亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        電解水在小龍蝦殼脫礦物質和蛋白質中的應用

        2021-02-05 05:53:36張建旭王旭旭孫一丹龔建剛桑亞新孫紀錄
        中國食品學報 2021年1期
        關鍵詞:蝦殼幾丁質電解水

        張建旭,王旭旭,孫一丹,龔建剛,桑亞新,孫紀錄*

        (1 河北農業(yè)大學食品科技學院 河北保定071001 2 承德市水產技術推廣站 河北承德067000)

        幾丁質是僅次于纖維素的第二大天然多糖,是2-氨基-2-脫氧-D-葡聚糖和2-乙酰氨基-2-脫氧-D-葡聚糖由β-1,4-糖苷鍵連接而成,廣泛存在于甲殼類動物殼中[1]。幾丁質可以作為許多生物基材料的成分[2]。它在許多領域作為具有高潛力的新功能生物材料而受到極大關注[3]。

        從甲殼類動物殼中提取幾丁質的傳統(tǒng)方法是分別使用鹽酸和氫氧化鈉去除殼中的礦物質(主要為CaCO3)和蛋白質,之后脫色。該方法雖然效率高,但是產生大量的酸堿廢液,造成環(huán)境問題,增加生產成本[4]。電解水(Electrolyzed water,EW)是在特殊的裝置中電解稀氯化鈉溶液而得到的酸性電解水(Acidic electrolyzed water,AEW)和堿性電解水(Basic electrolyzed water,BEW)的總稱[5]。近年來,EW 在食品工業(yè)領域廣泛用于抗菌和保鮮[6-7]。利用EW 提取甲殼類動物殼中的幾丁質,迄今鮮有報道。

        我國小龍蝦產量大,其可食部分少,蝦殼等廢棄物多,而蝦殼中富含幾丁質。本實驗室曾使用BEW 脫除蟹殼中的蛋白質[8]。本研究擬在前期試驗的基礎上,分別使用AEW 和BEW 對小龍蝦殼進行脫礦物質和脫蛋白質研究,并分析幾丁質的理化性質和結構,旨在為從蝦殼中提取幾丁質開發(fā)一種新型環(huán)保的生產工藝。

        1 材料與方法

        1.1 主要材料

        蝦殼,保定市場售小龍蝦;其它試劑均為分析純級。

        1.2 主要儀器設備

        電解水發(fā)生器,河北農業(yè)大學食品科技學院食品微生物學實驗室自制;752N 紫外可見分光光度計,上海佑科儀器儀表有限公司;XL-100 型馬弗爐,河南市鶴壁億欣儀器儀表有限公司;WSC-2B 便攜式精密色差儀,上海儀電物理光學儀器有限公司;SU8010 型掃描電子顯微鏡,日本Hitachi公司;TG/DTAA6200 熱重分析儀,精工電子納米科技有限公司;Spectrum65 傅立葉紅外變換光譜儀,鉑金埃爾默儀器有限公司;XD6 多晶X 射線衍射儀,北京普析通用。

        1.3 試驗方法

        1.3.1 蝦殼粉制備 清洗蝦殼,放入60 ℃電熱鼓風干燥器中,干燥至恒重。將烘干的蝦殼粉碎,過120 目篩,制得蝦殼粉,密封,干燥貯存?zhèn)溆谩?/p>

        1.3.2 EW 處理蝦殼粉

        1) AEW 處理蝦殼粉 向電解水發(fā)生器的酸性、堿性電解槽中分別加入1 L 的NaCl 溶液,稱取20 g 蝦殼粉放入酸性電解槽中。接通電源進行處理,電壓設為20 V。每隔0.5 h 測溶液pH 值及鈣離子含量,直至鈣離子含量趨向穩(wěn)定,停止電解,記錄處理時間。將處理液5 000 r/min 離心10 min,沉淀洗滌至中性,60 ℃干燥至恒重,即得脫去礦物質的蝦殼粉。

        2) BEW 處理蝦殼粉 操作過程與1.3.2(1)基本相同。其區(qū)別在于將蝦殼粉放入堿性電解槽中,處理期間測定處理液的pH 值及蛋白質含量,所得為脫蛋白質的蝦殼粉。

        3) AEW 和BEW 聯(lián)合處理蝦殼粉 對蝦殼粉進行AEW(2%NaCl 制備)處理脫礦物質,操作過程與1.3.2(1)基本相同,將脫去礦物質的蝦殼粉進行BEW(2%NaCl 制備)處理脫蛋白質,操作過程與1.3.2(2)基本相同,所得為幾丁質。

