賀春霞，李慧瑾，秦 魏，邢 露，周 鑫，趙 棟，李鵬權(quán)，金 曦，曹慧玲

(陜西省缺血性心血管疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西安醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究所，陜西 西安 710021)

心腦血管疾病是全球人類(lèi)的首要?dú)⑹?，?dòng)脈粥樣硬化 (atherosclerosis，As) 是其主要病理基礎(chǔ)，高血脂導(dǎo)致的脂質(zhì)代謝紊亂，是引發(fā)As的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[1]。高密度脂蛋白 (high density lipoprotein，HDL) 是脂代謝過(guò)程中的五大載脂蛋白之一，其功能主要是參與膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)(reverse cholesterol transport，RCT)，即將外周組織中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟，轉(zhuǎn)化為膽汁酸或合成類(lèi)固醇激素，促進(jìn)膽固醇代謝，是機(jī)體排出多余膽固醇的唯一途徑。同時(shí)，HDL可通過(guò)抗炎、抗氧化作用，維持內(nèi)皮細(xì)胞完整性，保護(hù)內(nèi)皮功能。因此，HDL在As發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要保護(hù)作用，作為As和冠心病的保護(hù)因子受到廣泛重視，以升高血液HDL水平為治療策略的抗As藥物開(kāi)發(fā)一度成為熱點(diǎn)。但是，煙酸受體激動(dòng)劑和膽固醇酯轉(zhuǎn)移酶抑制劑類(lèi)藥物研發(fā)的相繼失利，提示單純升高血液HDL為治療策略抗As似乎不可行[2]。

HDL由載脂蛋白、膽固醇與調(diào)節(jié)因子組成，其載脂蛋白包括ApoA-Ⅰ和ApoA-Ⅱ，其中ApoA-Ⅰ是HDL的主要蛋白質(zhì)成分，約占其蛋白質(zhì)含量的70%。ApoA-Ⅰ在RCT中發(fā)揮關(guān)鍵作用[3]，與As和冠心病發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，是As與冠心病最重要的保護(hù)因素之一。靶向ApoA-Ⅰ研發(fā)的模擬肽，基于重組ApoA-Ⅰ研發(fā)的ApoA-Ⅰ米蘭和HDL模擬肽表現(xiàn)出良好的促RCT與抗As作用，作為有潛力的抗As藥物而備受關(guān)注。本文從ApoA-Ⅰ的結(jié)構(gòu)和功能，ApoA-Ⅰ與ABCA1 (ATP-binding cassette transporter A1)、LCAT (lecithin cholesterol Acyl transferase)與SR-B1 (scavenger receptor class B member 1) 分子互作機(jī)制，靶向ApoA-Ⅰ類(lèi)模擬肽抗As活性等方面進(jìn)行了綜述，以期為ApoA-Ⅰ模擬肽類(lèi)抗As新藥研發(fā)提供參考。

1 ApoA-Ⅰ的結(jié)構(gòu)與功能

1.1 ApoA-Ⅰ的結(jié)構(gòu)目前研究熱點(diǎn)主要集中在盤(pán)狀和球狀HDL結(jié)構(gòu)上，對(duì)于ApoA-Ⅰ結(jié)構(gòu)研究甚少。ApoA-Ⅰ由267個(gè)氨基酸組成，氨基酸1-18構(gòu)成信號(hào)肽，氨基酸19-267稱(chēng)作ApoA-Ⅰ前體，由243個(gè)氨基酸 (25-267) 構(gòu)成的肽段稱(chēng)為成熟ApoA-Ⅰ，是構(gòu)成HDL的主要成分[4]。

