王若溪,王同生

(1.河南科技大學(xué)應(yīng)用工程學(xué)院臨床醫(yī)療系，河南 三門峽 472000；2.河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 洛陽 471003)

目前，肥胖人群非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的患病率在增加，但學(xué)界對(duì)NAFLD的發(fā)生機(jī)制及其對(duì)肝功能的影響尚不完全清楚[1]。代謝紊亂，腹內(nèi)脂肪增加，在肝臟中均可能表現(xiàn)為NAFLD。內(nèi)臟脂肪組織作為“內(nèi)分泌器官”，導(dǎo)致了病理性肥胖和大量細(xì)胞因子和脂肪因子的分泌[2]。網(wǎng)膜蛋白-1(Omentin-1)和血管緊張素Ⅱ1型受體相關(guān)蛋白內(nèi)源性配體(Apelin)是內(nèi)臟脂肪組織分泌的新型脂肪因子，可能與高胰島素血癥、炎癥、代謝綜合征有關(guān)[3]。本研究旨在探討NAFLD患者Omentin-1、Apelin、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和C反應(yīng)蛋白(CRP)血清水平，并與健康人群進(jìn)行對(duì)照研究，評(píng)估Omentin-1、Apelin與肥胖患者，特別是與中心性肥胖患者的IL-6和CRP關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2014年3月至2019年3月在河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化科門診和住院病房診斷的NAFLD患者，患者均符合NAFLD的診斷標(biāo)準(zhǔn)(參照2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[4]，以下簡(jiǎn)稱指南)。排除標(biāo)準(zhǔn)[4]：(1)有飲酒史或飲酒折合乙醇量男性每周大于140 g，女性每周大于70 g；攝入乙醇量=攝入體積×酒精度×0.8；(2)既往有病毒性肝炎、藥物性肝炎等肝臟病史及其他可導(dǎo)致脂肪肝的特定疾病(如肝豆?fàn)詈俗冃缘?；(3)近期有創(chuàng)傷、手術(shù)、感染史；(4)內(nèi)分泌和代謝或腎臟疾?。?5)應(yīng)用過糖皮質(zhì)激素、食物補(bǔ)充劑(維生素A、C、E)，或服用可能影響脂質(zhì)或碳水化合物代謝的藥物。入選患者由3名固定的、有經(jīng)驗(yàn)的高年資醫(yī)生討論通過。最終納入138例NAFLD患者作為NAFLD組，其中男53例，女85例；年齡35～50歲，平均(43.8±6.1)歲。

選擇同期肝功能正常、經(jīng)B型超聲檢查無脂肪肝癥狀，且無飲酒史或飲酒折合乙醇量符合指南標(biāo)準(zhǔn)的人群作為對(duì)照。最終納入129例無NAFLD健康體檢者作為對(duì)照組，其中男50例，女79例；年齡35～51歲，平均(42.7±7.5)歲。兩組研究對(duì)象年齡、性別比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過，所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1肝臟B超檢查 所有研究對(duì)象由固定的、有經(jīng)驗(yàn)的超聲醫(yī)生應(yīng)用Elegra-Siemens公司(德國(guó))B超儀扇形探頭(3.5～5.0 MHz)進(jìn)行檢查。參照指南中NAFLD的B超診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷[4]。

1.2.2血生化參數(shù)檢測(cè) 于上午8時(shí)空腹采取所有研究對(duì)象的靜脈血，均采用河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心的全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)通用電氣,型號(hào)：BHBMD1600)檢測(cè)空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)。

1.2.3CRP、IL-6檢測(cè) 于上午8時(shí)抽取所有研究對(duì)象的肘靜脈血4 mL,注入干燥試管，在4 ℃下以3 000 r/min離心15 min，分離血漿于-80 ℃下保存待測(cè)。通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)量CRP、IL-6。ELISA試劑盒由上海晶天生物科技有限公司提供，嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行。

1.2.4Omentin-1和Apelin檢測(cè) 于上午8時(shí)抽取所有研究對(duì)象肘靜脈血8 mL,注入加有10%乙二胺乙酸二鈉30 μL及抑肽酶40 μL抗凝劑的試管中，混均，在4 ℃下，以3 000 r/min離心15 min，分離血漿于-80 ℃下保存待測(cè)。通過ELISA測(cè)量Omentin-1和Apelin，嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1兩組臨床特征比較 兩組腰圍(WC)、體重指數(shù)(BMI)、FBG、TCH及LDL-C、TG水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而兩組年齡、性別及HDL-C、ALT、AST水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組臨床特征比較

2.2兩組IL-6、CRP、Apelin和Omentin-1水平比較 NAFLD組IL-6、CRP、Apelin水平均高于對(duì)照組，Omentin-1水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

表2 兩組IL-6、CRP、Omentin-1和Apelin的比較

2.3相關(guān)性分析 Apelin水平分別與BMI、WC、TCH、LDL-C、CRP、IL-6呈正相關(guān)(P<0.01)；與HDL-C、Omentin-1呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。血清Omentin-1水平與WC、CRP、IL-6呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)，與HDL-C呈正相關(guān)(P<0.01)。見表3。