        1.3.3 傳統(tǒng)無機酸堿法制備幾丁質 參考王娟娟[9]的方法。

        1.3.4 鈣離子含量測定 參照國標GB 7476-1987《水質鈣的測定EDTA 滴定法》[10]方法測定。

        1.3.5 BEW 處理液中蛋白質含量測定 采用紫外吸收法中的直接法[11]測定。

        1.3.6 灰分測定 參照國標GB 5009.4-2016《食品安全國家標準食品中灰分的測定》[12]方法測定。

        1.3.7 固體樣品中蛋白質含量測定和蛋白質脫除率的計算 參考韓曉梅等[8]的方法。

        1.3.8 顏色測定 取不同EW 處理的粉末狀樣品約2 g,平鋪于稱量紙上,壓平,隨機選取3 個點用色差儀測量其L*、a*、b*值,以AEW 和BEW 聯(lián)合處理的樣品為對照,測定其它樣品的ΔL*、Δa*、Δb*及ΔE 值并進行比較[13]。

        1.3.9 水分含量測定 參照GB 5009.3-2016《食品安全國家標準食品中水分的測定》[14]方法測定。

        1.3.10 特性黏度及黏均分子量的測定 黏均分子量測定參照Hong 等[15]和Poirier 等[16]的方法。選擇5%LiCl/DMAc 作為幾丁質的溶劑,采用參數是α=0.95 和K=7.6×10-5dl/g。特性黏度測定參照蔣挺大[17]的方法,采用外推法計算特性黏度。

        1.3.11 脫乙酰度測定 采用行業(yè)標準《甲殼素與殼聚糖》中附錄A 的方法[18]。

        1.3.12 掃描電鏡觀察 將干燥樣品均勻地固定在貼膠的電鏡進樣臺上,真空條件下離子濺射噴金,采用掃描電子顯微鏡拍照觀察樣品結構。

        1.3.13 熱重分析 參照《中華人民共和國藥典》第4 部0661 熱分析法中的熱重分析方法,設定升溫范圍30~600 ℃,升溫速率10 ℃/min[19]。

        1.3.14 傅立葉變換紅外光譜分析 采用壓片法制備樣品,在Spectrum 65 傅立葉紅外變換光譜儀上掃描,掃描范圍4000~400 cm-1,掃描次數4次。

        1.3.15 X 射線衍射分析 使用XD6 多晶X 射線衍射儀,掃描范圍為3°~60°,掃描速度8°/min。根據公式(1)計算結晶指數(CrI,%)。

        式中,I100——2θ≌19°處的最大強度;Iam——2θ≌14°處的非晶衍射強度[15]。

        1.4 數據處理

        用SPSS Statistics 22 進行誤差分析和顯著性分析。

        2 結果與分析

        2.1 AEW 對小龍蝦殼的脫礦物質作用

        在本研究的預試驗中,考察了用0.1%和1%的NaCl 分別制備AEW,對蝦殼粉進行處理。結果表明,用0.1%NaCl 制備的AEW 產酸量小而且緩慢,脫礦物質作用很差;而采用1%NaCl 制備的AEW 產酸量提高,速度快,有明顯的脫礦物質作用。因此,在本研究中,考察了1%和2%的NaCl 制備的AEW。

        由圖1可知,2%NaCl 制備的AEW 處理液的pH 值從9.99 下降到1.98,然后趨于穩(wěn)定;1%NaCl制備的AEW 處理液的pH 值從9.99 下降到2.37后又上升到4.76,然后趨于穩(wěn)定,其原因可能與Cl-的耗盡有關。隨著電解時間的延長,Cl-不斷轉化為Cl2,其中一部分散發(fā)于空氣中,一部分溶于水中,造成低pH 值;同時,蝦殼里的碳酸鈣會消耗H+,使pH 值上升。在本研究中,也曾嘗試進一步提高NaCl 濃度,然而,在更高濃度下制備的AEW 對電解槽的離子交換膜損害很大,處理過程中經常引起交換膜的穿孔滲漏。因此,本研究沒有使用更高濃度的NaCl。

        由圖2可知,1%和2%NaCl 制備的AEW 處理液中的Ca2+濃度從起始的244 mg/L 分別增加到2 015 mg/L 和3 100 mg/L,并分別在330 min 和270 min 趨于穩(wěn)定,表明AEW 可有效脫除蝦殼粉中的CaCO3,制備AEW 的NaCl 濃度對CaCO3的脫除具有明顯影響。