在成熟ApoA-Ⅰ中，推測(cè)氨基酸1-43的肽段負(fù)責(zé)蛋白間互作，其余氨基酸構(gòu)成10個(gè)串聯(lián)α螺旋，其中兩個(gè)α螺旋由11個(gè)氨基酸構(gòu)成，另外8個(gè)α螺旋由22個(gè)氨基酸構(gòu)成，為脂質(zhì)結(jié)合區(qū)，決定了盤(pán)狀HDL的直徑 (Tab 1)[5]。ApoA-Ⅰ在體內(nèi)有不載脂、少載脂和載脂3種存在形式。Mei等[6]采用X-射線衍射法研究ApoA-Ⅰ的結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，C端 (氨基酸185-243) 可形成一個(gè)半圓二聚體，該二聚體骨架由兩個(gè)反向平行的由脯氨酸連接的5個(gè)縱向AB型螺旋構(gòu)成，而N端與之相對(duì)應(yīng)區(qū)域形成四個(gè)螺旋束，中心彈性區(qū)域由兩個(gè)反向平行的螺旋 (helix5/5)構(gòu)成?；谶@項(xiàng)研究，Gursky[7]提出了HDL的“雙帶模型”：雙帶中心部分是氨基酸66-184構(gòu)成結(jié)構(gòu)保守的恒定區(qū)，而N端氨基酸1-65和C端氨基酸185-243為可變區(qū)，在HDL成熟過(guò)程中可發(fā)生重排。隨著雙帶周?chē)被酖65-P66和G185-G186鉸鏈的擺動(dòng)，這些鉸鏈區(qū)對(duì)應(yīng)不同大小的DHL顆粒，與N-端結(jié)合的包含氨基酸G39與G65兩個(gè)柔韌區(qū)逐漸解離，帶逐漸延長(zhǎng)，賦予HDL二維表面曲率到球型表面。而ApoA-Ⅰ的這一結(jié)構(gòu)特征與不同大小HDL的形成密切相關(guān)。Kontush等[4]提出每個(gè)HDL球形粒子可包含3-5個(gè)ApoA-Ⅰ分子，并進(jìn)一步建立了不同大小HDL球形粒子的模型 (Fig 1)。

Tab 1 The functional segments in ApoA-Ⅰ

隨后，Mei等[8]又研究了ApoA-Ⅰ C端結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，helix10 可能負(fù)責(zé)脂質(zhì)結(jié)合與聚集啟動(dòng)，膽固醇外排，在HDL形成過(guò)程中發(fā)揮至關(guān)重要作用。Ray等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在ApoA-Ⅰ中加入生理濃度膽固醇后，由C端特定膽固醇結(jié)合位點(diǎn)和N端新膽固醇結(jié)合位點(diǎn)驅(qū)動(dòng)的劇烈結(jié)構(gòu)擾動(dòng)，促使單體蛋白自發(fā)形成圓形構(gòu)象。由此推測(cè)，ApoA- I以階段性方式打開(kāi)，結(jié)構(gòu)變化是由特定膽固醇與ApoA-Ⅰ互作導(dǎo)致，而不是非特異疏水效應(yīng)引起。由此可見(jiàn)，C端結(jié)構(gòu)域?qū)τ贏poA-Ⅰ與脂質(zhì)結(jié)合啟動(dòng)、驅(qū)動(dòng)HDL形成具有重要作用。

1.2 ApoA-Ⅰ的功能

1.2.1ApoA-Ⅰ在RCT中的作用 HDL最主要功能是參與RCT，HDL代謝過(guò)程實(shí)質(zhì)是由ApoA- I與其他脂蛋白參與的脂質(zhì)運(yùn)輸和代謝過(guò)程。首先，膽固醇和其他脂質(zhì)通過(guò)ABCA1與空載ApoA-Ⅰ結(jié)合，形成包含兩個(gè)ApoA-Ⅰ拷貝的盤(pán)狀HDL，然后LCAT結(jié)合到ApoA-Ⅰ使膽固醇酯化，使盤(pán)狀HDL變?yōu)槌墒烨蛐蜨DL。最后，HDL攜帶脂質(zhì)通過(guò)肝HDL受體SR-B1清除，剩下空載ApoA-Ⅰ (Fig 2)。因此，ApoA- I不僅是脂質(zhì)和膽固醇在親水環(huán)境中的穿梭支架，同時(shí)也是HDL成熟與脂蛋白顆粒間通訊的錨定中心[10]。

Fig 1 Development of trefoil model for a spherical particle from double belt of ApoA-Ⅰ

Fig 2 Diagram of ApoA-Ⅰ removing cholesterol by RCT

1.2.2ApoA-Ⅰ的抗炎作用 在新西蘭白兔頸動(dòng)脈急性炎癥造模后，單次低劑量灌注ApoA-Ⅰ可減少中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，抑制中性粒細(xì)胞活化[11]。ABCA1和ABCG1 受體缺失小鼠的白細(xì)胞明顯增多，且出現(xiàn)了可移植的骨髓增生性疾病，ApoA-Ⅰ過(guò)表達(dá)可抑制該現(xiàn)象，表明ApoA-Ⅰ具有抗炎作用，可抑制炎性反應(yīng)[12]。研究表明，ApoA-Ⅰ可通過(guò)多種機(jī)制發(fā)揮抗炎作用。如ApoA-Ⅰ可以通過(guò)ABCA1，減少脂質(zhì)筏豐度，降低CD11b表達(dá)水平，從而抑制中性粒細(xì)胞的激活、遷移和粘附。另一種抗炎機(jī)制指出，ApoA-Ⅰ/HDL可降低巨噬細(xì)胞炎性小體成分表達(dá)，如 NLRP3 (NLR family pyrin domain containing 3)、IL-1以及caspase 1，發(fā)揮抗炎作用[12]。

