高 源，成 瑜，李朝遠，姚恩生，田 鳳，王 宏

(石河子大學醫(yī)學院，新疆 石河子 832000)

腦白質高信號也稱腦白質疏松癥(leukoaraiosis，LA)，是腦小血管病的常見影像學表現(xiàn)之一，最早由Hachinski等于1987年提出[1]。LA通常在頭顱磁共振成像(MRI)上被發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)在被認為是中風、癡呆和死亡的危險因素[2]。它是一個影像學術語，指腦室周圍及半卵圓中心腦白質的彌漫性非特異性損害，CT上呈雙側對稱性低密度病灶，或T1加權像呈等或低信號、T2加權像呈高信號、液體衰減反轉恢復序列(fluidattenuated inversion recovery,FLAIR)為高信號的改變。腦白質高信號(white matter hyperintensities ，WMHs)的全人群發(fā)病率范圍為39%～96%[3]，正常老年人群也可見到[3-5]。嚴重的WMHs(Fazekas 5～6分) 患者臨床多出現(xiàn)進行性認知功能下降[6]、情緒改變[7]、步態(tài)異常、尿失禁[8]等表現(xiàn)，可顯著影響患者的生活質量，因此近些年愈發(fā)獲得學者和臨床醫(yī)生的重視。3-NT(3-nitrotyrosine，3-NT)是酪氨酸氧化產(chǎn)物之一,由于3-NT的結構相對比較穩(wěn)定,一直都被作為過氧亞硝基陰離子(ONOO-)生成的生物學標志物[9]，也被作為蛋白質損傷的標志性產(chǎn)物[10]。有研究證實,蛋白質氧化硝基化后產(chǎn)生的3-NT，會對蛋白質的結構和功能造成破壞,還會對細胞和組織的內(nèi)環(huán)境平衡產(chǎn)生影響[11]。目前有研究表明，3-NT作為蛋白質氧化產(chǎn)物，可通過氧化和硝化作用影響細胞糖代謝及線粒體功能，導致神經(jīng)元變性、壞死，參與WMHs改變與多類神經(jīng)退行性疾病呈正相關[12]，然而WMHs與3-NT相關研究報道甚少。本研究納入2018年10月～2019年5月石河子大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院者中WMHs患者122例，探討了WMHs患者血漿3-NT的表達及其與認知功能改變的相關性，現(xiàn)報告如下。

1 對象與方法

1.1一般資料：納入2018年10月～2019年5月就診于石河子大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院且已完善頭顱MRI檢查，明確有WMHs者122例。并依照簡易精神狀態(tài)量表(Mini-Mental State Examination，MMSE)[13-15]將患者分為僅WMHs組60例，其中男38例，占49.4%，女22例，占48.9%，年齡(66.3±12.808)歲；高血壓者44例，非高血壓者16例；冠心病者13例，非冠心病者47例；糖尿病者17例，無糖尿病者43例；吸煙者26例，不吸煙者34例；飲酒者6例，不飲酒者54例；WMHs合并認知功能減退組62例，其中男39例，占50.6%，女23例，占51.1%,年齡(69.47±11.457)歲；高血壓者43例，非高血壓者19例；冠心病者14例，非冠心病者48例；糖尿病者15例，無糖尿病者47例；吸煙者20例，不吸煙者42例；飲酒者16例，不飲酒者46例。兩組間在性別、年齡、高血壓、冠心病、糖尿病、吸煙、飲酒等方面比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，有可比性。本次研究經(jīng)過我院醫(yī)學倫理委員會同意。

1.2入選與排除標準：納入標準：①經(jīng)頭顱MRI檢查確定有WMHs的患者；②所有入組患者均能配合完成MMSE檢查。排除標準：①頭顱MRI或CT已確診的缺血性腦卒中和腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血；②合并中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘疾??；③合并中樞神經(jīng)系統(tǒng)及全身其他系統(tǒng)感染；④合并嚴重的心、肺、肝、腎及腫瘤性疾?。虎莺喜⒆陨砻庖咝约膊?；⑥既往有嚴重焦慮抑郁等疾病；⑦中專以上文化程度。本研究經(jīng)石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院倫理委員會審核批準，患者及家屬均知情并簽署同意書。

1.3觀察指標：所有入組對象均記錄性別、年齡、身高、體重、血壓及高血壓、冠心病、糖尿病病史及吸煙、飲酒史等一般資料；抽取清晨空腹靜脈血送檢：血糖(GLU)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、三酰甘油(TG)、同型半胱氨酸(Hcy)等指標，由醫(yī)院檢驗科全自動生化儀分析測定；于患者入院后第1天清晨抽取受試者空腹靜脈血5 ml，離心獲得上層血清保存于-80℃冰箱待測。采用上海研謹生物科技有限公司的人3-NT酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用雙抗體夾心法分別測定各組血清3-NT水平。所有操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結果