        圖1 AEW 處理期間pH 值的變化Fig.1 The pH value change during AEW treatment

        圖2 AEW 處理期間Ca2+含量變化Fig.2 The change of calcium ion content during AEW treatment

        由表1可知,經1%NaCl 與2%NaCl 制備的AEW 處理的蝦殼粉,灰分分別從起始的53.10%下降到13.70%和0.77%,礦物質脫除率分別達到86.08%和99.59%,表明AEW 對蝦殼粉具有強大的脫礦物質作用,2%NaCl 比1%NaCl 制備的AEW 更為有效,這也驗證了圖2的結果。

        2.2 BEW 對小龍蝦殼的脫蛋白質作用

        由圖3可知,在BEW 處理蝦殼粉的過程中,1%與2%NaCl 制備的BEW 處理液的pH 值由10.07 分別上升至13.11 和13.70 左右,后者的pH值略高一些,這將更有利于蛋白質的脫除。

        由圖4可知,隨著電解時間的延長,1%與2%NaCl 制備的BEW 處理液中的蛋白質含量增加,表明發(fā)生了脫蛋白。1%NaCl 制備的BEW 處理液中蛋白質濃度從90 min 開始增加,在300 min 達到0.31 mg/mL,然后處于平穩(wěn)狀態(tài);而2%NaCl 制備的BEW 處理液中蛋白質濃度從0 min 就開始增加,至240 min 時增加速度趨于恒定,表明更高的堿性環(huán)境(圖3) 更適于對蝦殼粉蛋白質的脫除。

        表1 AEW 處理后蝦殼中的灰分及礦物質脫除率Table 1 Ash content and mineral removal rate of crawfish shell after AEW treatment

        圖3 BEW 處理期間pH 值的變化Fig.3 The change of pH value during BEW treatment

        圖4 BEW 處理期間蛋白質含量的變化Fig.4 The change of protein content during BEW treatment

        由表2可知,1%和2%NaCl 制備的BEW 處理后的蝦殼粉中蛋白質含量分別由處理前的16.97%降至7.93%和2.16%,蛋白質脫除率分別為65.53%和91.31%,表明BEW 能有效脫除蝦殼中的蛋白質,后者的脫蛋白效果更好,這與圖4的結果基本一致。

        表2 BEW 處理后小龍蝦殼中的蛋白質及其脫除率Table 2 Protein content and its removal rate of crawfish shell after BEW treatment

        2.3 AEW 和BEW 聯(lián)合處理小龍蝦殼制備幾丁質

        由圖5可知,2%NaCl 制備的BEW 處理液中蛋白質的濃度在270 min 后不再上升,達到3.06 mg/mL,這是因為經過AEW 處理后的蝦殼中的蛋白質沒有了礦物質的束縛,再經BEW 處理時就較容易就被脫下。

        圖5 聯(lián)合處理工藝中BEW 處理階段的蛋白質含量的變化Fig.5 The change of protein content during BEW treatment of combination process

        由表3可知,由2%NaCl 制備的AEW 和BEW 聯(lián)合處理后的蝦殼粉,礦物質脫除率和蛋白質脫除率分別達到99.65%和98.31%;灰分和蛋白質含量分別為0.86%和1.31%,已經符合幾丁質生產標準;與傳統(tǒng)工藝相比,其脫除效率非常接近。因此,利用2%NaCl 制備的AEW 和BEW 聯(lián)合處理蝦殼粉,從中提取幾丁質,可作為一種新的生產方法。其總處理時間確定為9 h,其中AEW 處理時間為270 min(圖2),BEW 處理時間也為270 min(圖5)。

        表3 電解水處理工藝和傳統(tǒng)工藝的效率比較Table 3 Comparison of efficacy of EW treatment process and traditional process

        2.4 EW 處理對小龍蝦殼的脫色作用

        在本研究中,觀察到EW 處理除了能夠脫除蝦殼粉中的礦物質和蛋白質,還有很好的脫色作用。

        由圖6可知,AEW 處理蝦殼粉后,顏色變化明顯,表明脫色主要發(fā)生在AEW 處理過程中。這可能是因為制備AEW 時生成的Cl2和ClO-具有漂白作用。這將省去傳統(tǒng)方法中的脫色過程。