1.2.3ApoA-Ⅰ在抗氧化、細(xì)胞增殖等方面的作用 Miroshnichenko等[13]研究了ApoA-Ⅰ在有害條件 (饑餓、缺氧條件和H2O2氧脅迫)下對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 (mesenchymal stem cells，MSCs) 存活和增殖率的影響。首次發(fā)現(xiàn)ApoA-Ⅰ可降低細(xì)胞內(nèi)活性氧簇 (reactive oxygen species，ROS)，促進(jìn)MSCs增殖，增加氧化條件下的細(xì)胞數(shù)量。缺氧條件下，MSCs處于G0/G1期時(shí)，ApoA1不影響其細(xì)胞周期，在MSCs向充氧或氧化狀態(tài)過(guò)渡時(shí)，ApoA-Ⅰ可快速激活細(xì)胞增殖，減少細(xì)胞凋亡。ApoA-Ⅰ可在各種不利條件下保護(hù)細(xì)胞，提高Ⅱ型糖尿病 (T2D) 患者M(jìn)SCs的移植效率。提示ApoA-Ⅰ具有抗氧化和促進(jìn)MSCs細(xì)胞增殖活性，在糖尿病預(yù)防和治療方面也具有開(kāi)發(fā)潛力。

2 ApoA-Ⅰ的分子互作機(jī)制

2.1 ApoA-Ⅰ與ABCA1互作在RCT過(guò)程中，ApoA-Ⅰ載脂的起始需要ABCA1輔助，是RCT的限速步驟。ABCA1可將脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)給多種參與HDL形成的脂蛋白，如ApoA-Ⅰ、ApoA-Ⅱ、ApoC、ApoE-3、ApoE-4[14]。ApoA-Ⅰ和ApoA-Ⅰ模擬肽5A可動(dòng)員ABCA1+/+巨噬細(xì)胞沉積的膽固醇微區(qū)，而無(wú)法動(dòng)員ABCA1-/-巨噬細(xì)胞沉積的膽固醇微區(qū)，說(shuō)明這種動(dòng)員依賴(lài)于巨噬細(xì)胞ABCA1，而一旦ApoA-Ⅰ模擬肽5A與磷脂復(fù)合，即使在沒(méi)有ABCA1的情況下，也可動(dòng)員巨噬細(xì)胞沉積的膽固醇微區(qū)。說(shuō)明ABCA1對(duì)于啟動(dòng)ApoA-Ⅰ載脂至關(guān)重要[15]。研究表明，缺乏helix 10的ApoA-Ⅰ截短體無(wú)法促進(jìn)膽固醇外排，線性陣列排列的兩親性α螺旋是促進(jìn)ABCA1膽固醇外流所所必需的結(jié)構(gòu)原件[16]。但空載ApoA-Ⅰ是如何獲取來(lái)自ABCA1轉(zhuǎn)運(yùn)的游離膽固醇和磷脂來(lái)啟動(dòng)球形HDL形成，ApoA-Ⅰ與ABCA1的分子互作機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

2.2 ApoA-Ⅰ與LCAT互作ApoA-Ⅰ對(duì)LCAT的活化具有重要作用。Cooke等[17]研究發(fā)現(xiàn)，完整的LCAT活性需要一個(gè)ApoA-Ⅰ分子上的helix5-7和另一個(gè)ApoA-Ⅰ分子上的helix3-4組成的雜交表位。提示ApoA-Ⅰ helix3-7對(duì)LCAT催化膽固醇酯化過(guò)程具有重要作用。在上文提到的“雙帶模型”中，兩個(gè)反向平行的ApoA-Ⅰ分子通過(guò)helix5/5形成一個(gè)與脂質(zhì)結(jié)合的通道，這個(gè)通道兩端有兩個(gè)帶正電的精氨酸R123。Gorshkova等[18]提出，這兩個(gè)特殊定位的精氨酸R123直接參與了LCAT催化膽固醇酯化過(guò)程。基于此假設(shè)，Gorshkova等制備了R123A與R123E的ApoA-Ⅰ突變體，研究表明，雖然R123突變沒(méi)有改變HDL顆粒組成和大小，也沒(méi)有改變蛋白質(zhì)構(gòu)象和穩(wěn)定性，但是，R123的兩種突變均顯著降低了LCAT的催化效率和膽固醇酯形成的表觀Vmax，對(duì)LCAT磷脂水解無(wú)影響。可見(jiàn)ApoA-Ⅰ在盤(pán)狀高密度脂蛋白上的R123對(duì)LCAT介導(dǎo)的膽固醇酯化反應(yīng)催化效率具有重要作用。

