曾永明，凌經昌，陳松武，欒 潔，何京明，周麗珠

（1.廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學研究院，廣西南寧530002；2.廣西壯族自治區(qū)林產品質量檢驗檢測中心，廣西南寧530022；3.憑祥出入境檢驗檢疫局，廣西憑祥532600）

0 引言

實驗室能力驗證是指認可機構為確保實驗室維持較高的校準和檢測水平而對其能力進行考核、監(jiān)督和確認的一種活動，對于提升實驗室檢測能力有著十分重要的意義，是評價實驗室檢測結果真實水平的有效手段，也是實驗室質量管理體系持續(xù)改進和不斷提高的有效措施。作為第三方認可機構，每年上級組織的能力驗證必須參加。針對如何保證農產品農藥殘留能力驗證實驗結果滿意的關鍵點進行探討分析。樣品前處理采用NY/T 761[1]的方法，提取液的過濾要用定性濾紙或脫脂棉，提取液過濾后靜置時間控制在30～40 min，吸取10 mL乙腈液體時要準確，凈化步驟的水浴溫度要嚴格按照方法要求的溫度。檢測結束后，對結果進行驗證，采用盲樣的空白基質加標和盲樣空白基質配的辦法，分析判斷結果準確性，得出真值，上報能力驗證結果。

1 試驗部分

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器與設備

T18型均漿機，IKA儀器有限公司產品；GC-2010Plus型氣相色譜儀，日本島津公司產品；SHRtx-1701型色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25μm毛細色譜柱）、TD5A-WS型離心機，湘儀離心機儀器有限公司產品；WNV-10G型氮吹儀，博納艾杰爾科技有限公司產品。

1.1.2 試劑與材料

乙腈（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉（分析純）。

2種農藥標準品：甲基對硫磷（Parathionmethyl）、水胺硫磷（Isocarbophos），農業(yè)部環(huán)境保護科學監(jiān)測研究所提供，質量濃度均為100μg/mL。

1.2 試驗方法

采用《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》(NY/T 761—2008)中第1部分：蔬菜和水果中有機磷類農藥多殘留的測定進行檢測[1]。

1.3 試驗原理

采用乙腈提取竹筍考核樣中的甲基對硫磷和水胺硫磷，提取溶液經過濾、靜置分層、氮吹濃縮后，再用丙酮溶解定容，用GC-2010Plus型氣相色譜儀的火焰光度檢測器（FPD）進行檢測。用外標法進行定性和定量[1]。

1.4 混合標準工作溶液的配置

根據甲基對硫磷和水胺硫磷的標準物質證書的定值含量進行配置[2]，首先確定甲基對硫磷和水胺硫磷標準溶液線性范圍，它會影響定量結果的準確性和線性系數[3]。選擇4個質量濃度點，考核樣品的質量濃度最好在曲線的中點，以便定量準確。具體線性范圍根據檢測考核樣品質量濃度來確定。

分別吸取甲基對硫磷和水胺硫磷標準溶液100μL于10 mL容量瓶中，用丙酮稀釋定容，配制成質量濃度為1μg/mL的混合工作標準溶液，保存在4℃冰箱中。檢測時通過稀釋混合工作溶液得到0.10，0.15，0.20，0.30μg/mL共4個質量濃度點的混合標準工作溶液，隨考核樣品進行氣相色譜分析。

1.5 色譜條件

（1）色譜柱。SH-Rtx-1701（30 m×0.25 mm×0.25μm）。

（2）色譜柱溫度。80℃保持2 min，以每分鐘15℃速度上升到210℃保持7 min，再以每分鐘25℃上升到250℃保持10min，進樣量1μL，進樣口溫度250℃，不分流進樣，檢測器280℃，氮氣流量30 mL/min，柱流量2 mL/min，空氣流量62.5 mL/min，氫氣流量90 mL/min。

2 結果與分析

2.1 前處理

此次能力驗證的樣品為已粉碎的干竹筍樣品，由能力驗證組織機構加入甲基對硫磷和水胺硫磷農藥，實驗室收到1個竹筍考核樣品及1個竹筍空白樣品，樣品質量各約10 g。

分別稱取竹筍考核樣品和筍空白樣品各2.0 g于高型燒杯中，加入18 mL蒸餾水復原至竹筍鮮樣狀態(tài)，然后加入50.00 mL乙腈，勻漿2 min，用定型濾紙或脫脂棉過濾到裝有5～7 g氯化鈉的具塞量筒中，塞上塞子，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈和水相分層[4]。吸取10.00 mL乙腈溶液，放入15 mL離心管中，在WNV-10G氮吹儀上調節(jié)水浴溫度不大于50℃，緩緩通入氮氣吹至近干，加入5.0 mL丙酮，蓋上蓋子渦旋1 min，過0.2μm濾膜，裝入樣品瓶中，待氣相色譜測定[1]。