        從表4可知,在總色差方面,蝦殼粉較大,其次是傳統(tǒng)法處理的蝦殼粉,然后是BEW 處理的蝦殼粉,AEW 處理的樣品較小,而2%NaCl 制備的AEW 處理后的樣品色差值最小,進一步證明脫色主要發(fā)生在AEW 處理中。

        2.5 幾丁質的理化性質和結構表征

        2.5.1 一般理化性質 脫乙酰度是區(qū)分幾丁質與殼聚糖的主要參數,也是影響其物化性質的主要原因[20]。分子質量則直接決定了幾丁質及其衍生物的黏度[17],對幾丁質的利用至關重要。

        圖6 小龍蝦殼粉在不同處理后的顏色變化Fig.6 Changes in color of crawfish shell powder after different treatments

        表4 不同處理后小龍蝦殼粉的色差值Table 4 Chromaticity values of crayfish shell powders after different treatments

        表5 EW 處理工藝和傳統(tǒng)法制備的幾丁質的一般理化性質Table 5 Physicochemical properties of chitin prepared by EW treatment process and traditional method

        由表5可知,傳統(tǒng)法和EW 處理工藝制備的幾丁質的分子質量和脫乙酰度分別為550,85 ku和27.36%,12.88%,后者具有較低的分子質量和脫乙酰度。這可能是因為AEW 中持續(xù)產生H+和ClO-,造成糖苷鍵的酸水解和氧化降解,從而產生低分子質量的幾丁質;傳統(tǒng)法中的高濃度NaOH溶液處理是發(fā)生脫乙?;闹饕?。因此,EW處理工藝生產的幾丁質是一種新型的幾丁質,有助于其應用領域的拓展。

        2.5.2 熱重分析和差熱分析 由圖7可知,3 種樣品的熱重分析(Thermogravimetric analysis,TGA)曲線變化趨勢大致相同。不同的是,EW 法制備的幾丁質(圖7a) 和傳統(tǒng)法制備的幾丁質(圖7b)的質量隨溫度的變化曲線有較明顯梯度變化,質量損失均為80%~90%,而小龍蝦殼粉(圖8c)的變化曲線較為平緩,質量損失為35%~40%。這是因為蝦殼粉經過脫礦物質和蛋白質處理后剩下的幾丁質組分單一,從而表現出晶體性質;而蝦殼粉成分復雜,使得熱分解過程變化緩慢。3 種樣品的差熱分析(Differential thermal analysis,DTA)曲線的變化均隨其TGA 曲線的變化呈規(guī)律性,圖7a和7b 中均出現了凹點,這是短時間吸熱所致,對應溫度是幾丁質降解溫度,分別為382 ℃和389℃,表明EW 法制備的幾丁質比傳統(tǒng)法制備的幾丁質更易分解,這可能與前者的較低分子質量有關。圖7c 中未明顯出現這樣的凹點。因此,EW 法與傳統(tǒng)法制備的幾丁質有相似的結構和熱穩(wěn)定性。

        2.5.3 掃描電鏡觀察 EW 法制備的幾丁質纖維并排排列,略有散亂(圖8a);傳統(tǒng)法制備的幾丁質呈平滑多孔結構(圖8b);蝦殼粉呈現層狀堆積結構,雖然也有一些細孔狀結構,但更像是由纖維鑲嵌粘連雜質組成的實體(圖8c)。無論是EW 法還是傳統(tǒng)法,從小龍蝦殼中提取的幾丁質均呈網狀多孔結構,這在吸附染料和金屬離子等方面具有潛在應用價值[21-22]。

        2.5.4 傅里葉變換-紅外光譜 圖9A 和9B 都出現幾丁質的特征吸收峰,一系列窄吸收峰帶表現出典型的結晶多糖譜帶。1 660 cm-1和1 626 cm-1兩個吸收峰是α-幾丁質在酰胺Ⅰ譜帶(C=O)的特征吸收峰,表明2 種方法提取的幾丁質均為α-幾丁質;1 558 cm-1處的吸收峰屬于酰胺Ⅱ譜帶(NH);1 313 cm-1處的吸收峰屬于酰胺Ⅲ譜帶(CN)。對比圖9A、9B 和9C,EW 法與傳統(tǒng)法制備的幾丁質結構基本相似,而蝦殼粉在3 種酰胺帶上均未出現明顯吸收峰,這是因為蝦殼粉中的雜質影響了幾丁質的特定吸收峰。