2.3 ApoA-Ⅰ與SR-B1互作LCAT催化HDL-膽固醇酯化，形成成熟的球狀HDL，而后HDL-膽固醇酯可被肝臟清道夫受體SR-B1攝取，使膽固醇酯在肝臟內(nèi)進(jìn)一步代謝，排出體外[10]。SR-B1是跨膜蛋白，包含1個(gè)高糖基化的胞外結(jié)構(gòu)域和2個(gè)胞內(nèi)尾巴，胞外結(jié)構(gòu)域由兩個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域錨定在細(xì)胞膜上。為了促進(jìn)膽固醇運(yùn)輸，HDL和SR-B1必須形成一種特定“復(fù)合物”，HDL以精確構(gòu)象與SR-B1胞外結(jié)構(gòu)結(jié)合，實(shí)現(xiàn)高效脂質(zhì)運(yùn)輸，而ApoA-Ⅰ helix4-6對(duì)于該過(guò)程具有重要作用[19]。最近關(guān)于SR-B1結(jié)構(gòu)研究顯示，SR-B1的C端跨膜結(jié)構(gòu)域含有1個(gè)亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)，當(dāng)其發(fā)生突變時(shí)，會(huì)削弱受體與HDL結(jié)合及其介導(dǎo)的膽固醇傳遞能力，這與SR-B1不能形成二聚體有關(guān)，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)SR-B1胞外結(jié)構(gòu)域的近膜區(qū)可能與脂質(zhì)表面相互作用，促進(jìn)SR-B1的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)功能[20]。

3 靶向ApoA-Ⅰ的模擬肽ApoA-Ⅰ是HDL的主要成分，是膽固醇的重要載體，血漿HDL從外周組織接收游離膽固醇，在LCAT催化下轉(zhuǎn)變成膽固醇酯。同時(shí)，ApoA-Ⅰ還是HDL受體的配體，可觸發(fā)膽固醇酯向肝細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝?；贏poA-Ⅰ在膽固醇代謝中的重要作用，ApoA-Ⅰ一直是抗As藥物研發(fā)的研究熱點(diǎn)。然而，由于高昂的人工合成成本以及缺乏口服給藥方式，ApoA-Ⅰ本身作為藥物制劑的開(kāi)發(fā)受到嚴(yán)重限制。所幸，以ApoA-Ⅰ為靶標(biāo)開(kāi)發(fā)的ApoA-Ⅰ模擬肽和ApoA-Ⅰ Milano表現(xiàn)出良好的促RCT與抗As作用，作為有潛力的抗As藥物而備受關(guān)注。