2.2 上機檢測

上機檢測氣相色譜時，設置色譜柱溫采取為程序升溫：開始溫度設定為80℃，保持2 min后，以10℃/min速率升至200℃，保持0.2 min，然后以2℃/min速率升至250℃；進樣口溫度250℃；檢測器（FPD）溫度280℃；載氣（高純氮99.999%）流速60 mL/min，氫氣流速85 mL/min，空氣流速45 mL/min；采用不分流全注入進樣；進樣體積1μL。

用甲基對硫磷和水胺硫磷標準品配制成質量濃度為50μg/L的混合標準溶液，進行色譜檢測，它們的保留時間分別為：甲基對硫磷（Parathion-methyl）20.087 min、水胺硫磷（Isocarbophos）21.931 min。

2種有機磷農藥出峰順序見圖1。

圖1 2種有機磷農藥出峰順序圖

2.3 2種有機磷農藥標準曲線

甲基對硫磷標準曲線見圖2，水胺硫磷標準曲線見圖3。

2.4 竹筍考核樣品分析結果結果

竹筍考核樣品分析結果見表1。

2.5 判斷結果準確性

圖2 甲基對硫磷標準曲線

圖3 水胺硫磷標準曲線

根據上述結果，結果的準確性，通常采用加標回收率的辦法[5-6]，由于蔬菜中農殘多有基質效應，得出的數據可能比實際加標量要大得多，采用2種方法來驗證。

2.5.1 用空白基質配標液

空白盲樣前處理結束時，以5 mL溶劑來定容，移入2 mL進樣瓶中后，將剩余3 mL液體配標液，即為基質配標液[7]。用其作模板，計算樣品中的農藥含量。

2.5.2 用空白基質做加標標準曲線

竹筍空白基質樣約10 g，稱取2.0 g樣品后，還要剩約8 g，稱4個1.0 g竹筍空白基質樣品，分別加入上面1.4中的混合工作溶液100，150，200，300μL，嚴格按照上述前處理方法重做1遍，得出空白基質加標標準曲線，再重新計算檢測結果[8]。

2.6 上報結果并通過

根據以上用空白基質配標液和空白基質加標標準曲線計算檢測結果，分析判斷結果在合格范圍內，上報能力驗證結果：甲基對硫磷含量0.52 mg/kg，水胺硫磷含量1.10 mg/kg；1個月后有Z值反饋，結果為滿意。

3 結論

要想通過竹筍中農殘的能力驗證，樣品前處理采用NY/T 761[1]的方法，必須注意：提取液的過濾要用定性濾紙或脫脂棉，提取液過濾后靜置時間控制在30～40 min，吸取10 mL乙腈液體時要準確，凈化步驟的水浴溫度要嚴格按照方法要求的溫度[9]，氮吹切記不要吹的太干，要在氮吹儀旁邊一直盯著，吹到潮乎乎為宜，最后定容5 mL要準確。

表1 竹筍考核樣品分析結果

前處理結束后，驗證結果很重要，不同的蔬菜不同的農藥，基質效應都不一樣，回收率也不一樣，要先進行粗篩，先得出農藥品的大概含量，然后選擇與盲樣品種一樣的蔬菜里加標，這時采用盲樣的空白基質配標液和空白基質加標畫標準曲線為最佳[10]。

為防止待測液中甲基對硫磷和水胺硫磷衰減，在前處理結束后樣品需及時上機檢測。上機測定順序：先測試劑空白和樣品空白，再由低濃度到高濃度依次測定標準溶液，然后加測一次試劑空白，最后測定考核樣品[11]。每個樣品必須上機平行測定2次，以便降低因儀器不穩(wěn)定造成的誤差。結果取平均值，避免人為剔除平行性差的樣品結果。

最后，認真分析樣品檢測全過程及色譜圖、計算結果等，細致比較試劑空白和樣品空白基質的色譜圖，更要判別考核樣品中添加濃度含量低的農藥，防止出現漏判、誤判，確保此次能力驗證結果滿意。