兒化毒散治療上呼吸道感染可能通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、調(diào)控缺氧機(jī)制進(jìn)而發(fā)揮治療上呼吸道感染的治療效果。

小兒化毒散以牛黃、大黃清熱解毒為君。黃連、川貝母清熱散結(jié)解毒，珍珠可以清熱解毒、生肌斂瘡，雄黃燥濕祛痰殺蟲(chóng)，天花粉排膿，共為臣藥。赤芍涼血活，乳香、沒(méi)藥活血止痛，冰片清熱止痛，內(nèi)清外透，共為佐藥。甘草清熱解毒，調(diào)和諸藥，而為佐使藥。諸藥合用，共奏清熱解毒，活血?dú)⑾x(chóng)之功，對(duì)于上呼吸道感染治療尤為適宜。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法對(duì)小兒化毒散治療上呼吸道感染的主要作用成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)、作用機(jī)制等進(jìn)行了初步探討，并運(yùn)用分子對(duì)接的方法初步驗(yàn)證該結(jié)果。結(jié)果顯示，小兒化毒散治療上呼吸道感染可能通過(guò)其關(guān)鍵成分槲皮素、黃芩素、異鼠李素通過(guò)HIF-1等信號(hào)通路作用于IL6、HIF1A及VEGFA等關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、調(diào)控缺氧機(jī)制進(jìn)而發(fā)揮治療上呼吸道感染的治療效果，并通過(guò)分子對(duì)接驗(yàn)證槲皮素、黃芩素、異鼠李素為關(guān)鍵化合物，HIF1A為關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白。本研究雖在分子對(duì)接層面初步驗(yàn)證網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果，但為臨床研究更加嚴(yán)謹(jǐn)，后續(xù)會(huì)通過(guò)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究來(lái)驗(yàn)證本研究結(jié)果，以期為上呼吸道感染的治療提供新的方法。

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（2021-08-18收稿 責(zé)任編輯：魏慶雙）