        圖7 熱重分析和差熱分析曲線Fig.7 TGA/DTA curves

        2.5.5 X-射線衍射 圖10A 和10B 反映出幾丁質顯著的結晶信號,純度再次得到驗證。圖10C 有CaCO3的衍射峰,圖10A 和10B 都無CaCO3的峰,同樣表明2 種方法都脫除了CaCO3。EW 法和傳統(tǒng)法制備的幾丁質的結晶度指數分別為82.48%和78.82%,都遠高于蝦殼粉的45.78%。另外,EW 法制備的幾丁質的結晶度指數略高于傳統(tǒng)法,這與兩者分子質量差異導致分子間和分子內氫鍵不同以及無定形態(tài)幾丁質生成有關[23]。

        圖8 掃描電鏡圖(×5 000)Fig.8 SEM(×5 000)

        圖9 傅里葉變換-紅外光譜Fig.9 FT-IR spectra

        圖10 X-射線衍射圖譜Fig.10 XRD patterns

        3 結論

        本文試驗結果表明,AEW 能夠有效脫除小龍蝦殼中的礦物質,并具有良好脫色作用。BEW 能夠有效脫除小龍蝦殼中的蛋白質。脫除效果與用于制備EW 的NaCl 濃度有關。以2%NaCl 制備的AEW 和BEW 先后對小龍蝦殼連續(xù)處理各270 min,制得符合標準要求的幾丁質。與傳統(tǒng)酸堿法相比,EW 處理工藝制備的幾丁質具有較低的特性黏度、分子質量和脫乙酰度。TGA、TDA、SEM、FT-IR 和XRD 的結果表明,2 種方法制備的幾丁質理化性質和結構具有很高的相似性,也直觀證實了礦物質和蛋白質的脫除。因此,EW 處理工藝是一種用小龍蝦殼制備幾丁質的新方法。

        猜你喜歡
        蝦殼幾丁質電解水
        酸性電解水對早期番茄晚疫病防治具有良好效果
        長江蔬菜(2021年22期)2022-01-12 03:25:36
        產幾丁質酶的無色桿菌ZWW8的發(fā)酵產酶及酶學性質研究
        贏創(chuàng)全新膜技術有望降低電解水制氫的成本
        上海建材(2020年12期)2020-04-13 05:57:52
        響應面優(yōu)化超聲波輔助蝦殼快速脫鹽工藝
        有機酸軟化凡納濱對蝦蝦殼的效果研究
        蝦殼在1-乙基-3-甲基咪唑醋酸鹽離子液體中的溶解特性
        雄一電解水的穩(wěn)定性研究
        長江蔬菜(2018年22期)2018-12-25 12:37:22
        電解水農業(yè)技術的開發(fā)推廣與應用
        長江蔬菜(2018年6期)2018-05-08 07:45:10
        微生物幾丁質酶的研究進展及應用現狀
        中國釀造(2017年8期)2017-09-03 06:20:01
        磷酸鹽緩沖液活化蝦殼材料脫除鎘的初步研究
        亚洲天堂成人av影院| 欧亚精品无码永久免费视频| 色青青女同性恋视频日本熟女 | 欧美成人a在线网站| 女同av免费在线播放| 亚洲不卡高清av网站| 亚洲av永久无码精品放毛片| 国产欧美VA欧美VA香蕉在| 99久久久精品国产性黑人| 丰满又紧又爽又丰满视频| 蜜臀性色av免费| 18禁男女爽爽爽午夜网站免费| 亚洲中文字幕不卡无码| 青青草成人免费在线观看视频| 国产精品中文久久久久久久| 久久精品国产99国产精2020丨 | 99久久精品免费看国产| 亚洲av无码专区在线电影| 久久熟女五十路| 免费人妻精品一区二区三区| 免费av一区二区三区无码| 精品无码专区久久久水蜜桃| 国产乱人伦AⅤ在线麻豆A| 成人一区二区三区国产| 国产综合在线观看| 欧美日韩精品乱国产538| 中文字幕高清一区二区| 大奶白浆视频在线观看| 天天做天天爱天天爽综合网| 亚洲精品aⅴ无码精品丝袜足| 女人天堂av免费在线| 日韩亚洲欧美久久久www综合| 国产成人av 综合 亚洲| 丝袜人妻无码中文字幕综合网 | 国产精品亚洲综合色区韩国| 精品极品视频在线观看| 东北少妇不带套对白| 亚洲人成网站在线播放观看| 少妇激情一区二区三区| 久久精品99国产精品日本| 男受被做哭激烈娇喘gv视频|