3.1 ApoA-Ⅰ模擬肽α螺旋是ApoA-Ⅰ發(fā)揮功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，因此，科學(xué)家們模擬ApoA-Ⅰ的α螺旋合成了不同氨基酸組成的α螺旋模擬肽(Tab 2)。18A是人工設(shè)計(jì)合成的第一個(gè)ApoA-Ⅰ單α螺旋模擬肽，該18A肽具有疏水氨基酸 (W，L，A，F(xiàn)，Y，V)，在極性表面具有親水性氨基酸 (D，E，K，R)，在極性/非極性界面上有帶正電荷的賴(lài)氨酸，在極性面中心有帶負(fù)電的D或E。在18A基礎(chǔ)上，科學(xué)家們進(jìn)一步設(shè)計(jì)了F系列單α螺旋模擬肽以及基于兩個(gè)18A的雙螺旋模擬肽，如37pA等。幾種小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，模擬肽6F具有抗氧化和抗炎特性，用表達(dá)6F的轉(zhuǎn)基因番茄喂養(yǎng)LDLR-/-小鼠，治療13 W后，與對(duì)照相比，改善了炎癥和抗氧化的系列生物標(biāo)志物，顯著降低了主動(dòng)脈病變面積[21]。5A是在37pA基礎(chǔ)上改良ApoA-Ⅰ模擬肽，細(xì)胞毒性較低，可通過(guò)ABCA1特異性地誘導(dǎo)膽固醇外排，具有抗炎和抗氧化特性，5A還可減少哮喘小鼠模型中的氣道炎癥[22]。ATI-5261是Bielicki等人開(kāi)發(fā)的一種由36個(gè)氨基酸組成的肽，可形成一個(gè)具有雙親性的單螺旋結(jié)構(gòu)，可誘導(dǎo)ABCA1介導(dǎo)的膽固醇外排。與安慰劑組相比，經(jīng)ATI -5261治療的小鼠主動(dòng)脈病變面積和斑塊脂質(zhì)含量顯著降低，同時(shí)隨糞便排泄甾醇增加，表明在ATI-5261治療促進(jìn)RCT，促進(jìn)了膽固醇排泄[23]。目前，ApoA-Ⅰ模擬肽ETC-642、L-4F和D-4F進(jìn)入了臨床Ⅰ期試驗(yàn)。研究表明，其具有良好的安全性和耐受性。4F的兩個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)由于在保護(hù)LDL誘導(dǎo)的單核細(xì)胞趨化性的結(jié)果上相矛盾，諾華公司終止了4F的進(jìn)一步研究。ETC-642是一種由22個(gè)氨基酸肽組成的復(fù)合物，它可形成一個(gè)雙螺旋結(jié)構(gòu)，研究發(fā)現(xiàn)，ETC-642具有良好的促進(jìn)膽固醇外排，抗炎和抑制斑塊形成的作用[24]。

Tab 2 ApoA-Ⅰ mimic peptide

PeptideCholesterolefflux 35ELK-1AEKLKELLEKLLAKLKELL-P-EKLKELLEK-LLAKLKELL22c36ELK-1FEKFKELLEKLLEKLKELL-P-EKFKELLEK-LLEKLKELL50c37ELK-2A2K2EEKLKAKLEELKAKLEELL-P-EKLKAK-LEELKAKLEELL75c38ELK-3E3EKEELKELLKELLKKLEKLL-P-ELKELLKELLKKLEKLL84c39ELK-2E2KEELKKLLEELLKKLKELL-P-EE-LKKLLEELLKKLKELL69c40ELK-PAEKLKELLEKLLEKLKELL-A-EKLKELLEK-LLEKLKELL38c41ELK-P2AEKLKELLEKLLEKLKELL-AA-EKLKELLE-KLLEKLKELL65c42ELKAEKLKAKLEELKAKLEELL-P-EKAK-AALEEAKAKAEELA0c43ELKA-CH2EKLKAKLEELKAKLEELL-P-EHA-KAALEEAKCKAEELA0c445A-CH1DHLKAFYDKVACKLKEAF-P-DWA-KAAYDKAAEKAKEAA0c455A-CH2DWLKAFYDKVAEKLKEAF-P-DHA-KAAYDKAACKAKEAA61c465A-C1DWLKAFYDKVACKLKEAF-P-DWA-KAAYNKAAEKAKEAA34c475A-H1DHLKAFYDKVAEKLKEAF-P-DWA-KAAYDKAAEKAKEAA48c

目前，模擬肽功能研究包括體內(nèi)和體外研究。體內(nèi)功能研究主要是利用模型動(dòng)物如高脂血癥家兔、LDLR-/-小鼠、ApoE-/-小鼠等進(jìn)行高脂飲食造模，然后通過(guò)腹腔注射藥物來(lái)檢測(cè)主動(dòng)脈病變面積、斑塊脂質(zhì)含量以及糞便甾醇外排等。體外功能研究主要是細(xì)胞毒性、膽固醇外排、抗炎抗氧化作用評(píng)價(jià)等，目前尚無(wú)統(tǒng)一評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。D’souza等研究了22種不同雙螺旋ApoA-Ⅰ模擬肽 (17種ELK模擬肽和5種5A模擬肽) 對(duì)膽固醇外排能力和特異性，對(duì)單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的抑制作用，對(duì)LDL氧化的抑制作用。結(jié)果表明，沒(méi)有一種模擬肽在所有抗As功能的各方面都表現(xiàn)優(yōu)良，不同抗As功能主要受特定結(jié)構(gòu)特征的影響。平均疏水性、電荷量、疏水面大小和螺旋間連接角度是決定膽固醇流出效率和特異性的主要因素，疏水表面電荷和大小是影響抗炎性能的主要因素，半胱氨酸和組氨酸的存在是決定抗氧化性能的主要因素[25]。ApoA-Ⅰ模擬肽的構(gòu)效關(guān)系研究，對(duì)于ApoA-Ⅰ模擬肽設(shè)計(jì)和改造具有重要指導(dǎo)意義。

