付竹梅 劉國杰王培英馬振芝 郭 永
1.濰坊市婦幼保健院,山東 濰坊 261000 2.濰坊市人民醫(yī)院,山東 濰坊 261000
妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是妊娠期常見的合并癥,可引發(fā)各類母嬰并發(fā)癥,導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局。目前GDM的發(fā)病機制尚不完全明確,認(rèn)為與胰島素抵抗(IR)有關(guān),新近研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)脂素、趨化素(chemerin)、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)等脂肪細(xì)胞因子參與IR,在2型糖尿病的發(fā)病中具有重要作用[1]。鑒于此,本文從蛋白質(zhì)表達水平觀察chemerin、NGAL水平,對2018.01~2019.12接收的42例GDM患者及42例糖耐量正常(NGT)孕婦進行研究,觀察兩組胎盤組織中的表達水平,探討這兩種脂肪細(xì)胞因子在GDM發(fā)病過程中的作用。
1.1一般資料 將將2018.01~2019.12本院接收的42例GDM患者(GDM組)及42例糖耐量正常孕婦(NGT組)作為研究對象。GDM組:孕齡22~34歲,平均(26.32±2.81)歲;孕周37~41周,平均(39.12±0.58)周;陰道分娩37例,剖宮產(chǎn)5例。NGT組:孕齡21~34歲,平均(26.19±2.77)歲;孕周37~42周,平均(39.25±0.63)周;陰道分娩35例,剖宮產(chǎn)7例。兩組基礎(chǔ)資料無顯著差異(P>0.05),具有比較價值。
1.2方法 于胎盤娩出后10min內(nèi),取胎盤母體面中央,并避開鈣化、壞死部位,剪取約1cm×1cm×1cm大小的胎盤組織,共3塊,經(jīng)滅菌生理鹽水漂洗后放置于凍存管內(nèi),迅速轉(zhuǎn)移至液氮內(nèi),于-80℃環(huán)境下保存;取胎盤組織約50mg,采用蛋白免疫印跡法檢測胎盤組織中chemerin、NGAL蛋白表達水平:根據(jù)蛋白裂解液說明書進行胎盤組織中的蛋白提液、濃縮;chemerin蛋白、NGAL蛋白電泳后轉(zhuǎn)移至PVDF膜;牛奶封閉液封閉2h,加入稀釋NGAL單克隆抗體,于4℃環(huán)境下孵育過夜;TBST洗膜,加二抗,室溫孵育1h;TBST洗膜,于暗室內(nèi)將發(fā)光液滴于PVDF膜,并用塑料膜包裹,置于化學(xué)發(fā)光儀攝影匣內(nèi)進行電腦操作顯影,并計算灰度值。
1.3觀察指標(biāo) 觀察兩組胎盤組織chemerin蛋白、NGAL蛋白表達水平。
兩組胎盤組織chemerin蛋白、NGAL蛋白表達水平對比差異顯著(P<0.05),見表1。
表1 兩組胎盤組織chemerin蛋白、NGAL蛋白表達水平
chemerin最早于2001年由國外學(xué)者在進行噻唑烷二酮(TZDs)作用機制研究時被發(fā)現(xiàn),屬于一種富含半胱氨酸蛋白的多肽,已被證實是導(dǎo)致IR的原因之一。該研究發(fā)現(xiàn),chemerin主要作用于脂肪、肝臟、骨骼肌等外周靶組織影響胰島素信號通路而導(dǎo)致IR。后隨著研究的深入,發(fā)現(xiàn)chemerin可在脂肪細(xì)胞、胎盤組織中表達:chemerin在脂肪組織中的表達較弱,且在妊娠期無明顯變化;足月胎盤組織中chemerin表達水平高于孕早期絨毛膜組織,GDM患者血清chemerin水平高于正常孕婦,提示胎盤中chemerin的分泌可能是導(dǎo)致GDM患者血清chemerin水平升高的原因,說明chemerin在GDM的發(fā)病中具有重要作用[2]。
NGAL是在中性粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種25kDa糖蛋白,含有178個氨基酸,在腎臟、肝臟、小腸、肺、胎盤中微弱表達,已被證實在子癇前期、2型糖尿病等代謝性疾病中表達水平顯著升高,且其水平與妊娠相關(guān)[3]。有研究發(fā)現(xiàn),GDM患者血清及脂肪組織中NGAL表達水平顯著高于健康孕婦,且與炎癥因子水平呈正相關(guān),推測NGAL可能與GDM相關(guān),但致病機制尚未明確,認(rèn)為NGAL作為脂肪細(xì)胞因子,可參與局部或全身炎性反應(yīng),進而參與炎癥-IR-糖尿病途徑,導(dǎo)致GDM[4]。本研究結(jié)果顯示GDM孕婦胎盤組織chemerin蛋白、NGAL蛋白表達水平均高于糖耐量正常孕婦,差異顯著,提示這兩種脂肪細(xì)胞因子可能參與GDM的發(fā)病過程,與既往的研究一致。
綜上所述,胎盤組織中chemerin、NGAL的異常表達可能與IR有關(guān),并參與GDM的發(fā)病過程。