2.1WMHs組與WMHs合并認知功能改變組基本生化指標比較：除TG外WMHs組、WMHs合并認知功能改變組之間的其他基本生化指標比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 WMHs組和WMHs合并認知功能改變組基本生化指標的比較

2.2WMHs組與WMHs合并認知功能改變組血漿3-NT濃度比較：WMHs合并認知功能改變組血漿3-NT濃度為(98.439 9±23.14)nmol/L，WMHs組為(49.713 8±4.766 30)nmol/L，WMHs合并認知功能改變組血漿3-NT濃度明顯高于單純WMHs組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兩組血TG比較，WMHs合并認知功能改變組為(1.622 9±0.784 77)mmol/L，WMHs組(1.360 5±0.591 47)mmol/L，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.3多因素Logistic回歸分析：將上述單因素分析中差異有統(tǒng)計學意義的變量納入Logistic多元回歸分析，結果顯示，3-NT是WMHs患者合并認知功能改變的獨立危險因素(P<0.05)，TG在兩組之間是有差異的，但不是WMHs患者發(fā)生認知功能改變的獨立危險因素。見表2。

表2 WMHs合并認知功能改變的多因素Logistic回歸分析

3 討論

有研究指出，高TG可影響老年人的認知功能[16]。3-NT與認知功能障礙的具體作用機制尚不明確，相關性分析結果提示TG水平為認知功能下降的危險因素[17]。趙麗靜等人指出，高TG可加速動脈疾病的發(fā)生，間接促使腦局部白質灌注不足，導致WMHs的發(fā)生，腦小血管病變可引起認知功能下降[18]。微血管或小血管功能障礙伴或不伴神經(jīng)系統(tǒng)癥狀可能是高TG誘發(fā)認知功能下降的潛在原因，但具體的作用機制尚有待進一步研究。

WMHs以軸突-膠質完整性喪失和脫髓鞘為特征,是導致血管認知障礙的重要原因。大多數(shù)臨床和放射學研究表明，WMHs的程度與老年人的認知障礙和衰退有顯著的關聯(lián)[19]。大量研究報道，活性氮氧化物水平的增加與WMHs及認知功能減退有著密切的關聯(lián)。Butterfield等對遺忘型早期認知功能障礙患者的研究發(fā)現(xiàn)，血3-NT濃度較其他類型認知功能障礙患者明顯增高[20]。這可能與認知功能減退患者氧化應激和硝化應激導致血漿一氧化氮濃度升高，進一步生成3-NT有關[21]。酪氨酸硝化是將酪氨酸芳香環(huán)上的C3氫原子與硝基置換，形成3-NT。而Sinem等研究還發(fā)現(xiàn)血漿一氧化氮水平與3-NT水平成明顯正相關[22]。推測其機制可能為:認知功能減退的發(fā)病機制與氧化應激密切相關，3-NT和其他硝基化的化合物一樣，可以被酶還原為相應的硝基陰離子自由基(ArNO2-·)，然后被分子氧化生成O2-·并再生出ArNO2。因此，在體內(nèi)，硝基酪氨酸可能通過重復氧化還原循環(huán)來促進氧化反應[23]。氧化應激會參與到中樞神經(jīng)病變的發(fā)展過程中，自由基會攻擊體內(nèi)正常細胞，使體內(nèi)的蛋白質過氧化，從而導致膜結構的改變甚至破壞，患者的神經(jīng)元會遭受到不可逆性的死亡[17]。

本研究發(fā)現(xiàn)，WMHs患者血漿3-NT濃度、TG水平與MMSE評分成明顯負相關，即WMHs患者血漿3-NT濃度、TG水平越高，MMSE評分越低，提示血漿3-NT濃度、TG水平可反映WMHs患者認知功能損害程度。Logistic多元回歸分析提示TG不是WMHs患者發(fā)生認知功能改變的獨立危險因素。

綜上所述，本研究提示在WMHs患者中存3-NT濃度變化，高3-NT血癥可促進認知功能減退的發(fā)生，因此降低循環(huán)中3-NT水平可能成為治療WMHs患者認知功能減退的方法，檢測3-NT的血液濃度有望成為預測WMHs患者認知功能改變發(fā)生的重要生物學指標。本研究只能得到3-NT與WMHs患者認知功能改變的相關性，不能證實WMHs、認知功能改變和3-NT的因果關系，尚未就血清3-NT水平與WMHs患者認知功能改變的嚴重程度及預后等方面進行研究。此外本研究樣本量較小，接下來需進一步擴大樣本量及多時間段動態(tài)觀察WMHs患者不同認知功能水平的血清3-NT水平，以更好了解其在WMHs患者認知功能改變中可能的作用。