3.2 基于重組ApoA-Ⅰ的HDL模擬肽除了上述基于ApoA-Ⅰ α螺旋研發(fā)的模擬肽，利用重組ApoA- I和磷脂類(lèi)脂質(zhì)組成的HDL模擬肽也取得了一定進(jìn)展(Tab 3)。ApoA-Ⅰ Milano是一種人源的自然突變，該突變攜帶者特征是HDL-C水平降低，而沒(méi)有預(yù)期的CVD風(fēng)險(xiǎn)增加。與ApoA-Ⅰ相比，ApoA-Ⅰ Milano可誘導(dǎo)更多ABCA1介導(dǎo)的膽固醇外排，同時(shí)還具有優(yōu)良的抗炎和斑塊穩(wěn)定特性[38]。動(dòng)物模型證實(shí)，ApoA-Ⅰ Milano短期灌注，可促進(jìn)As斑塊消退[26]，由此研發(fā)的ETC-216已進(jìn)入二期臨床實(shí)驗(yàn)。在II期臨床試驗(yàn)中，在急性冠脈綜合征 (ACS) 后的一小群患者中，應(yīng)用ETC-216后，采用血管內(nèi)超聲 (IVUS) 檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化顯著消退。但是，嚴(yán)重免疫刺激副作用阻礙了對(duì)ETC-216的進(jìn)一步評(píng)價(jià)研究。MDCO-216，一種ETC-216改良肽，可消除不良免疫刺激，但其對(duì)動(dòng)脈粥樣斑塊的治療效果也大大減弱[27]。目前尚無(wú)對(duì)ApoA-Ⅰ Milano的進(jìn)一步研究報(bào)道。CSL-112是一種由ApoA-Ⅰ和磷脂組成的重組HDL，其前體分子CSL-111由于高肝毒性而暫停研究。CSL-112的一期和二期臨床研究已經(jīng)完成，結(jié)果表明，其可顯著增強(qiáng)膽固醇外流，具有良好耐受性，無(wú)明顯臟器毒性或免疫原性，目前已進(jìn)入三期臨床研究[28]。CER-001是一種初生HDL模擬肽，由重組ApoA-Ⅰ和雙磷脂酰甘油及鞘磷脂兩種磷脂組成，CER-001對(duì)于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者的改善作用具有劑量依賴(lài)性，表現(xiàn)為U型劑量曲線，建議使用3 mg·kg-1劑量。在家族性低α蛋白血癥患者中應(yīng)用已進(jìn)入三期臨床試驗(yàn)[29-30]。

Tab 3 ApoA-Ⅰ based reconstituted HDL mimics

4 結(jié)語(yǔ)

ApoA-Ⅰ作為HDL的主要蛋白成分，在RCT過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。雖然目前尚無(wú)成熟藥物上市，但基于ApoA-Ⅰ結(jié)構(gòu)和功能研發(fā)的模擬肽類(lèi)藥物表現(xiàn)出良好的促RCT與抗As活性，具有廣闊的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用前景。由于ApoA-Ⅰ單體及HDL不同成熟階段的結(jié)構(gòu)尚未解析，基于結(jié)構(gòu)與功能的研究還有待進(jìn)一步完善。不同成熟階段HDL與其載脂的分子作用機(jī)制尚不明確，導(dǎo)致ApoA-Ⅰ類(lèi)模擬肽主要集中在表型功能方面的研究，缺乏藥物作用分子機(jī)制探索，給ApoA-Ⅰ類(lèi)模擬肽藥物研發(fā)推進(jìn)帶來(lái)一定困難。同時(shí)，目前也有基于ABCA1、LCAT和SR-B1等與HDL互作機(jī)制的藥物研發(fā)，也面臨類(lèi)似困難。此外，對(duì)于ApoA-Ⅰ類(lèi)模擬肽類(lèi)藥物，缺乏科學(xué)全面的藥效評(píng)價(jià)體系，有待深入研究解決。未來(lái)隨著ApoA-Ⅰ和HDL結(jié)構(gòu)和功能的深入研究，RCT相關(guān)分子互作機(jī)制的深入闡釋?zhuān)貙⒋龠M(jìn)基于ApoA-Ⅰ結(jié)構(gòu)和功能的模擬肽類(lèi)抗As藥物研發(fā)，造福人類(lèi)健康。