表3 NAFLD相關(guān)參數(shù)與Apelin、Omentin-1的相關(guān)性分析

2.4logistic回歸分析 將是否有NAFLD作為因變量(0為否，1為是)，從NAFLD相關(guān)性的變量中剔除r>0.300的變量，與以O(shè)mentin-1、Apelin、WC、BMI、TCH、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6為自變量進(jìn)行l(wèi)ogistic回歸分析，結(jié)果表明，Omentin-1、Apelin、WC、CRP、IL-6為患者發(fā)生NAFLD的獨(dú)立相關(guān)因素[β：1.084～3.132,比值比(OR)：2.034～5.021，95%置信區(qū)間(95%CI)：1.012～9.397，P<0.01]。見表4。

表4 NAFLD單變量logistic回歸分析

3 討 論

NAFLD是一種除酒精和其他明確的損傷肝因素所導(dǎo)致的以彌漫性肝細(xì)胞大泡性脂肪病變?yōu)橹饕卣鞯母闻K病變，發(fā)病率高達(dá)20%，已成為我國(guó)常見的慢性肝病之一，也是心、腦、血管疾病的一種危險(xiǎn)因素[4]。NAFLD是代謝綜合征的組成部分，轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)正常的非酒精性脂肪性肝病，是NAFLD的早期階段，與胰島素抵抗(IR)合并的糖脂代謝紊亂密切相關(guān)[5]。

研究發(fā)現(xiàn)，在肥胖患者中，Omentin-1基因表達(dá)是下降的[6]。與肥胖人群相比，體型偏瘦的人血Omentin-1濃度更高。低Omentin-1水平與IR、糖耐量減低密切相關(guān)。Omentin-1與肥胖、IR等代謝紊亂呈負(fù)相關(guān)性[7]。Omentin-1通過抑制胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶/NF-κB通路活性，降低炎癥細(xì)胞誘導(dǎo)的內(nèi)皮黏附分子的表達(dá)。因此，網(wǎng)膜素還具有抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化作用[8]。本研究發(fā)現(xiàn)，Omentin-1是NAFLD發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。血清Omentin-1水平與BMI無關(guān)，Omentin-1與WC呈負(fù)相關(guān)，表明在表述身體脂肪分布方面，WC比BMI可能更好些。Omentin-1的血清水平與NAFLD患者的HDL-C水平呈正相關(guān)，提示Omentin-1可能是NAFLD發(fā)生的保護(hù)因素。

Apelin被稱為“脂肪來源的激素”，在大腦、下丘腦和胃中產(chǎn)生，也由人和小鼠脂肪細(xì)胞分泌[9]。研究表明，Apelin在脂肪細(xì)胞的形成過程中有異常的表達(dá)[9]，提示Apelin與脂代謝紊亂及IR有一定的關(guān)系[3]。本研究中，Apelin水平與WC、BMI、THC、LDL-C、CRP、IL-6呈正相關(guān),與HDL-C、Omentin-1呈負(fù)相關(guān)。Apelin是NAFLD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示Apelin可被視為肝臟炎癥過程的生物標(biāo)志物。研究報(bào)道，Apelin在NAFLD發(fā)病機(jī)制中的作用，可能與肝臟中的異位脂肪堆積有關(guān)[10]。當(dāng)脂代謝紊亂損害內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)，富含膽固醇的低密度脂蛋白進(jìn)入內(nèi)皮細(xì)胞后被氧化，氧化的低密度脂蛋白可對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損害，受損害的血管壁可能使血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)的Apelin釋放，引起血漿Apelin水平增高；脂肪變性肝細(xì)胞可表達(dá)脂肪細(xì)胞特異性基因及部分脂肪細(xì)胞因子，可能是引起NAFLD患者血漿Apelin水平增高的另一重要途徑[10]。但脂肪變性時(shí)肝細(xì)胞如何表達(dá)脂肪細(xì)胞因子，還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

IL-6可誘導(dǎo)肝臟合成CRP，還可刺激肝臟分泌極低密度脂蛋白，導(dǎo)致高三酰甘油血癥，腫瘤壞死因子α(TNF-α)和IL-6可參與調(diào)節(jié)其他脂肪因子的分泌[11]。本研究發(fā)現(xiàn)CRP、IL-6分別是Omentin-1、Apelin的獨(dú)立影響因素,推測(cè)Omentin-1、Apelin在NAFLD患者體內(nèi)表達(dá)可能受到IL-6、CRP炎癥因子的影響。推測(cè)IL-6、CRP在NAFLD發(fā)病機(jī)制中的作用可能如下：隨著人脂肪含量(尤其是內(nèi)臟脂肪含量)增多，游離脂肪酸脂解增強(qiáng)，TNF-α、IL-6、CRP等炎癥因子表達(dá)增強(qiáng)，致使機(jī)體處于慢性炎癥狀態(tài)，Omentin-1表達(dá)由于受到炎癥因子的抑制，其表達(dá)水平降低，抗炎作用減弱，致使機(jī)體慢性炎癥持續(xù)存在，并逐漸加重，進(jìn)而促進(jìn)NAFLD的發(fā)生,而Apelin則因?yàn)檠装Y因子的作用，表達(dá)增加，促進(jìn)了NAFLD的發(fā)生[6，12]。

總之，NAFLD患者Omentin-1、Apelin、IL-6、CRP水平與健康者有差異。Apelin可能是NAFLD發(fā)生的預(yù)測(cè)因子，而Omentin-1可能是預(yù)防NAFLD發(fā)生的保護(hù)性因子。其機(jī)制可能與炎癥因子有關(guān)。具體機(jī)制需進(jìn)一步研究。